"PT67 Thawing小鼠逆轉錄病毒包裝細胞系
細胞背景資料：逆轉錄病毒包裝細胞；雄性；NIH Swiss
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
PT67 Thawing小鼠逆轉錄病毒包裝細胞系
細胞生長：貼壁
細胞凍存的步驟：１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為５×１０６～１×１０７/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇；３)將分裝上述細胞懸液于２ml凍存管中，每管０.２５ml。凍存管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))；４)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中，-８０℃冰箱過夜。；如果有程序降溫器(放在-８０℃冰箱過夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后轉到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞傳代培養(yǎng)實驗：體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代，以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞，并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后，由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭，將培養(yǎng)的細胞分散，從容器中取出，以１:２或１:３以上的比率轉移到另外的容器中進行培養(yǎng)，即為傳代培養(yǎng)；細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間，與細胞世代或倍增不同。在一代中，細胞培增３～６次。細胞傳代后，一般經過三個階段：游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度，即細胞群的分裂相數(shù)/１００個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于０.２％～０.５％，腫瘤細胞可達３～５％；細胞接種２～３天分裂增殖旺盛，是活力時期，稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期)，適宜進行各種試驗。實驗步驟：１.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出，在超凈工作臺中倒掉瓶內的培養(yǎng)液，加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜)，靜置５～１０分鐘。２.在倒置鏡下觀察被消化的細胞，如果細胞變圓，相互之間不再連接成片，這時應立即在超凈臺中將消化液倒掉，加入３～５ml新鮮培養(yǎng)液，吹打，制成細胞懸液。３.將細胞懸液吸出２ml左右，加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加３ml左右培養(yǎng)液，蓋好瓶塞，送回二氧化碳培養(yǎng)箱中，繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況，傳代后的細胞在２小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上，２～４天就可在瓶內形成單層，需要再次進行傳代。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
PT67 Thawing小鼠逆轉錄病毒包裝細胞系
細胞生長特性：貼壁
細胞的衰老:體外細胞培養(yǎng)實驗證明：成纖維細胞：來自胎兒傳代５０次后衰老死亡，來自成人傳代２０次后衰老死亡(與具體年齡有關；來自小鼠傳代１４--２８次后衰老死亡，來自烏龜傳代９０--１２５次后衰老死亡。細胞衰老過程中會發(fā)生一系列的變化，包括：蛋白質合成速度降低，已有蛋白質結構變化，特異蛋白質成份出現(xiàn);同時，細胞核，線粒體，膜系統(tǒng)、骨架系統(tǒng)等都有結構、功能的改變。細胞衰老原因，尚無定論，出現(xiàn)過好幾種理論與假說，其中得到較廣泛認可的是“自由基損傷假說”。細胞凋亡:細胞的死亡是個體存活的正?，F(xiàn)象，常見的細胞死亡形式有３種：壞死、凋亡和細胞毒性。多細胞生物的生命活動中，因為環(huán)境因素的突然變化或病原物的入侵，導致一部分細胞死去，稱為細胞的病理死亡，或細胞壞死。壞死是細胞暴露于嚴重的物理或化學刺激時導致的細胞死亡；細胞毒性是由細胞或者化學物質引起的單純的細胞殺傷事件，不依賴于其它兩種細胞死亡機理，如殺傷T細胞的細胞毒性作用。還有一種情況，一部分細胞的死亡是生物個體正常生命活動(代謝、生長、發(fā)育、分化)的一個必要部分；似乎帶有“犧牲局部，保全整體”的意味。這種情況下的細胞死亡，明顯地受遺傳控制，稱為細胞凋亡。凋亡(Apoptosis)則是程序性的、正常的細胞死亡，是機體清除無用的或者不想要的細胞的手段。它與細胞壞死是兩個截然不同的過程，無論從形態(tài)學、生物學還是生化的特征來說，都有明顯的區(qū)別。細胞凋亡現(xiàn)象普遍存在于生物界。細胞凋亡與細胞增殖、分化和衰老起著互補與平衡的作用，在多細胞動物的發(fā)育、形態(tài)建成與維持中扮演至關重要的角色。作為細胞的一種基本生命現(xiàn)象，凋亡失控的結果將是可怕的：凋亡不足時，易發(fā)生癌變、病毒性疾病和自身免疫疾病;而凋亡過量則可能產生獲得性免疫缺陷綜合征(HIV)、重癥肝炎與退行性神經疾病，如老年性癡呆癥(Alzheimer""s disease)、帕金森氏癥(Parkinson""s disease)。因此研究細胞凋亡及其機理具有重要的理論和實踐意義。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
BCP1細胞系相關產品：M4e細胞、SK-CO-1細胞、IOSE29細胞
Ramos 2G6.4C10細胞系相關產品：NSI/1-Ag4-1細胞、Hx147細胞、no.11細胞
P3J.HR1K細胞系相關產品：H-510A細胞、B16BL6細胞、SUSM1細胞
MM134細胞系相關產品：H526細胞、SKOV-433細胞、KFB細胞
Potorous tridactylus Kidney 2細胞系相關產品：KYSE30細胞、RCC 7860細胞、Farage細胞
RPPVEC細胞系相關產品：H209細胞、HCT FET細胞、UACC893細胞
Cloudman M3細胞系相關產品：Dami細胞、Hs600T細胞、H1650細胞
KLN 205細胞系相關產品：MDA-MB-175細胞、COLO357細胞、Hep3B細胞
HTSMC細胞系相關產品：LIM-1215細胞、Ej138細胞、HTori-3細胞
H-2170細胞系相關產品：WILL-2細胞、Y-79細胞、RN-c細胞
HNE-2細胞系相關產品：KOPN-8細胞、CL1.0細胞、Hepa 1-6細胞
EFM192細胞系相關產品：SUDHL8細胞、Hs 578.Bst細胞、G-292, clone A141B1細胞
Swiss3T3細胞系相關產品：3T6-Swiss albino細胞、NCI-BL6細胞、NCIH661細胞
SNG-M細胞系相關產品：SKMEL5細胞、OVCA432細胞、CCC-HIE-2細胞
JURKAT E-61細胞系相關產品：MT-4細胞、SCC-1395細胞、SHIN-3細胞
P3X63 Ag8.653細胞系相關產品：Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞、RFL 6細胞、MDAMB175VII細胞
SK.OV.3細胞系相關產品：HME1細胞、NUGC2細胞、Emory University-2細胞
DC2.4細胞系相關產品：Psi-2-DAP細胞、PK136細胞、HNSC細胞
3T3-Swiss albino細胞系相關產品：RPTEC/TERT1細胞、SVG(P12)細胞、ANA-1細胞
H1666_DA細胞系相關產品：RK13細胞、NCI-SNU-387細胞、ARO細胞
HuTu 80細胞系相關產品：BT483細胞、MPC-83細胞、Nakata-1細胞
Colo205細胞系相關產品：KBM-7細胞、RAG細胞、MHCC 97細胞
COLO 320DM細胞系相關產品：4T1.2細胞、R2C細胞、C3H/10T1/2 CL8細胞
SUDHL8細胞系相關產品：OCI Ly19細胞、N1E115細胞、GM05887細胞
TE-14細胞系相關產品：A-20細胞、C33A細胞、HEC1A細胞
End1/E6E7細胞系相關產品：Vero E6細胞、HECCL-1細胞、H1869細胞
PT67 Thawing小鼠逆轉錄病毒包裝細胞系
HSAS1細胞系相關產品：hEM15A細胞、NSH細胞、rHSC-99細胞
MNNGHOS細胞系相關產品：BIC1細胞、V 79細胞、H28細胞
SK BR 03細胞系相關產品：3T3NIH細胞、KTC1細胞、Hs 739.T細胞
SPCA1細胞系相關產品：Hep-G2細胞、DHL-5細胞、CCD 966 SK細胞
Lu99A細胞系相關產品：B16-F1細胞、Renal Carcinoma細胞、MBT2細胞
MFE-280細胞系相關產品：HSAS3細胞、JB6Cl30細胞、L- cell細胞
NCI-H865細胞系相關產品：SU-DHL-6細胞、AZ-521細胞、SU-DHL-2細胞
E6-1細胞系相關產品：FRhK-4細胞、293 c18細胞、143 B細胞
HUCEC細胞系相關產品：RKO細胞、SUD-4細胞、HT-29/CX-1細胞
BT-325細胞系相關產品：SNU601細胞、Merwin Plasma Cell tumor-11細胞、NCI-H87細胞
TYKnu細胞系相關產品：NCIH1915細胞、OVSAHO細胞、Fortner's melanotic melanoma #3細胞
QGP 1細胞系相關產品：H-35細胞、LTEPsm細胞、CATH.a細胞
NCI-H441細胞系相關產品：HCC-366細胞、MN 60細胞、DITNC1細胞
X63-AG 8.653細胞系相關產品：LAN-5細胞、OVCAR433細胞、H-157細胞
RCC4細胞系相關產品：KM933細胞、NCI-SNU-423細胞、HEK 293-F細胞
NBLAN5T細胞系相關產品：KFB細胞、HEL-299細胞、CEK細胞
MCF-7/AdrR細胞系相關產品：RPMI no 8226細胞、NCIH28細胞、HBE135-E6E7細胞
Hepa-RG細胞系相關產品：SF 763細胞、DHL4細胞、NCIH1373細胞
MUTZ-3細胞系相關產品：H1915細胞、NCIH1734細胞、DV-90細胞
COLO.205細胞系相關產品：PC3細胞、RCM1細胞、NCI-1155細胞
H-1650細胞系相關產品：IPLB-SF 21細胞、DAKIKI Clone 1細胞、U 266細胞
Kelly細胞系相關產品：OSC19細胞、CHL-IU細胞、CCD-1095Sk細胞
Jurkat Clone E6-1細胞系相關產品：CNE2Z細胞、D-324MED細胞、RIN-m細胞
KAT-5細胞系相關產品：NCIH2030細胞、NCIH1993細胞、CMT93細胞
A375.S2細胞系相關產品：DMS-153細胞、NH6細胞、NOZAWA細胞
NOZC-1細胞系相關產品：F442A細胞、MFE-280細胞、Hs 636.T細胞
H-841細胞系相關產品：SUM 102PT細胞、MES-SA細胞、CEM/0細胞
SKLMS-1細胞系相關產品：NTERA2D1細胞、ASPC1細胞、16-HBE14o細胞
HSC-6細胞系相關產品：PC3M-2B4細胞、OVCAR.8細胞、Ca Ski細胞
IM95細胞系相關產品：CORL279細胞、Nakata-1細胞、Panc_04_03細胞
MDA-415細胞系相關產品：HUVEC細胞、Mouse INsulinoma 6細胞、C22 (Clara)細胞
U118細胞系相關產品：HNE-2細胞、GM17346細胞、MRAEC細胞
MC-3T3細胞系相關產品：CESS細胞、A-172MG細胞、RFL 6細胞
PT67 Thawing小鼠逆轉錄病毒包裝細胞系
Hs839.T細胞系相關產品：SCC154細胞、VMM39細胞、Becker細胞
H-524細胞系相關產品：SRA01/04細胞、FC33細胞、Rat Glomerular Endothelial細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞系相關產品：GLRK 13細胞、EJ1細胞、HTR-8/SVneo細胞
Roswell Park Memorial Institute 8402細胞系相關產品：Centre Antoine Lacassagne-39細胞、NCI-H378細胞、CAL-33細胞
D341Med細胞系相關產品：NCI-H2405細胞、U20S細胞、MDA-MB-157細胞
NFHIOSE-29細胞系相關產品：NCM356細胞、NCI-H2029細胞、NCIH1341細胞
GBC-SD細胞系相關產品：Alexander細胞、Hx-147細胞、PL5細胞
A10細胞系相關產品：SK-MEL2細胞、alphaTC clone 6細胞、OV90細胞
KATOIII細胞系相關產品：NCI-841細胞、Z310細胞、NIH:OVCAR-4細胞
Anip973細胞系相關產品：WI-38細胞、COLO-320-DM細胞、MDCKII細胞
F9細胞系相關產品：Roswell Park Memorial Institute 8402細胞、NCI-H2052細胞、A-1847細胞
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