"PT67 Cell:小鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞背景資料:逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞;雄性;NIH Swiss
Namalwa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A 253細(xì)胞、CV-1 in Origin Simian-7細(xì)胞、Mc Ardle 7777細(xì)胞
FRhK4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH508細(xì)胞、CCLP-1細(xì)胞、Tn 5B1-4細(xì)胞
LN299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat1細(xì)胞、ROS 17/28細(xì)胞、EB-1細(xì)胞
Hs 578.Bst細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2107細(xì)胞、MPC-5細(xì)胞、HL-60細(xì)胞
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
PT67 Cell:小鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞系
因為細(xì)胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系,大部分的細(xì)胞都是要成片生長的,尤其是對于貼壁細(xì)胞,單個細(xì)胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細(xì)胞抱團的話,傳代后細(xì)胞是不能貼壁的,這樣抱團的細(xì)胞就會死亡。所以,消化傳代的時候一定要將細(xì)胞消化成單個單個的獨立狀態(tài),這個啊是非??季磕愕墓Ψ虻?!細(xì)胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個,因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細(xì)胞。所以必須要在細(xì)胞未脫落之前將其吹打開,受力點就是細(xì)胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴(yán)格控制好消化的程度啊,這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來,又不能太過,一吹就整片脫落,要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細(xì)胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細(xì)胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-2細(xì)胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點就是一定不能等到細(xì)胞長滿的時候才去消化傳代。要在細(xì)胞長到70%左右的時候就要傳代了,一旦發(fā)現(xiàn)細(xì)胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)胞,你在洗的時候如果是用無血清1640去洗細(xì)胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣,用1640培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話,可以用PBS來洗,洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的,對于有些細(xì)胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清,防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先,是很關(guān)鍵的一點。先補充這么多,還會后續(xù)更新。再補充一點:傳代時PBS洗是很重要的一步,最近發(fā)現(xiàn),用PBS就可以把細(xì)胞消化開來。加入PBS放置10-15分鐘,有些需要更長的時間,等到細(xì)胞一個個分離開來的時候,就可以直接吹打下來,但是和胰酶消化一樣,要控制好時間,不能時間太過了,要不然損傷細(xì)胞,細(xì)胞不容易成活,狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細(xì)胞是很管用的。有些細(xì)胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候,或者臨時沒有胰酶了,可以選用此方法。不過一定要試試,看是否適合你的細(xì)胞。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細(xì)胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決;2)貼壁細(xì)胞生長緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細(xì)胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細(xì)胞進行消化,重懸打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
CCRFCEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM-1S細(xì)胞、SR786細(xì)胞、HTori:3細(xì)胞
HuO9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1990細(xì)胞、MDA-436細(xì)胞、BT.549細(xì)胞
FUOV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO320 DM細(xì)胞、MonoMac 6細(xì)胞、MNNGHOS細(xì)胞
SK N SH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCC MSB1細(xì)胞、Hopkins-92細(xì)胞、H-1341細(xì)胞
COLO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 766T細(xì)胞、OACP4 C細(xì)胞、Hs-675-T細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁
PT67 Cell:小鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞系
貼壁消化難題:1,先用PBS 把細(xì)胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細(xì)胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細(xì)胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細(xì)胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細(xì)胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細(xì)胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細(xì)胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細(xì)胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細(xì)胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細(xì)胞很多且需要大量細(xì)胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細(xì)吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細(xì)胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細(xì)胞或細(xì)胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細(xì)胞,收集全部的細(xì)胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細(xì)胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉!
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
HSC(Human Schwann)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HHM-2細(xì)胞、SupB15W細(xì)胞、GM17219細(xì)胞
RC92A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1648細(xì)胞、CCC-HEH-2細(xì)胞、HUT 125細(xì)胞
L929(NCTC)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-26細(xì)胞、GP-293細(xì)胞、AHH1細(xì)胞
Med 341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:373MG細(xì)胞、HG2855細(xì)胞、U-87 MG細(xì)胞
NCTC929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OAW-42細(xì)胞、GM07404細(xì)胞、SK-N-BE(1)n細(xì)胞
JCA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-Hut 125細(xì)胞、Sp2/O細(xì)胞、H-64細(xì)胞
Colon 26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jiyoye (P-2003)細(xì)胞、Ramos細(xì)胞、MHCC97細(xì)胞
PT67 Cell:小鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞系
Panc02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P815細(xì)胞、KTA-7細(xì)胞、CHOS細(xì)胞
Hs-940細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA RO-81-A-1細(xì)胞、SK-Hep1細(xì)胞、751-NA-15細(xì)胞
Transformed Human Liver Epithelial-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OKT3細(xì)胞、MOLM-13細(xì)胞、RAW264細(xì)胞
Hs-688A-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP.FGC細(xì)胞、ANA1細(xì)胞、HTR-8/SV-neo細(xì)胞
H-716細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL-IU細(xì)胞、KYSE140細(xì)胞、MGH-U3細(xì)胞
SUP-B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 7951細(xì)胞、Hep-G2細(xì)胞、SKLMS1細(xì)胞
MSCs(mUCMSCs)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH64細(xì)胞、NIH:OVCAR4細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細(xì)胞
COLO-320DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H510A細(xì)胞、L-cell細(xì)胞、PK-15細(xì)胞
QGP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H220細(xì)胞、MT-2J細(xì)胞、LS-180細(xì)胞
QGP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H220細(xì)胞、MT-2J細(xì)胞、LS-180細(xì)胞
SVHUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2052細(xì)胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1細(xì)胞、NCI-H716細(xì)胞
SUPB-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-841-CoN細(xì)胞、HCT-8細(xì)胞、NCI-H446細(xì)胞
HEMCSS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:STTG1細(xì)胞、SKCO 1細(xì)胞、RL95細(xì)胞
Kit225-K6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H358細(xì)胞、Okayama University Medical School-27細(xì)胞、HeLa.S3細(xì)胞
H295R-S1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AU565細(xì)胞、AN3-CA細(xì)胞、HEK-2細(xì)胞
NCI.H226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC1-B細(xì)胞、5-8F細(xì)胞、NCI H508細(xì)胞
RKO_AS45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCL-H548細(xì)胞、X63-Ag8.653細(xì)胞、Saos2細(xì)胞
LC2/Ad細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCM1細(xì)胞、McG-1細(xì)胞、Hep II細(xì)胞
SNU1040細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:16HBE14o-細(xì)胞、PLA-801D細(xì)胞、RSC 96細(xì)胞
HUT-226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC23細(xì)胞、COLO-699細(xì)胞、OVCAR10細(xì)胞
U-343-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OUMS-27細(xì)胞、CMT 93細(xì)胞、H1568細(xì)胞
SW-1783細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRhK4細(xì)胞、CHOK1細(xì)胞、U14細(xì)胞
NKM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC 10細(xì)胞、RD-2細(xì)胞、766T細(xì)胞
L-6 myoblast細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30-OHKUBO細(xì)胞、SKCO-1細(xì)胞、TALL-104細(xì)胞
MKN-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM12 SM細(xì)胞、108CC15細(xì)胞、NR-8383細(xì)胞
Walker256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1993細(xì)胞、kms 11細(xì)胞、624mel細(xì)胞
HTR8svn細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-9204細(xì)胞、Panc3_27細(xì)胞、HT-144細(xì)胞
MCA 205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1417細(xì)胞、Vero-E6細(xì)胞、SCL1細(xì)胞
E.L.4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL9217細(xì)胞、HEL299細(xì)胞、SVHUC細(xì)胞
GS-9L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-028細(xì)胞、Neukoplast細(xì)胞、OAW42細(xì)胞
TGW細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone Y-1細(xì)胞、ARO細(xì)胞、RCC-JF細(xì)胞
FLC-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16 F10細(xì)胞、B95-8細(xì)胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細(xì)胞
SK LU 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EMT6細(xì)胞、LA-N-6(OAN)細(xì)胞、NCIH1836細(xì)胞
HCV 29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly19細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細(xì)胞、OSRC2細(xì)胞
SK LU 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EMT6細(xì)胞、LA-N-6(OAN)細(xì)胞、NCIH1836細(xì)胞
CCFSTTG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL105細(xì)胞、HSAEC1-KT細(xì)胞、HCC2279細(xì)胞
HUC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H187細(xì)胞、Astrocyte type I clone細(xì)胞、TE-12細(xì)胞
NCI-H1666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mouse Bladder Tumor line-2細(xì)胞、MDA-MB-435 S細(xì)胞、GM02131細(xì)胞
CII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLFC細(xì)胞、bEnd3細(xì)胞、HEL92.1.7細(xì)胞
Tsup-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCFSTTG1細(xì)胞、58F細(xì)胞、HCC-1954BL細(xì)胞
Tsup-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCFSTTG1細(xì)胞、58F細(xì)胞、HCC-1954BL細(xì)胞
SNG-M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL5細(xì)胞、OVCA432細(xì)胞、CCC-HIE-2細(xì)胞
NCI-H841細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL.1ME A.7R.1細(xì)胞、NOZAWA細(xì)胞、Colo16細(xì)胞
PT67 Cell:小鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞系
Centre Antoine Lacassagne-78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-548細(xì)胞、LNT-229細(xì)胞、NTERA2-cloneD1細(xì)胞
HCT 116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1694細(xì)胞、MOLT-16細(xì)胞、Metastatic Variant-522細(xì)胞
HCC202細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NKM1細(xì)胞、WEHI 164 TC細(xì)胞、SUDHL16細(xì)胞
Homo sapiens No. 578, breast cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TMK-1細(xì)胞、Ramos.2G6.4C10細(xì)胞、COLO 206F細(xì)胞
DMS53細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ca-Ski細(xì)胞、L428細(xì)胞、H1836細(xì)胞
Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B10BR細(xì)胞、C-33A細(xì)胞、HuH 6細(xì)胞
Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NFHIOSE-29細(xì)胞、A 2058細(xì)胞、H-2347細(xì)胞
hTERT-HME1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-673細(xì)胞、COLO 320 HSR細(xì)胞、NL-20細(xì)胞
NOMO1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Keio University-19-19細(xì)胞、Evsa T細(xì)胞、Kit 225 K6細(xì)胞
Vero 76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(1)細(xì)胞、HM細(xì)胞、PG-4 S+L-細(xì)胞
HEMCSS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:STTG1細(xì)胞、SKCO 1細(xì)胞、RL95細(xì)胞
Tb 1-Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL-HCC細(xì)胞、SF767細(xì)胞、CV-1 in Origin Simian-1細(xì)胞
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