"PT67 epithelioid cells小鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細胞系 細胞背景資料:逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細胞;雄性;NIH Swiss 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉! TE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OC316細胞、Sf-21細胞、HCC-1395細胞 GRSL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Granta519細胞、DBTRG-05MG細胞、NCI-H1836細胞 GB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 680N細胞、HL1細胞、rUCMSCs細胞 細胞生長:貼壁 PT67 epithelioid cells小鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞學(xué)在生命科學(xué)科中起著至關(guān)重要的作用,近年來細胞學(xué)蓬勃發(fā)展,并取得了重大的進展,細胞實驗室的構(gòu)建也是各個院校生物學(xué)科必備的實驗室。細胞實驗謹慎復(fù)雜,需要的實驗設(shè)備種類繁多,下面就一些動物細胞實驗室必備儀器進行簡單介紹:CO2培養(yǎng)箱是細胞培養(yǎng)的必備儀器,它為細胞提供了一個體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境,如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O2濃度等。細胞在體外培養(yǎng)時很容易受到各種細菌、微生物的感染,因此,CO2培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要。純水系統(tǒng):細胞培養(yǎng)用水一般要求雙蒸水,實際上普通蒸餾水經(jīng)玻璃器皿中按標準方法蒸餾二次得到的雙蒸水是不能滿足要求的,而且水中的內(nèi)毒素直接參與細胞凋亡,血清中內(nèi)毒素含量越低,對細胞毒性越小,越利于細胞的生長和傳代;內(nèi)毒素含量過高,會直接導(dǎo)致細胞提前老化。因此建議配置正式的水純化系統(tǒng)。超凈工作臺/生物安全柜:細胞培養(yǎng)對無菌環(huán)境要求很高,在細胞操作時,一般需要在100級空氣質(zhì)量條件下進行,因此超凈工作臺或生物安全柜就必須配備。液氮罐:為了保存細胞,特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株,要將細胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-196℃,因此,需要液氮罐。在此環(huán)境中,一般細胞可以保存十年具有活性。超低溫冰箱:細胞的凍存過程需要一系列程序降溫,一般4℃下存放30min,轉(zhuǎn)放-20℃ 1 hour,再轉(zhuǎn)入-70至-80℃過夜,之后才可以轉(zhuǎn)移到液氮內(nèi)(-196℃),這時就必須配備一臺-86℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細胞可達數(shù)月,對于不需要長期凍存的細胞,可暫時放于超低溫冰箱保存。恒溫水浴:從液氮或超低溫冰箱中取出細胞凍存管需要立即放于37℃水浴中快速復(fù)蘇之后才傳代培養(yǎng),因此,恒溫水浴也是細胞實驗室必備儀器。離心機:細胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細胞,所以需要配置低速的常溫離心機,對于后期細胞內(nèi)容物的分離則需要高速冷凍離心機。移液器和細胞培養(yǎng)的大量耗材:細胞實驗中有大量頻繁的移液操作,因此各種微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各類細胞培養(yǎng)板、細胞培養(yǎng)瓶、移液管等耗材更是不可或缺的,而且一次性,用量極大。除上述儀器外,高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡也是細胞培養(yǎng)的必備儀器,發(fā)酵罐、轉(zhuǎn)瓶機等也常常見于細胞培養(yǎng)實驗室。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 SKNDZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:751-NA-15細胞、HCC366細胞、PFSK-1細胞 HCE-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-8_13細胞、CBRH-7919細胞、HTh-74細胞 R3/1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JS1細胞、NK-10A細胞、HSC2細胞 Rat 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMrSV5細胞、NCI-H1792細胞、ACT-1細胞 Ra #1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-10細胞、MDAMB157細胞、H-1781細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 PT67 epithelioid cells小鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。 190PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 888.T細胞、OCM1A細胞、Calu 3細胞 NCI-H2170細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞、BHT101細胞、COLO-824細胞 5637細胞系相關(guān)產(chǎn)品:2T細胞、H292細胞、SUP T1細胞 COV504細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H341細胞、Rh30細胞、Hs 27細胞 PK(15)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW403細胞、T/G HA-VSMC細胞、BGC823細胞 697細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC3細胞、CCD 841 CoN細胞、NCI-H841細胞 KAT5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTori-3.1細胞、MHH-CALL2細胞、H-1404細胞 LO2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE 29細胞、NR 8383細胞、Hs 695T細胞 C4-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BpRc1細胞、D-341 Med細胞、Hs 888.Lu細胞 G-292 clone A141B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EB2細胞、NCIH244細胞、LLC1細胞 PT67 epithelioid cells小鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細胞系 NIE 115細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16-F10-BL6細胞、Bac1 2F5細胞、NCIH1395細胞 Sol8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAW2647細胞、Oregon J-111細胞、U-118MG細胞 hADSCs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CLONE M3細胞、MESSA Dx5細胞、J82COT細胞 MGHU3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT.4細胞、WM-115細胞、NCIH1963細胞 COLO201細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Duke University 4475細胞、BC-PAP細胞、Karpas422細胞 SUM-52PE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM01232E細胞、LLC-PK1細胞、U-226AR1細胞 SUM-52PE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM01232E細胞、LLC-PK1細胞、U-226AR1細胞 H1436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep 2細胞、NRK clone 49F細胞、D6P2T細胞 EFM192細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL8細胞、Hs 578.Bst細胞、G-292, clone A141B1細胞 A2780/CP70細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-375SM細胞、SNU-16細胞、alpha TC1-6細胞 MG-63細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TEV-1細胞、NRK-52E細胞、FK81細胞 KAT-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2030細胞、NCIH1993細胞、CMT93細胞 hs 68細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSB1細胞、MOLP-2細胞、RBL2H3細胞 MOLT16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774A1細胞、NCIH292細胞、NeHepLxHT細胞 3T3(A31)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN-1細胞、H-548細胞、PL-11細胞 H2066細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H889細胞、T-84細胞、PLA802細胞 MDA231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JURKAT E-61細胞、Panc813細胞、KU-812細胞 HCC0044細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-4 I細胞、Hs 852.T細胞、VERO76細胞 JB6 Cl 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞、HEY-A8細胞、NCIH1184細胞 NIH:OVCAR-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63-Ag8.653細胞、QBI-HEK 293A細胞、IEC-6細胞 LC1/Sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 822.T細胞、Be-Wo細胞、HCC-1806細胞 HEK293-EBNA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:16HBE細胞、M21細胞、IPECJ2細胞 Monomac-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2228細胞、Panc 10.05細胞、SUM190細胞 SUD-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHOK1細胞、H4-II-E-C3細胞、CHL-IU細胞 CD18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LUDLU 1細胞、MARC-145細胞、HCC0827細胞 J-111細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero 76 clone E6細胞、LAD2細胞、HT-22細胞 hTERT-RPE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SAS細胞、MASMC細胞、TE32細胞 H8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-354細胞、HCC-78細胞、Jurkat Clone E6-1細胞 Hs_578t細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOZC-1細胞、MILE SVEN 1細胞、NCIH1876細胞 SF 126細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16/BL6細胞、BSC-1細胞、SUM102細胞 H-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2126細胞、NCI-H2228細胞、UACC-812細胞 IMR 90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-398細胞、SCLC-21H細胞、Sp2/mIL-6細胞 TE 32細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pro-5 Lec1.3c細胞、T-ALL 1細胞、NCI-H23細胞 Hs 870.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPVSMC細胞、MRC5細胞、KYSE510細胞 Colon-26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN 382細胞、PM6細胞、COLO 357細胞 RKOAS451細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T2(174 x CEM.T2)細胞、H-2141細胞、H-820細胞 MC57細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB19-RIKEN細胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞、NPA細胞 MA-104細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rin-M-5F細胞、RT4-D6P2T細胞、UMR106細胞 FRTL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-675-T細胞、P3X63Ag8.653細胞、SO-RB50細胞 MDA.MB.435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-cell with DC Morphology細胞、PCI-4.2細胞、Liver-02細胞 T/GHA-VSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC-7901細胞、NCIH441細胞、KOSC2細胞 HMCB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madin-Darby Bovine Kidney細胞、MDCKII-WT細胞、NPC-TW 01細胞 H-1355細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HIE-2細胞、BERH-2細胞、UCLA NPA871細胞 NCI-H1435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat-1細胞、MHCC97L細胞、NCI-H1668細胞 U-343MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-601細胞、SW480E細胞、DB細胞 Ect1/E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH-3T3-L1細胞、H-676B細胞、End1/E6E7細胞 KG-1a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HVSMC細胞、ROS17/28細胞、QG-56細胞 UMRC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:32D/cl3細胞、Malme3M細胞、HBZY-1細胞 OSA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHIN3細胞、SUDHL-4細胞、OCI-Ly07細胞 Y3-Ag1.2.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH1細胞、NBL-1細胞、ETCC007細胞 Fetal Rhesus Kidney-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGR-OV1細胞、HOS TE85細胞、LAN-6細胞 PT67 epithelioid cells小鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細胞系 H226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1882細胞、SK N SH細胞、CEM.C1細胞 8305C_1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2087細胞、LL/2 (LLC1)細胞、HOP62細胞 C918細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL CL.2細胞、CL11細胞、HPF細胞 5637細胞系相關(guān)產(chǎn)品:2T細胞、HUSMC細胞、SK-N-BE(2)-C細胞 "
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