"RWPE-1 epithelioid cells人正常前列腺上皮細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：腫瘤抑制基因： p５３ + [PubMed: ９２１４６０５] pRB + [PubMed: ９２１４６０５] 一位正常男性前列腺組織切片的周圍區(qū)域的上皮細(xì)胞用單拷貝的人乳頭瘤病毒的１８(HPV-１８)進(jìn)行轉(zhuǎn)化，建立了RWPE-１ (ATCC CRL-１１６０９) 細(xì)胞株 [PubMed: ９２１４６０５]. 在三維Matrigel培養(yǎng)時(shí)，在雄激素作用下，RWPE-１細(xì)胞形成腺胞并向培養(yǎng)基中分泌PSA。[PubMed: １１１７０１４２]. 當(dāng)與Matrigel或基質(zhì)細(xì)胞混合注射雄性裸鼠時(shí)，RWPE-１細(xì)胞也能形成腺胞[PubMed: １１３０４７２４] 并產(chǎn)生PSA。 來(lái)源于RWPE-１的細(xì)胞再用Kirstin鼠類腫瘤病毒轉(zhuǎn)染Ki-ras基因，建立了能成瘤的RWPE-２細(xì)胞株(ATCC CRL-１１６１０) [PubMed: ９２１４６０５] 和 RWPE２-W９９ (ATCC CRL-２８５３) 細(xì)胞株。 另外，用N--N-(MNU)處理RWPE-１，建立了一系列模擬前列腺癌進(jìn)程中不同時(shí)期的成瘤細(xì)胞株。 它們是 WPE１-NA２２ (ATCC CRL-２８４９), WPE１-NB１４ (ATCC CRL-２８５０, WPE１-NB１１ (ATCC CRL-２８５１) 和 WPE１-NB２６ (ATCC CRL-２８５２) 細(xì)胞株。 據(jù)提供者報(bào)道，RWPE-１ 細(xì)胞株(ATCC CRL-１１６０９)經(jīng)過(guò)檢測(cè)，乙肝、丙肝、人免疫缺陷病毒都呈陰性。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng)：１.取細(xì)胞的過(guò)程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問(wèn)題：凍存液的配置已是常識(shí)，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對(duì)細(xì)胞不是完全無(wú)毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對(duì)細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會(huì)造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對(duì)細(xì)胞的損傷。４.離心問(wèn)題：目前主要有兩種見(jiàn)解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè)，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對(duì)一般人來(lái)說(shuō)，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過(guò)了活細(xì)胞會(huì)受壓過(guò)大，死亡。此外在操作過(guò)程中容易污染，所以不推薦。另一種說(shuō)法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對(duì)細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無(wú)異常。５.細(xì)胞貼壁少的問(wèn)題：教科書(shū)中說(shuō)明凍存細(xì)胞解凍時(shí)１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問(wèn)題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過(guò)多，細(xì)胞濃度過(guò)低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問(wèn)題：這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問(wèn)題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會(huì)比較大，就會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng)，從以前的資料來(lái)看，DMSO的濃度在小于０.５%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒(méi)有什么影響，還有一個(gè)說(shuō)法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無(wú)害濃度。
CAL78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFE-296細(xì)胞、Hs 737.T細(xì)胞、OEC19細(xì)胞
ECC 10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC1-Sq細(xì)胞、HCC-2218細(xì)胞、HEEpiC細(xì)胞
HEL-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 737.T細(xì)胞、NCIH1184細(xì)胞、PT-K75細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
RWPE-1 epithelioid cells人正常前列腺上皮細(xì)胞系
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長(zhǎng)，用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來(lái)，很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長(zhǎng)得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長(zhǎng)得滿滿的了。想請(qǐng)教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣，消化下來(lái)也是一團(tuán)的，但吹打以后就沒(méi)有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕，避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長(zhǎng)挺快，那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問(wèn)題我覺(jué)得有以下幾種可能：一、細(xì)胞消化后吹打不均勻，造成細(xì)胞成團(tuán)生長(zhǎng)：二、細(xì)胞細(xì)化太過(guò)，細(xì)胞成片脫落，吹打時(shí)沒(méi)有受力點(diǎn)，細(xì)胞聚團(tuán)生長(zhǎng)。解決辦法：根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的情況進(jìn)行多次消化，將同次消化下來(lái)的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間，若胰酶處理太久，容易造成細(xì)胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng)，嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn)：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長(zhǎng)，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細(xì)胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細(xì)胞傳代方法：１：３傳代,２-３天傳一代。
NCIH1793細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-324 Med細(xì)胞、GM04154B細(xì)胞、NCIH82細(xì)胞
MCM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-36細(xì)胞、C3H 10T1/2細(xì)胞、MFE280細(xì)胞
32D/cl3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4-II-E-C3細(xì)胞、Hs746-T細(xì)胞、EM-3細(xì)胞
NCI-H125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J82COT細(xì)胞、SKMEL28細(xì)胞、HT144-mel細(xì)胞
ARIP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AR4-2J細(xì)胞、H1666細(xì)胞、CFSC-2G細(xì)胞
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
RWPE-1 epithelioid cells人正常前列腺上皮細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點(diǎn)：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會(huì)把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動(dòng)作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時(shí)間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時(shí)候是傳代的原因；３)有時(shí)間的話，需要細(xì)胞計(jì)數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線，不會(huì)臨時(shí)要處理，手足無(wú)措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時(shí)間，傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時(shí)間，也不會(huì)耽誤別人的實(shí)驗(yàn)；５)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對(duì)待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無(wú)菌操作，多噴噴酒精，要是對(duì)滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測(cè)；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動(dòng)加濕的話盤里的水也會(huì)很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開(kāi)的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺(tái)是用完就開(kāi)；６)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
Clone M-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB435細(xì)胞、MOPC細(xì)胞、SNU-368細(xì)胞
FBHE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1781細(xì)胞、A2780/CP細(xì)胞、MHCC97L細(xì)胞
Ly19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CRFK細(xì)胞、SuperTube細(xì)胞、NB9細(xì)胞
SW962細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375.S2細(xì)胞、HTR-8/SVneo細(xì)胞、3T6-Swiss albino細(xì)胞
COLO-829細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-10細(xì)胞、SW48細(xì)胞、CA 46細(xì)胞
NIH:OVCAR-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63-Ag8.653細(xì)胞、QBI-HEK 293A細(xì)胞、IEC-6細(xì)胞
NTERA-2/D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RM-1細(xì)胞、H-520細(xì)胞、MAVER-1細(xì)胞
JVM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YES-2細(xì)胞、MES-SA/Dx-5細(xì)胞、SKHEP1細(xì)胞
HGC-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FLS細(xì)胞、H510細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細(xì)胞
CHP 100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC3.27細(xì)胞、RWPE-1細(xì)胞、Hs-611-T細(xì)胞
RWPE-1 epithelioid cells人正常前列腺上皮細(xì)胞系
ST細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGF-1細(xì)胞、THPI細(xì)胞、RGM-1細(xì)胞
L-M(TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GB-1細(xì)胞、BALB/3T3細(xì)胞、KMM1細(xì)胞
CFSC-2G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2405細(xì)胞、CCD-18Co細(xì)胞、NK 10a細(xì)胞
Hs821T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ATC241細(xì)胞、HCC2279細(xì)胞、MZ-CRC-1細(xì)胞
H-23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L 363細(xì)胞、SK-N-BE(2C)細(xì)胞、NCI-H187細(xì)胞
JEKO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-520細(xì)胞、NCIH1975細(xì)胞、33604細(xì)胞
JEKO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-520細(xì)胞、NCIH1975細(xì)胞、33604細(xì)胞
BJA-B-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GES1細(xì)胞、OVCAR-10細(xì)胞、SLMT-1細(xì)胞
H1666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 888.Lu細(xì)胞、H-2122細(xì)胞、LA795細(xì)胞
NRK49F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN4741細(xì)胞、GM04678細(xì)胞、3T3-L1 ad細(xì)胞
HSC4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1105細(xì)胞、mIMCD-3細(xì)胞、NSH細(xì)胞
MV-522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 102細(xì)胞、451-LU細(xì)胞、Caki2細(xì)胞
143TK-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE(2)C細(xì)胞、SK Hep1細(xì)胞、WRL-68細(xì)胞
LM(TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0015細(xì)胞、373 MG細(xì)胞、B/C3T3細(xì)胞
SU86.86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NT2D1細(xì)胞、BIC細(xì)胞、H-1435細(xì)胞
NCIH2122細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN-382細(xì)胞、OVTOKO細(xì)胞、NCIH1581細(xì)胞
Hut292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H650細(xì)胞、GM3569細(xì)胞、H-841細(xì)胞
B16-BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C6661細(xì)胞、COLO 357細(xì)胞、HLEC-B3細(xì)胞
M-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEEpiC細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415細(xì)胞、RPMI7951細(xì)胞
IBRS-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lewis Lung Cancer細(xì)胞、OV2008細(xì)胞、NCIH1092細(xì)胞
A101D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-C2B細(xì)胞、NCI-A549細(xì)胞、B6Tert-1細(xì)胞
G422細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKGT2細(xì)胞、B16F1細(xì)胞、H-2170細(xì)胞
HCC1500細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OEC33細(xì)胞、HTR-8/SV neo細(xì)胞、H1417細(xì)胞
HR-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293F細(xì)胞、Walker-256-TC細(xì)胞、SNU638細(xì)胞
hTERT RPE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-8226細(xì)胞、MHCC97-H細(xì)胞、H-2108細(xì)胞
SW1463細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H69細(xì)胞、SF539細(xì)胞、TE1細(xì)胞
H-23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L 363細(xì)胞、SK-N-BE(2C)細(xì)胞、NCI-H187細(xì)胞
PTK 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 699細(xì)胞、NS1-Ag4/1細(xì)胞、hCMEC/D3細(xì)胞
MC 116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM06141細(xì)胞、KFB細(xì)胞、MH-S細(xì)胞
NCI-460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL12T細(xì)胞、GFP-Olig2細(xì)胞、MKN-7細(xì)胞
D283 Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：253JB-V細(xì)胞、L 428細(xì)胞、BC3H1細(xì)胞
Hs-606-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKES1細(xì)胞、NCIH1838細(xì)胞、LP-1細(xì)胞
Epithelioma Papulosum Cyprini細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EOMA細(xì)胞、McCoy B細(xì)胞、MES-SA Dx5細(xì)胞
ChaGo-K-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Michigan Cancer Foundation-7細(xì)胞、LS123細(xì)胞、CAKI1細(xì)胞
NCI.H23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE450細(xì)胞、751細(xì)胞、AG06814-J細(xì)胞
SCL-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-266-4細(xì)胞、UCLA-SO-M20細(xì)胞、NCI-H647細(xì)胞
COLO 320細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：THLE-2細(xì)胞、UM-UC-3細(xì)胞、NCI-H1876細(xì)胞
MDA157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mink Lung細(xì)胞、T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞、UCLA NPA-87-1細(xì)胞
MDA157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mink Lung細(xì)胞、T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞、UCLA NPA-87-1細(xì)胞
Colo-206F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Shadyside Hospital Pittsburgh-77細(xì)胞、V-79細(xì)胞、NCI-H1930細(xì)胞
HEK-293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECV-304細(xì)胞、U-373 MG細(xì)胞、KPL-4細(xì)胞
CHO-K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：V 79細(xì)胞、MCF 7細(xì)胞、NCI-HUT-69細(xì)胞
PL12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：16HBE140細(xì)胞、PA-TU-8988S細(xì)胞、HIBEpiC細(xì)胞
BHK 21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-1細(xì)胞、LLC細(xì)胞、HUVEC細(xì)胞
NP-69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-4-II-E細(xì)胞、Huh7.5細(xì)胞、NCIH1105細(xì)胞
Jurkat Clone E6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE2Z細(xì)胞、D-324MED細(xì)胞、RIN-m細(xì)胞
H.Ep. #2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1792細(xì)胞、Hs 739.T細(xì)胞、COV-362細(xì)胞
NCC-IT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2198細(xì)胞、MGHU1細(xì)胞、SUP-T1細(xì)胞
BV173細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGC-5細(xì)胞、RBL.2H3細(xì)胞、HS-445細(xì)胞
HSC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2081細(xì)胞、Nb2細(xì)胞、HUCEC細(xì)胞
MSF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2227細(xì)胞、U87-MG細(xì)胞、Panc 10.05細(xì)胞
RWPE-1 epithelioid cells人正常前列腺上皮細(xì)胞系
HUT 125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEP a2細(xì)胞、TPC1細(xì)胞、SW260細(xì)胞
NK92MI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 450細(xì)胞、HSCT6細(xì)胞、Clone 15 HL-60細(xì)胞
HEK/293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMM5A細(xì)胞、HSAS4細(xì)胞、H1688細(xì)胞
Ly19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CRFK細(xì)胞、RCC23細(xì)胞、VP 229細(xì)胞
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