"B16-F1 epithelioid cells小鼠黑色素瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞傳代培養(yǎng)實驗：體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代，以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞，并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后，由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭，將培養(yǎng)的細胞分散，從容器中取出，以１:２或１:３以上的比率轉移到另外的容器中進行培養(yǎng)，即為傳代培養(yǎng)；細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間，與細胞世代或倍增不同。在一代中，細胞培增３～６次。細胞傳代后，一般經(jīng)過三個階段：游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度，即細胞群的分裂相數(shù)/１００個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于０.２％～０.５％，腫瘤細胞可達３～５％；細胞接種２～３天分裂增殖旺盛，是活力時期，稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期)，適宜進行各種試驗。實驗步驟：１.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出，在超凈工作臺中倒掉瓶內的培養(yǎng)液，加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜)，靜置５～１０分鐘。２.在倒置鏡下觀察被消化的細胞，如果細胞變圓，相互之間不再連接成片，這時應立即在超凈臺中將消化液倒掉，加入３～５ml新鮮培養(yǎng)液，吹打，制成細胞懸液。３.將細胞懸液吸出２ml左右，加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加３ml左右培養(yǎng)液，蓋好瓶塞，送回二氧化碳培養(yǎng)箱中，繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況，傳代后的細胞在２小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上，２～４天就可在瓶內形成單層，需要再次進行傳代。
CWR22R細胞系相關產(chǎn)品：EAhy926細胞、A72細胞、SK_N_BE2C細胞
HBL 100細胞系相關產(chǎn)品：RKOE6細胞、HCT 8細胞、ZR751細胞
SK-MES-1細胞系相關產(chǎn)品：NEC細胞、SU-86-86細胞、Simpson細胞
細胞生長：貼壁
B16-F1 epithelioid cells小鼠黑色素瘤細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細胞傳代方法：１：２傳代
CAL-51細胞系相關產(chǎn)品：WEHI 164細胞、HMVEC細胞、MC3T3細胞
UO.31細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB-134 VI細胞、GB-1細胞、NBL-1細胞
MKN 45細胞系相關產(chǎn)品：hRPTC細胞、SK-MEL-2-LUC細胞、T2細胞
BE(2)C細胞系相關產(chǎn)品：SUM 149PT細胞、NT2/D1細胞、BALB/c 3T3 clone A31細胞
SW-839細胞系相關產(chǎn)品：OCILY19細胞、H-87細胞、Hi5細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
B16-F1 epithelioid cells小鼠黑色素瘤細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣
細胞凍存的步驟：１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為５×１０６～１×１０７/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇；３)將分裝上述細胞懸液于２ml凍存管中，每管０.２５ml。凍存管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))；４)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中，-８０℃冰箱過夜。；如果有程序降溫器(放在-８０℃冰箱過夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后轉到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
D-324MED細胞系相關產(chǎn)品：SF 539細胞、A-875細胞、OE-33細胞
NCIH1694細胞系相關產(chǎn)品：GC1-SPG細胞、S3-HeLa細胞、Hs 636 T細胞
A-704細胞系相關產(chǎn)品：CEM C7細胞、HCV29細胞、NCI-H676B細胞
CL40細胞系相關產(chǎn)品：HEK-293H細胞、Immortal Pig Intestinal-2I細胞、B16BL-6細胞
EAC-E2G8細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR3細胞、TM-3細胞、A9 (Hamprecht)細胞
NCI-H1238細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1668細胞、BAC1.2F5細胞、SKMEL-31細胞
HNE2細胞系相關產(chǎn)品：SKN-AS細胞、Panc-05.04細胞、HPAEC細胞
X63-Ag 8.6.5.3細胞系相關產(chǎn)品：MX1細胞、FRH-0201細胞、H-1581細胞
SuDHL 8細胞系相關產(chǎn)品：ACC-M細胞、Duck embryo細胞、SK-MEL-28細胞
P388D1細胞系相關產(chǎn)品：MCF7ADR細胞、LTEP-sm細胞、HCC-70細胞
B16-F1 epithelioid cells小鼠黑色素瘤細胞系
SUIT 2細胞系相關產(chǎn)品：K562/ADR細胞、P-3J細胞、SUDHL5細胞
TR 146細胞系相關產(chǎn)品：SW1222細胞、SNB19細胞、KM H-2細胞
HIT細胞系相關產(chǎn)品：SUM-52細胞、PLA801C細胞、MEL-526細胞
HuH28細胞系相關產(chǎn)品：IHH4細胞、LS 513細胞、PTK-2細胞
Microbiological Associates-104細胞系相關產(chǎn)品：HR1K細胞、KG-1a細胞、LN 382細胞
IMR90細胞系相關產(chǎn)品：Natural Killer-92細胞、Line 522細胞、COLO684細胞
IMR90細胞系相關產(chǎn)品：Natural Killer-92細胞、Line 522細胞、COLO684細胞
MUTZ1細胞系相關產(chǎn)品：P3-X63Ag8細胞、Human Epithelioma-2細胞、HITT15細胞
SRS-82細胞系相關產(chǎn)品：BIC-1細胞、MDA-MB415細胞、UMNSAH-DF-1細胞
TEC細胞系相關產(chǎn)品：BNL.CL2細胞、SK Mel 2細胞、LM3細胞
NCI-H1581細胞系相關產(chǎn)品：ROS1728細胞、NCI-SNU-C2A細胞、GBC-SD細胞
IGROV 1細胞系相關產(chǎn)品：HDF-a細胞、NCI-Hut 125細胞、OLN-93細胞
3T6細胞系相關產(chǎn)品：L cells細胞、alpha TC1-6細胞、OV 1063細胞
BT 20細胞系相關產(chǎn)品：NCI-HUT-460細胞、NE-4C細胞、NCI-H2122細胞
CaSki細胞系相關產(chǎn)品：HSF2細胞、EL 4細胞、KMS26細胞
Onda 11細胞系相關產(chǎn)品：SK-N-BE(2)C細胞、GM02219D細胞、COLO206細胞
9L細胞系相關產(chǎn)品：ZYM-DIEC02細胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞、HCC1008細胞
JB6 Cl 30細胞系相關產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞、HEY-A8細胞、NCIH1184細胞
C-33 A細胞系相關產(chǎn)品：ST2細胞、KRC-Y細胞、VP 229細胞
Psi2-DAP細胞系相關產(chǎn)品：Ca759細胞、UACC812細胞、TC-1[JHU-1]細胞
SK.MEL.2細胞系相關產(chǎn)品：Strain KB細胞、NIH-3T3-L1細胞、95-D細胞
RK-13細胞系相關產(chǎn)品：CALU 1細胞、Hep II細胞、MES-23.5細胞
Pt K1 (NBL-3)細胞系相關產(chǎn)品：Jurkat 77細胞、Hs-281-T細胞、Huh-7.5.1細胞
Line 870 Emory University-4細胞系相關產(chǎn)品：CCD841CoTr細胞、U343細胞、Wien-133細胞
DiFi細胞系相關產(chǎn)品：SUDHL10細胞、MLM細胞、8305C細胞
THC-8307細胞系相關產(chǎn)品：LS 123細胞、SW-403細胞、Medical Research Council cell strain-9細胞
Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞系相關產(chǎn)品：GTL16細胞、T47-D細胞、MDA-468細胞
HKF細胞系相關產(chǎn)品：H-157細胞、OV1063細胞、NCIH520細胞
H322T細胞系相關產(chǎn)品：H676B細胞、MV-522細胞、U138MG細胞
RPMI 8402細胞系相關產(chǎn)品：Hs-611-T細胞、AML-2細胞、HT-1197細胞
ACC2細胞系相關產(chǎn)品：SUDHL-8細胞、GM637細胞、EFO27細胞
VP 229細胞系相關產(chǎn)品：COLO-680N細胞、BTI-Tn-5B1-4細胞、UM-UC3細胞
Swiss-3T3細胞系相關產(chǎn)品：H-1688細胞、Capan2細胞、HCC1395細胞
NCC-IT細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2198細胞、MGHU1細胞、SUP-T1細胞
M14-MEL細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB 361細胞、SW982細胞、CCD-966SK細胞
OVCAR10細胞系相關產(chǎn)品：U 937細胞、LS-180細胞、SAOS 2細胞
SKML-28細胞系相關產(chǎn)品：CT26.CL25細胞、TE32細胞、PG13細胞
L-6TG細胞系相關產(chǎn)品：P-2003細胞、A875細胞、GS-9L細胞
U266B1細胞系相關產(chǎn)品：OV433細胞、EO771細胞、OV1063細胞
KU-812細胞系相關產(chǎn)品：PC14細胞、2008細胞、NKT細胞
Hs 737.T細胞系相關產(chǎn)品：293 F細胞、BT細胞、Merwin Plasma Cell tumor-11細胞
Walker-256細胞系相關產(chǎn)品：AR4-IP細胞、HCC0366細胞、HEL-92_1_7細胞
Pt-K1細胞系相關產(chǎn)品：HCC0070細胞、Kasumi-6細胞、NCI-H1373細胞
LS-513細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1792細胞、OCIAML4細胞、brain-derived Endothelial cells.3細胞
YES 2細胞系相關產(chǎn)品：SNU520細胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞、SUM-159細胞
L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞系相關產(chǎn)品：ECC-12細胞、HCC2108細胞、CHP 100細胞
J774 A.1細胞系相關產(chǎn)品：SNU-1040細胞、F-81細胞、MCA205細胞
HIC細胞系相關產(chǎn)品：hA549細胞、GP2d細胞、SF 763細胞
DHL-2細胞系相關產(chǎn)品：Normal Rat Kidney細胞、PL11細胞、Fu97細胞
CL1-0細胞系相關產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞、NCIADR.RES細胞、PK(15)細胞
E304細胞系相關產(chǎn)品：SR-786細胞、3LL細胞、U138細胞
B16-F1 epithelioid cells小鼠黑色素瘤細胞系
CHP100細胞系相關產(chǎn)品：NIH:OVCAR-5細胞、NCI-1155細胞、PLB985細胞
CPA 47細胞系相關產(chǎn)品：HCC1954-BL細胞、PLC/PRF/5細胞、SACC-LM細胞
Vero 76 clone E6細胞系相關產(chǎn)品：EFO 27細胞、BTI-Tn5B14細胞、FUOV1細胞
A-704細胞系相關產(chǎn)品：CEM C7細胞、HT1197細胞、Kit-225-K6細胞
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