"RWPE-1細(xì)胞：人正常前列腺上皮細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：腫瘤抑制基因： p５３ + [PubMed: ９２１４６０５] pRB + [PubMed: ９２１４６０５] 一位正常男性前列腺組織切片的周圍區(qū)域的上皮細(xì)胞用單拷貝的人乳頭瘤病毒的１８(HPV-１８)進(jìn)行轉(zhuǎn)化，建立了RWPE-１ (ATCC CRL-１１６０９) 細(xì)胞株 [PubMed: ９２１４６０５]. 在三維Matrigel培養(yǎng)時(shí)，在雄激素作用下，RWPE-１細(xì)胞形成腺胞并向培養(yǎng)基中分泌PSA。[PubMed: １１１７０１４２]. 當(dāng)與Matrigel或基質(zhì)細(xì)胞混合注射雄性裸鼠時(shí)，RWPE-１細(xì)胞也能形成腺胞[PubMed: １１３０４７２４] 并產(chǎn)生PSA。 來源于RWPE-１的細(xì)胞再用Kirstin鼠類腫瘤病毒轉(zhuǎn)染Ki-ras基因，建立了能成瘤的RWPE-２細(xì)胞株(ATCC CRL-１１６１０) [PubMed: ９２１４６０５] 和 RWPE２-W９９ (ATCC CRL-２８５３) 細(xì)胞株。 另外，用N--N-(MNU)處理RWPE-１，建立了一系列模擬前列腺癌進(jìn)程中不同時(shí)期的成瘤細(xì)胞株。 它們是 WPE１-NA２２ (ATCC CRL-２８４９), WPE１-NB１４ (ATCC CRL-２８５０, WPE１-NB１１ (ATCC CRL-２８５１) 和 WPE１-NB２６ (ATCC CRL-２８５２) 細(xì)胞株。 據(jù)提供者報(bào)道，RWPE-１ 細(xì)胞株(ATCC CRL-１１６０９)經(jīng)過檢測(cè)，乙肝、丙肝、人免疫缺陷病毒都呈陰性。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：３傳代,２-３天傳一代。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
解凍細(xì)胞常見實(shí)驗(yàn)問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)會(huì)出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長(zhǎng)緩慢等問題，究竟是什么原因?qū)е?，我們?cè)撛趺催M(jìn)行解決？以下是國(guó)內(nèi)外細(xì)胞培養(yǎng)專家針對(duì)解凍細(xì)胞實(shí)驗(yàn)問題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細(xì)胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡，因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠高，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細(xì)胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時(shí)間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開始培養(yǎng)；３)對(duì)冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時(shí)后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時(shí)間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時(shí)細(xì)胞需要幾周時(shí)間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時(shí)細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長(zhǎng)階段中的位置。冷凍的條件在對(duì)數(shù)期；４)被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時(shí)培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍最近冷凍的細(xì)胞。細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時(shí)間越長(zhǎng)，存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時(shí)間和方法。在冷凍時(shí)細(xì)胞應(yīng)處于對(duì)數(shù)期。
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長(zhǎng)角度來說，針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長(zhǎng)不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)不好》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過低，細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長(zhǎng)；4)胰酶消化時(shí)間過長(zhǎng)或過短：時(shí)間過長(zhǎng)，細(xì)胞死亡；時(shí)間過短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對(duì)性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
我常看到一個(gè)比較復(fù)雜的四步消化法，這個(gè)挺有意思，我也是次聽說，應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價(jià)值。但我估計(jì)這個(gè)方法可能對(duì)付少數(shù)非常怪異的細(xì)胞才需要這么復(fù)雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細(xì)胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實(shí)是很好消化的細(xì)胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點(diǎn)成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個(gè)視細(xì)胞而定。如果和標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導(dǎo)致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細(xì)胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細(xì)胞的特性，是因?yàn)橘N壁過程中重新聚集了。這個(gè)時(shí)候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細(xì)胞之后會(huì)對(duì)你越來越不好；比較難消化的細(xì)胞(潤(rùn)洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細(xì)胞，一般不超過５min，即可見細(xì)胞成片移動(dòng)，就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會(huì)有難消化的時(shí)候，比如tsDC細(xì)胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動(dòng)。
Human Embryonic Kidney 293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：My-La 2059細(xì)胞、NKL細(xì)胞、NKL細(xì)胞
K422細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：N2a細(xì)胞、DHL-8細(xì)胞、Chang Cells細(xì)胞
Ly8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vx-2細(xì)胞、LU451細(xì)胞、CWR22-Rv1細(xì)胞
NCI-SNU-878細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VERO C 1008細(xì)胞、CCRF-CEM C7細(xì)胞、COR L279細(xì)胞
Panc813細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero-E6細(xì)胞、HPB-ALL細(xì)胞、SuDHL 2細(xì)胞
EA.hy 926細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAMSCs細(xì)胞、SKMel-5細(xì)胞、HEI-193細(xì)胞
32Dc3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-M(TK-)細(xì)胞、BMSCs（mBMSCs）細(xì)胞、BE(2)M-17細(xì)胞
HeLa/S3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細(xì)胞、NCTC1469細(xì)胞、GP-293細(xì)胞
NCIH2073細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCECs細(xì)胞、L23/P細(xì)胞、ECC1細(xì)胞
C26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS123細(xì)胞、TNC-1B12B4細(xì)胞、H9c2細(xì)胞
SKGIIIA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Strain L-929細(xì)胞、MDAMB415細(xì)胞、H1672細(xì)胞
GM16136細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGM1細(xì)胞、MUS-M1細(xì)胞、C3H10T1-2細(xì)胞
P3X63Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 48細(xì)胞、CMT-167細(xì)胞、Beta-TC-6細(xì)胞
C38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL1細(xì)胞、NCI-H441-4細(xì)胞、RBL 2H3細(xì)胞
Panc2.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMJ2-C8細(xì)胞、U266BL細(xì)胞、C 6細(xì)胞
SMMC-7721細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD841CoN細(xì)胞、NCIH1651細(xì)胞、L Wnt-3A細(xì)胞
SMMC-7721細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD841CoN細(xì)胞、NCIH1651細(xì)胞、L Wnt-3A細(xì)胞
H28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1618細(xì)胞、HOK細(xì)胞、V79-GalK1細(xì)胞
L-5178-Y-R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WPE-int細(xì)胞、SW260細(xì)胞、OUMS23細(xì)胞
D283-MED細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MBVP細(xì)胞、CAL 78細(xì)胞、WM115-mel細(xì)胞
NCI-H1694細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1048細(xì)胞、OKAC1細(xì)胞、NCI-H441細(xì)胞
MDAMB330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sarcoma OSteogenic-2細(xì)胞、OsA-CL細(xì)胞、MADISON LUNG TA-109細(xì)胞
Hs274T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1437細(xì)胞、CAOV3細(xì)胞、PC-9/S1細(xì)胞
KMST6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MH7A細(xì)胞、SUM102PT細(xì)胞、NB19-RIKEN細(xì)胞
ASPC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-144細(xì)胞、TE671/RD細(xì)胞、MFM223細(xì)胞
Colon26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ABE­8.1/2細(xì)胞、TE 85.T細(xì)胞、BCECs細(xì)胞
SNU668細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Malme-3M細(xì)胞、H-446細(xì)胞、DU 4475細(xì)胞
CEM T4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL5細(xì)胞、Douglas Foster-1細(xì)胞、NPA 87細(xì)胞
Pt K1 (NBL-3)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat 77細(xì)胞、Hs-281-T細(xì)胞、Huh-7.5.1細(xì)胞
Huh7.5.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H716細(xì)胞、MM96L細(xì)胞、LoMeT-ccRcc細(xì)胞
SW962細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375.S2細(xì)胞、HTR-8/SVneo細(xì)胞、3T6-Swiss albino細(xì)胞
FDCP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT4P細(xì)胞、CCRF/CEM細(xì)胞、COR-L23細(xì)胞
FTC133細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1395細(xì)胞、HSAS1細(xì)胞、HCA 7細(xì)胞
CAL-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16 subline B78細(xì)胞、EA.hy 926細(xì)胞、MC-3T3-E1細(xì)胞
NIE-115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRASMC細(xì)胞、Hs852細(xì)胞、L5178Y細(xì)胞
HNTEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-SA細(xì)胞、NRK clone 52E細(xì)胞、MCM細(xì)胞
WIL2 S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OSKM-1細(xì)胞、SW-1222細(xì)胞、HCC-2218細(xì)胞
WIL2 S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OSKM-1細(xì)胞、SW-1222細(xì)胞、HCC-2218細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB361細(xì)胞、SW-837細(xì)胞、Cloudman M3細(xì)胞
J45.01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-87細(xì)胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細(xì)胞、KYSE0030細(xì)胞
RTE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC-1細(xì)胞、UACC 893細(xì)胞、H-250細(xì)胞
HEC151細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Monomac-1細(xì)胞、LN-382細(xì)胞、253J細(xì)胞
HBL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U2-OS細(xì)胞、VSMC細(xì)胞、D324細(xì)胞
H-211細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 190細(xì)胞、HT1197細(xì)胞、CEM C7細(xì)胞
Hu-P-T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCM1細(xì)胞、NCI-H28細(xì)胞、526mel細(xì)胞
HAVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC95細(xì)胞、P3/NS1/1-Ag4-1細(xì)胞、Colon-38細(xì)胞
NCIH1105細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ST 486細(xì)胞、CT26.WT細(xì)胞、H-1299細(xì)胞
NB-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HREC細(xì)胞、PGLH7細(xì)胞、F98細(xì)胞
VK-2/E6E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-445細(xì)胞、HT(H9)細(xì)胞、GLC82細(xì)胞
H847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRO細(xì)胞、Huh 7.5.1細(xì)胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)細(xì)胞
N-Tera-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL-2H3細(xì)胞、IEC 18細(xì)胞、PC-3M IE8細(xì)胞
HeLa S 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YD-38細(xì)胞、C2BBe 1細(xì)胞、L-363細(xì)胞
SUM 159PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02132細(xì)胞、TE-5細(xì)胞、P3-X63Ag8.653細(xì)胞
CHOK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC20細(xì)胞、R 1610細(xì)胞、KHYG-1細(xì)胞
Hep-G2/C3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：alpha TC1-6細(xì)胞、BJA-B-1細(xì)胞、aTC1-6細(xì)胞
MSTO-211細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC2細(xì)胞、TFK1細(xì)胞、SK.MEL.2細(xì)胞
MCA38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-hth74細(xì)胞、DMS 273細(xì)胞、P3/NSI/1-AG4-1細(xì)胞
PANC0504細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ATN1細(xì)胞、HIT細(xì)胞、SK-MEL-24細(xì)胞
OSK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：REC-1細(xì)胞、Pro-5 Lec1.3c細(xì)胞、A-549細(xì)胞
KYSE450細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NALM 6細(xì)胞、HEK293FT細(xì)胞、KMBC細(xì)胞
ECC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E1 Subclone 24細(xì)胞、GM-3573細(xì)胞、DKMG細(xì)胞
OVCAR8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC4細(xì)胞、SKRC-39細(xì)胞、Panc4.03細(xì)胞
A1847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H345細(xì)胞、NCI-H647細(xì)胞、P-2003細(xì)胞
Panc 5.04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WBF344細(xì)胞、CA-OV-3細(xì)胞、MESSA Dx5細(xì)胞
MeSoTheliOma-211H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BIU-87細(xì)胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2細(xì)胞、SU-DHL-1細(xì)胞
CoC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D324細(xì)胞、L540細(xì)胞、74Int細(xì)胞
DrG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1373細(xì)胞、OAW42細(xì)胞、JB6 clone 30, subclone 7b細(xì)胞
MDCK-II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-Lu-65細(xì)胞、MN-60細(xì)胞、HCC94細(xì)胞
UCH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBZY1細(xì)胞、H-650細(xì)胞、P3J HR1-K細(xì)胞
BEL/FU細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KOSC-2 cl3-43細(xì)胞、HBL1細(xì)胞、RT-BM細(xì)胞
HCC1428細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-388細(xì)胞、MV4II細(xì)胞、KE-39細(xì)胞
TE3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 1376細(xì)胞、Y3細(xì)胞、343MG細(xì)胞
Ly8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vx-2細(xì)胞、HR1K細(xì)胞、3T3-Swiss albino細(xì)胞
SK MEL-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H740細(xì)胞、HEK-293H細(xì)胞、EU-2細(xì)胞
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