1.細胞起源:
細胞簡稱 RWPE-1
細胞別稱 RWPE1
細胞背景描述 一位正常男性前列腺組織切片的周圍區(qū)域的上皮細胞用單拷貝的人乳頭瘤病毒的18(HPV-18)進行轉化,建立了RWPE-1細胞株[PubMed:9214605]。在三維Matrigel培養(yǎng)時,在雄激素作用下,RWPE-1細胞形成腺胞并向培養(yǎng)基中分泌PSA[PubMed:11170142]。當與Matrigel或基質(zhì)細胞混合注射雄性裸鼠時,RWPE-1細胞也能形成腺胞[PubMed:11304724]并產(chǎn)生PSA。來源于RWPE-1細胞再用Kirstin鼠類腫瘤病毒轉染Ki-ras基因,建立了能成瘤的RWPE-2細胞株[PubMed:9214605]和RWPE2-W99細胞株。另外,用N-甲醇-N-硝基脲(MNU)處理RWPE-1細胞,建立了一系列模擬前列腺癌進程中不同時期的成瘤細胞株。它們是WPE1-NA22、WPE1-NB14、WPE1-NB11和WPE1-NB26細胞株。據(jù)提供者報道,RWPE-1細胞經(jīng)過檢測,乙肝、丙肝、人免疫缺陷病毒都呈陰性。
供體年齡 男;54歲
組織來源 器官:前列腺;疾?。赫?;細胞類型:上皮細胞
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
細胞類型 轉化細胞系
生長特性 貼壁細胞
生物安全等級 2
2.培養(yǎng)及保藏:
完全培養(yǎng)基 K-SFM+0.05mg/mL BPE+5ng/mL EGF+1% P/S(PB180120)
培養(yǎng)環(huán)境 空氣,95%;CO 2,5%
37℃
凍存條件 55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
液氮
3.傳代方法:
傳代步驟
1、吸出原培養(yǎng)液;
2、加入2ml左右PBS,輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細胞,吸出PBS丟棄;
3、加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA),輕輕晃動培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細胞;
4、放入培養(yǎng)箱消化,顯微鏡下看到細胞塊中間的細胞明顯變圓有間隙時可終止,全程不要拍打培養(yǎng)瓶;
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,吹打細胞使之脫壁并在液體里反復吹打使細胞盡量呈單顆細胞的懸浮液;
6、收集細胞懸液離心,1200rpm/min 3分鐘,離心完吸出上清丟棄;
7、加入新鮮培養(yǎng)基,吹打幾下混勻細胞即可,按比例接種到新培養(yǎng)瓶,補足培養(yǎng)基,擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進行培養(yǎng)。
傳代比例(密度) 1:2-1:4
換液頻次 2~3次/周
倍增時間 ~22 hours
本產(chǎn)品僅供科研使用。不能用于人和動物治療等其它臨床診斷使用!以實際收貨產(chǎn)品說明書為準,網(wǎng)站說明書僅供參考。