"MDBK Thawing牛腎細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
MDBK Thawing牛腎細(xì)胞系
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴(yán)格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時間，通常控制在１-２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散；３)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細(xì)胞密度達(dá)到８０%以后重復(fù)１項(xiàng)操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細(xì)胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過７２小時)；２)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化，請將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室。
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
貼壁細(xì)胞消化傳代時通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對細(xì)胞施加胰酶選擇，因?yàn)榭偸琴N壁不牢的細(xì)胞先脫落，對腫瘤細(xì)胞來說，這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對于較難消化的細(xì)胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點(diǎn)，直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積１/１０v。消化到有細(xì)胞脫落。不過有人說EDTA對細(xì)胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡單、省事；效果很好并且不損失細(xì)胞！
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
MDBK Thawing牛腎細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時體積會增加約１０%，必須預(yù)留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因?yàn)闀枞^濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點(diǎn)”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點(diǎn)”，常會誤認(rèn)為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認(rèn)為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細(xì)菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點(diǎn)應(yīng)不會影響細(xì)胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應(yīng)立即停用，更換另一批號的血清。
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
LCD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-520細(xì)胞、ISHI細(xì)胞、GM12878細(xì)胞
PC615.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC827細(xì)胞、LIM1215細(xì)胞、BEL7402細(xì)胞
AsPC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF12A細(xì)胞、HCT-8/V細(xì)胞、LSECs細(xì)胞
OVCAR3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BLO-11細(xì)胞、SNB.19細(xì)胞、NCI-H711細(xì)胞
Hs 636.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFO-27細(xì)胞、HCC1428細(xì)胞、PAa細(xì)胞
Madison 109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-BL2141細(xì)胞、SK RC 52細(xì)胞、H510細(xì)胞
T/G HA VSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：10T1/2細(xì)胞、AsPC-1細(xì)胞、HARAB細(xì)胞
SW48細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2452細(xì)胞、LAN5細(xì)胞、RS4:11細(xì)胞
AZ 521細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A72細(xì)胞、H1651細(xì)胞、U-343-MG細(xì)胞
8305-C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CDC/EU.HMEC-1細(xì)胞、TGHAVSMC細(xì)胞、MCF12F細(xì)胞
GC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR 4細(xì)胞、C57/B6-L細(xì)胞、TSCC1細(xì)胞
SN12PM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO679細(xì)胞、HeLa細(xì)胞、KYSE180細(xì)胞
H-2066細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA433_Bast細(xì)胞、RKO-AS-45-1細(xì)胞、Panc 02細(xì)胞
ssMCF-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-C1細(xì)胞、NCI.H522細(xì)胞、AZ 521細(xì)胞
H719細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-78細(xì)胞、OKT 3細(xì)胞、NIH:OVCAR-10細(xì)胞
3T6 Swiss Albino細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D283-MED細(xì)胞、WEHI 3細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細(xì)胞
Colo741細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-410細(xì)胞、EnCa1細(xì)胞、TE671細(xì)胞
GP-293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mo7e細(xì)胞、NCI-522細(xì)胞、LCMS細(xì)胞
L-M(TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GB-1細(xì)胞、BALB/3T3細(xì)胞、KMM1細(xì)胞
SNB19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV21細(xì)胞、PFSK-1細(xì)胞、H748細(xì)胞
TGW-I-nu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOK細(xì)胞、N1E-115細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細(xì)胞
TGW-I-nu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOK細(xì)胞、N1E-115細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細(xì)胞
Ly3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H295R細(xì)胞、MDA-MB-330細(xì)胞、LLC-WRC 256細(xì)胞
U-87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC-WRC 256細(xì)胞、TE-12細(xì)胞、McArdle RH-7777細(xì)胞
NCIH1651細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KG-1細(xì)胞、HuT 78細(xì)胞、NCIH1792細(xì)胞
WIL2-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 824細(xì)胞、TH1細(xì)胞、HRPEpiC細(xì)胞
MDBK Thawing牛腎細(xì)胞系
ML-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAMA細(xì)胞、H2452細(xì)胞、NCIH508細(xì)胞
L-363細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2342細(xì)胞、MCF-7細(xì)胞、SK ES 01細(xì)胞
PAa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ML2細(xì)胞、HCC2218細(xì)胞、C-8161細(xì)胞
TGW細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Clone Y-1細(xì)胞、ARO細(xì)胞、RCC-JF細(xì)胞
KYSE50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMVEC細(xì)胞、OCI-Ly10細(xì)胞、EJ-1細(xì)胞
MB 157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI:SCC090細(xì)胞、Z-138細(xì)胞、Hepatoma 22細(xì)胞
786O細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 1細(xì)胞、NCI/ADR-RES細(xì)胞、NCI-H441-4細(xì)胞
NCI-H1651細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco-2/ATCC細(xì)胞、NCI/ADRRES細(xì)胞、ARO 81-1細(xì)胞
BNL CL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT 20細(xì)胞、MDA2B細(xì)胞、Hs-600-T細(xì)胞
HEEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細(xì)胞、BE(2)-C細(xì)胞、JCA1細(xì)胞
W133細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HN 4細(xì)胞、UPCISCC090細(xì)胞、Sp2/0細(xì)胞
IOSE29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C32r細(xì)胞、SCC7細(xì)胞、CORL26細(xì)胞
Ramos 2G6 4C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-04-03細(xì)胞、TE-85細(xì)胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細(xì)胞
OCI Ly10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL-1細(xì)胞、HD-LM-2細(xì)胞、A2780-CP細(xì)胞
NOMO1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Keio University-19-19細(xì)胞、Evsa T細(xì)胞、Kit 225 K6細(xì)胞
SEG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H929細(xì)胞、MDA-435細(xì)胞、Jurkat E6細(xì)胞
QBC(939)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC（Human Schwann）細(xì)胞、ARPE-19細(xì)胞、MuM-2C細(xì)胞
HLEB3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：McA-RH 7777細(xì)胞、2780CP細(xì)胞、NRK-52E細(xì)胞
Michigan Cancer Foundation-10A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ST486細(xì)胞、VP303細(xì)胞、3T3-J2細(xì)胞
TE-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Leydig細(xì)胞、KU1919細(xì)胞、T.T細(xì)胞
MOLT.4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H295細(xì)胞、A2780S細(xì)胞、DCS細(xì)胞
Institute for Medical Research-90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CACO2細(xì)胞、NCIH2009細(xì)胞、NCI-H322T細(xì)胞
FBHE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1781細(xì)胞、A2780/CP細(xì)胞、MHCC97L細(xì)胞
INS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-8細(xì)胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞、MRCV細(xì)胞
ASH3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Michigan-Renal Carcinoma-2細(xì)胞、MM1細(xì)胞、NCTC-929細(xì)胞
SNB.19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC-MK2細(xì)胞、Alpha Mouse Liver 12細(xì)胞、KYSE-180細(xì)胞
HN6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPB-ALL細(xì)胞、NOZ細(xì)胞、MOPC細(xì)胞
Psi2 DAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH128細(xì)胞、A9(Hamprecht)細(xì)胞、ML2細(xì)胞
KMST6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MH7A細(xì)胞、SUM102PT細(xì)胞、NB19-RIKEN細(xì)胞
3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Me-Wo細(xì)胞、WERIRb1細(xì)胞、Line 207細(xì)胞
MDAMB134VI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：R2C細(xì)胞、HCC0015細(xì)胞、RPMI 1846細(xì)胞
KP-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ES-2細(xì)胞、IR983F細(xì)胞、P-19細(xì)胞
HCT8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3 NS1 Ag4細(xì)胞、G361mel細(xì)胞、MDA MB231細(xì)胞
MDBK Thawing牛腎細(xì)胞系
WEHI-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BERH-2細(xì)胞、PC-12細(xì)胞、SKGT4細(xì)胞
A431細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS688AT細(xì)胞、H740細(xì)胞、HCC 94細(xì)胞
LS-1034細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2107細(xì)胞、OsACL細(xì)胞、A 549細(xì)胞
IPEC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3 (Jiyoye)細(xì)胞、CCRF/CEM/0細(xì)胞、SKNO1細(xì)胞
C-Lu65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLP-2細(xì)胞、RCC10細(xì)胞、NCIH2009細(xì)胞
HPDLF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC2935細(xì)胞、MLO-Y4細(xì)胞、J774 A.1細(xì)胞
HDLM-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC-97細(xì)胞、D407細(xì)胞、H2106細(xì)胞
SkChA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：REC1細(xì)胞、H-146細(xì)胞、LU165細(xì)胞
SCC 25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1650細(xì)胞、hESC細(xì)胞、PAN 02細(xì)胞
SW-1222細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SEG1細(xì)胞、GTL 16細(xì)胞、RCK-8細(xì)胞
HARAB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EA. hy 926細(xì)胞、Jurkat FHCRC細(xì)胞、FUOV1細(xì)胞
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