"B16-F1 小鼠黑色素瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹 
細胞形態(tài)：上皮細胞樣 
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握好細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導致細胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當消化液濃度過高時，消化時間應縮短，過低時細胞消化時間相對延長。 
細胞生長：貼壁 
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
B16-F1 小鼠黑色素瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。 
細胞傳代方法：１：２傳代 
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 
細胞生長特性：貼壁生長 
B16-F1 小鼠黑色素瘤細胞系
很多朋友討論細胞培養(yǎng)問題，見到很多很好的經(jīng)驗總結，這里說一些我個人的經(jīng)驗，因為一些比較特殊的原因，我自己培養(yǎng)接觸過近３００種細胞，常用于做實驗的，累積有百余種，可以說遇到過許多各式各樣古怪的細胞。這里挑細胞消化開始做我的篇專題，并不是因為細胞消化最重要，而是近期看到大家頻繁討論這個話題，我就拋磚引玉，下面幾點拙見，可能與其它朋友總結的一些經(jīng)驗有點出入，僅供大家參考。許多同學對細胞消化做了許多研究，得出了很多有價值的經(jīng)驗，也見到很多人的困惑。其實細胞培養(yǎng)，尤其是細胞系的培養(yǎng)，就消化而言，不是太難，做得多了，善于總結經(jīng)驗，就能把細胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟，細節(jié)操作，我這里就不講了，只講一些基本操作背后的知識，如果不對之處，歡迎指正，總結下來，細胞培養(yǎng)中消化很重要，但其實消化并不是細胞培養(yǎng)的關鍵所在(雖然很重要)，關鍵所在是細胞來源，血清質(zhì)量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細胞遇到各種各樣的問題，很多時候bottleneck沒有找到，雖然通過其它方法有所改善，但仍然是事倍功半。因為人們往往注意自己的操作，總覺得自己沒有經(jīng)驗，而忽視試劑，溶液尤其是細胞的質(zhì)量，后者其實才是許多細胞培養(yǎng)實驗室常見的問題。 
細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣 
CoC1細胞系相關產(chǎn)品：D324細胞、L540細胞、74Int細胞 
WM-451Lu細胞系相關產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞、H-1666細胞、LN-18細胞 
GM-215細胞系相關產(chǎn)品：H2286細胞、KP-N-YN細胞、MonoMac 6細胞 
YAC-1細胞系相關產(chǎn)品：THLE-3細胞、Hu-P-T3細胞、THP 1細胞 
TE7細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1417細胞、CPA 47細胞、UM-UC-14細胞 
SW982細胞系相關產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞、HEI-193細胞、HS 1.Tes細胞 
Hs 636.T細胞系相關產(chǎn)品：EFO-27細胞、HCC1428細胞、PAa細胞 
WM-239細胞系相關產(chǎn)品：C8D1A細胞、Kit 225-K6細胞、2PK3細胞 
H146細胞系相關產(chǎn)品：NCTC 3960細胞、CWR22-Rv1細胞、HFLS-OA細胞 
H-1944細胞系相關產(chǎn)品：SNB.19細胞、H-35細胞、Rat 2細胞 
bEnd.3[BEND3]細胞系相關產(chǎn)品：H1819細胞、FL83B細胞、BC3 H1細胞 
SCH細胞系相關產(chǎn)品：SUP T1細胞、Metastatic Variant 522細胞、DoHH-2細胞 
Hep II細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1581細胞、Anglne細胞、MHCCLM3細胞 
MDCK細胞系相關產(chǎn)品：SK-BR-3細胞、PNEC30細胞、293/EBNA-1細胞 
KY-50細胞系相關產(chǎn)品：CL MC/9細胞、NCI-SNU-407細胞、Hs 606細胞 
U266S細胞系相關產(chǎn)品：MC3T3-E1細胞、NCI-H2198細胞、SNU-449細胞 
GM2131細胞系相關產(chǎn)品：RT-112細胞、P3-X63-Ag8-6-5-3細胞、PIEC細胞 
IMR-32細胞系相關產(chǎn)品：BpRcl細胞、SKNF1細胞、Hs729T細胞 
LIPF155C細胞系相關產(chǎn)品：DMS-114細胞、MonoMac6細胞、Mv 1 Lu (NBL-7)細胞 
Calu-6細胞系相關產(chǎn)品：GTL-16細胞、SW-13細胞、GM06141細胞 
B16-F1 小鼠黑色素瘤細胞系
SCL I細胞系相關產(chǎn)品：UCW 100細胞、SF-295細胞、Centre Antoine Lacassagne-33細胞 
SUPB15細胞系相關產(chǎn)品：SN12C-PM6細胞、HRPEpiC細胞、A 2058細胞 
NCI H716細胞系相關產(chǎn)品：OCI-Ly10細胞、NW-38細胞、SW 1990細胞 
HT1197細胞系相關產(chǎn)品：190PT細胞、MKN1細胞、A-375細胞 
EL-4細胞系相關產(chǎn)品：NHDF細胞、16HBE14o-細胞、MHCC-97細胞 
BC-023細胞系相關產(chǎn)品：PL5細胞、COLO320HSR細胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞 
He-La細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1703細胞、J 82細胞、THP1細胞 
HRA19細胞系相關產(chǎn)品：UMNSAH-DF1細胞、SW-1463細胞、IGROV1細胞 
RPMI7951細胞系相關產(chǎn)品：SK-N-BE(2)-C細胞、HT144細胞、TGW-nu細胞 
SNU-668細胞系相關產(chǎn)品：Mac-1細胞、EU-4細胞、NCI-H660細胞 
MB157細胞系相關產(chǎn)品：SNU-1細胞、18G3.cl 1細胞、SK-ChA-1細胞 
NB1-RGB細胞系相關產(chǎn)品：D10.G4.1細胞、SW 1116細胞、C-4 I細胞 
MFE-296細胞系相關產(chǎn)品：PIG1細胞、H-747細胞、A375mel細胞 
PLA801D細胞系相關產(chǎn)品：P388-D1細胞、LU-65M細胞、LTEP-a-2細胞 
C4-2B細胞系相關產(chǎn)品：H-II-E-C3細胞、FRO81-2細胞、LCD細胞 
H2.35細胞系相關產(chǎn)品：LNT-229細胞、CCD1112Sk細胞、Karpas 299細胞 
Onda 11細胞系相關產(chǎn)品：SK-N-BE(2)C細胞、GM02219D細胞、COLO206細胞 
D-324MED細胞系相關產(chǎn)品：SF 539細胞、A-875細胞、OE-33細胞 
ES-2細胞系相關產(chǎn)品：OCI/AML-2細胞、GMK,BSC-1細胞、TOV-112細胞 
PK15細胞系相關產(chǎn)品：WM 2664細胞、HEC151細胞、Mel RM細胞 
NCI-H196細胞系相關產(chǎn)品：NIE-115細胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細胞、L615細胞 
MCF-12F細胞系相關產(chǎn)品：COLO-741細胞、FHL 124細胞、GRSL細胞 
Hs-578T細胞系相關產(chǎn)品：MV411細胞、SGC-996細胞、H-2126細胞 
PIG1細胞系相關產(chǎn)品：L78細胞、FTC133細胞、SKMEL24細胞 
Glioma-261細胞系相關產(chǎn)品：BHP 10-3細胞、H2141細胞、COLO 205細胞 
HB 611細胞系相關產(chǎn)品：RPMI #1846細胞、CAL12T細胞、H2405細胞 
CCRF/CEM-C7細胞系相關產(chǎn)品：SLMT-1細胞、COLO206細胞、SCCVII/St細胞 
L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞系相關產(chǎn)品：ECC-12細胞、HCC2108細胞、CHP 100細胞 
K1細胞系相關產(chǎn)品：McCoy B細胞、PLA-802細胞、PNEC30細胞 
TOV112細胞系相關產(chǎn)品：SKHEP-1細胞、DU145細胞、Hs683細胞 
Hs863T細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1836細胞、LC-1細胞、RDES-1細胞 
32D.3細胞系相關產(chǎn)品：TKB-1細胞、Hs 636.T細胞、Capan1細胞 
NCIH3255細胞系相關產(chǎn)品：EAhy 926細胞、A-375細胞、VK2 (E6/E7)細胞 
ETCC-007細胞系相關產(chǎn)品：HEL-92-1-7細胞、UT-7細胞、HCC1187細胞 
Mel624細胞系相關產(chǎn)品：NCIH847細胞、CAL 148細胞、SK Mel 24細胞 
MV(4;11)細胞系相關產(chǎn)品：PC12(高分化)細胞、WISH細胞、451-LU細胞 
H2126細胞系相關產(chǎn)品：AMC-HN-8細胞、NCI-HUT-520細胞、K562/ADP細胞 
SJRH 30細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H498細胞、GA-10(Clone 4)細胞、HVSMC細胞 
BJA-B1細胞系相關產(chǎn)品：Me Wo細胞、Granta 519細胞、TR146細胞 
RPMI-8402細胞系相關產(chǎn)品：SuperTube細胞、ABE­8.1/2細胞、HDMEC細胞 
CFPAC細胞系相關產(chǎn)品：NCIH524細胞、HEL9217細胞、DMS-153細胞 
B16-F1 小鼠黑色素瘤細胞系
C3H/10T1/2 CL8細胞系相關產(chǎn)品：MT4細胞、NUGC3細胞、MCF.10A細胞 
Neuro 2a細胞系相關產(chǎn)品：A10細胞、HCC-95細胞、OLN 93細胞 
801-D細胞系相關產(chǎn)品：IPEC1細胞、Panc02細胞、PANC0813細胞 
AML-2細胞系相關產(chǎn)品：OCI-Ly7細胞、NCI-H1755細胞、C-28I2細胞 
KM12 SM細胞系相關產(chǎn)品：Madin Darby Bovine Kidney細胞、SCH細胞、GAK細胞 
H1581細胞系相關產(chǎn)品：HSC-6細胞、L 132細胞、SPDC-CCL141細胞 
PC9細胞系相關產(chǎn)品：CNE1細胞、HME-1細胞、SU-DHL-6細胞 
Mel-RM細胞系相關產(chǎn)品：MDAMB436細胞、DR2R1610細胞、SCC 4細胞 
H889細胞系相關產(chǎn)品：MDAMB415細胞、MDA.MB.435細胞、Ramos 2G6 4C10細胞 
Centre Antoine Lacassagne-27細胞系相關產(chǎn)品：MDA435細胞、Tokyo Medical and Dental university 8細胞、Mv1Lu細胞 
C38細胞系相關產(chǎn)品：SUDHL1細胞、H-II-E-C3細胞、MA 104細胞 
GM2132細胞系相關產(chǎn)品：CCD 841 CoTr細胞、Sf21細胞、NOZAWA細胞 
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