"U-343MG Thawing人腦膠質瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
U-343MG Thawing人腦膠質瘤細胞系
細胞生長：貼壁
細胞凍存的步驟：１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為５×１０６～１×１０７/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇；３)將分裝上述細胞懸液于２ml凍存管中，每管０.２５ml。凍存管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))；４)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中，-８０℃冰箱過夜。；如果有程序降溫器(放在-８０℃冰箱過夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后轉到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞傳代培養(yǎng)實驗：體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代，以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞，并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后，由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭，將培養(yǎng)的細胞分散，從容器中取出，以１:２或１:３以上的比率轉移到另外的容器中進行培養(yǎng)，即為傳代培養(yǎng)；細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間，與細胞世代或倍增不同。在一代中，細胞培增３～６次。細胞傳代后，一般經(jīng)過三個階段：游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度，即細胞群的分裂相數(shù)/１００個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于０.２％～０.５％，腫瘤細胞可達３～５％；細胞接種２～３天分裂增殖旺盛，是活力時期，稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期)，適宜進行各種試驗。實驗步驟：１.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出，在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液，加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜)，靜置５～１０分鐘。２.在倒置鏡下觀察被消化的細胞，如果細胞變圓，相互之間不再連接成片，這時應立即在超凈臺中將消化液倒掉，加入３～５ml新鮮培養(yǎng)液，吹打，制成細胞懸液。３.將細胞懸液吸出２ml左右，加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加３ml左右培養(yǎng)液，蓋好瓶塞，送回二氧化碳培養(yǎng)箱中，繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況，傳代后的細胞在２小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上，２～４天就可在瓶內(nèi)形成單層，需要再次進行傳代。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
U-343MG Thawing人腦膠質瘤細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享：支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物，大小一般在０.３-０.５um之間，呈高度多形性，有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞，也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色，用姬姆薩染色很淺，革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長，營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到６３%，支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達，又不能通過可視法對其進行檢測，而且它對細胞的生長率影響較小，不易引起注意。國內(nèi)外研究表明，９５%以上是以下四種支原體：口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii)，為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群，但能夠污染細胞的支原體種類是很多的，國外調查證明，大約有二十多種支原體能污染細胞，有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中，主要從以下幾個方面來預防支原體的污染：控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作；細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌；在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后，特別是重要的細胞株，有必要清除支原體，常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結構特征是沒有細胞壁，一般來講，對作用于細胞壁生物合成的抗生素，如萬古霉素等完全不敏感；對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用，所以常不用來作為支原體感染的化學治療劑。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
PC3-M細胞系相關產(chǎn)品：Hs 611.T細胞、H-647細胞、HO-8910細胞
MIA Paca2細胞系相關產(chǎn)品：HUT-28細胞、rRTEC細胞、BL2141細胞
Hs 888Lu細胞系相關產(chǎn)品：Ramos 2G6 4C10細胞、KP2細胞、KYSE70細胞
SW780細胞系相關產(chǎn)品：TOV-21G細胞、EB3 [Human Burkitt lymphoma]細胞、Vero E6細胞
MAVER-1細胞系相關產(chǎn)品：AML-193細胞、NCI-H2170細胞、SNU-520細胞
ATN-1細胞系相關產(chǎn)品：Kit 225細胞、EMT-6細胞、H1915細胞
SKMEL28細胞系相關產(chǎn)品：Panc 05.04細胞、Pt K1細胞、PC3M-1E8細胞
HOP 92細胞系相關產(chǎn)品：WiDr/S細胞、624mel細胞、DI-TNC1細胞
U-251 MG細胞系相關產(chǎn)品：AML-EOL-1細胞、AMO1細胞、PC615.3細胞
Line 207細胞系相關產(chǎn)品：HCC1806細胞、BC-022細胞、U251-MG細胞
Y3-Ag 1.2.3細胞系相關產(chǎn)品：0V-1063細胞、DU_145細胞、ECC-10細胞
MDA-MB-231細胞系相關產(chǎn)品：KYSE70細胞、MLA-144細胞、CTX TNA2細胞
HOP 62細胞系相關產(chǎn)品：SNU886細胞、NCI-SNU-16細胞、H-1105細胞
HOS細胞系相關產(chǎn)品：S16細胞、COLO680N細胞、MIA-PaCa-2細胞
GOTO細胞系相關產(chǎn)品：MTC-TT細胞、H1915細胞、HHL5細胞
RCC-10細胞系相關產(chǎn)品：SKCO-1細胞、HS688AT細胞、X63-Ag8細胞
NCTC 1469細胞系相關產(chǎn)品：WiDrTC細胞、Rat Glomerular Endothelial細胞、HCC-1171細胞
NCIH208細胞系相關產(chǎn)品：L6565細胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞、M-G63細胞
KYSE-520細胞系相關產(chǎn)品：Bx-PC3細胞、S180細胞、H35細胞
RMa-bm細胞系相關產(chǎn)品：CT26WT細胞、HEL-92.1.7細胞、HCC2218細胞
EVSA/T細胞系相關產(chǎn)品：OCI/AML-5細胞、NCI-H196細胞、A9細胞
EVSA/T細胞系相關產(chǎn)品：OCI/AML-5細胞、NCI-H196細胞、A9細胞
SCC 25細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1650細胞、hESC細胞、PAN 02細胞
OVCAR 4細胞系相關產(chǎn)品：TSCC1細胞、HIEC細胞、NPA-87細胞
NCIH889細胞系相關產(chǎn)品：LS180細胞、SK-HEP-1細胞、FHL 124細胞
HONE1細胞系相關產(chǎn)品：T2 (174 x CEM.T2)細胞、TR-146細胞、Rin-M-5F細胞
U-343MG Thawing人腦膠質瘤細胞系
EFM-192A細胞系相關產(chǎn)品：H524細胞、Anip 973細胞、Mv1Lu細胞
CCD18細胞系相關產(chǎn)品：T-98G細胞、IM9細胞、NCI-H2110細胞
U-251-MG細胞系相關產(chǎn)品：SW-962細胞、RPTEC TERT1細胞、Hs840T細胞
UMC-11細胞系相關產(chǎn)品：Human Embryo Kidney-2細胞、TSCCa細胞、SNU-620細胞
MIO-M1細胞系相關產(chǎn)品：PL12細胞、OCI/AML2細胞、ZR7530細胞
DH-82細胞系相關產(chǎn)品：PANC-03-27細胞、CMT167細胞、BC-009細胞
T2細胞系相關產(chǎn)品：HCC-38細胞、Mel-624細胞、Hs-695-T細胞
U87細胞系相關產(chǎn)品：PANC1005細胞、ECC10細胞、RCM1細胞
X63細胞系相關產(chǎn)品：MPASMC細胞、C8-D1A細胞、SU4細胞
HLMVEC細胞系相關產(chǎn)品：MKN 7細胞、ML-2細胞、HPaSteC(HPSC)細胞
RBVEC細胞系相關產(chǎn)品：OCI AML2細胞、HDLM2細胞、HBZY 1細胞
COLO-205細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1105細胞、COV 434細胞、NMCG-1細胞
FUOV1細胞系相關產(chǎn)品：COLO320 DM細胞、MonoMac 6細胞、MNNGHOS細胞
ATDC-5細胞系相關產(chǎn)品：KMST-6細胞、OVCAR-3細胞、MBMEC細胞
CCD-841-CoN細胞系相關產(chǎn)品：DOK細胞、SK MEL 28細胞、LK 2細胞
HFF-1細胞系相關產(chǎn)品：MHCC 97-L細胞、McARH7777細胞、HCC827細胞
KP4細胞系相關產(chǎn)品：NS653細胞、F9細胞、VP229細胞
3T3 L1細胞系相關產(chǎn)品：NL20SV細胞、IEC6細胞、NALM 6細胞
M-O7e細胞系相關產(chǎn)品：HCE-T細胞、EFO27細胞、NCIH548細胞
WML2細胞系相關產(chǎn)品：UMR-106細胞、BCP1細胞、K7M2細胞
HeLa-229細胞系相關產(chǎn)品：HEK 293T/17細胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞、SP2/0 Ag-14細胞
HS766T細胞系相關產(chǎn)品：CTLL(2)細胞、HMO6細胞、PZ-HPV-7細胞
CAL62細胞系相關產(chǎn)品：H-2405細胞、NCI-H-82細胞、AgC11x3A細胞
H647ell細胞系相關產(chǎn)品：SMMC-7721細胞、C3H10T1/2細胞、OCIAML4細胞
MA104細胞系相關產(chǎn)品：ONS-76細胞、MOLM16細胞、HSC1細胞
WC00059細胞系相關產(chǎn)品：GM01232細胞、LTEPa2細胞、NCI H157細胞
NCIH2126細胞系相關產(chǎn)品：GM05862細胞、H1954細胞、HS-766T細胞
LUDLU-1細胞系相關產(chǎn)品：HOP62細胞、SY5Y細胞、NCIH1734細胞
HPB/ALL細胞系相關產(chǎn)品：SP-2/0-AG14細胞、H-1299細胞、HGBEC細胞
MT-2J細胞系相關產(chǎn)品：SKNAS細胞、FUOV1細胞、293/EBNA細胞
SNU-719細胞系相關產(chǎn)品：HcerEpic細胞、P36細胞、Sp2/0-Ag14細胞
HFL-I細胞系相關產(chǎn)品：Tregs細胞、HT1376細胞、H-295細胞
WI-38細胞系相關產(chǎn)品：RD細胞、LMTK-細胞、OCI-AML3細胞
U-343MG Thawing人腦膠質瘤細胞系
LN-229細胞系相關產(chǎn)品：RGCs細胞、786-0細胞、hSCC-25細胞
RINm5F細胞系相關產(chǎn)品：AMO1細胞、U138MG細胞、SKHEP-1細胞
IBRS2細胞系相關產(chǎn)品：DoTc2-4510細胞、NCI-H1092細胞、SW780細胞
QBI-HEK 293A細胞系相關產(chǎn)品：EU-2細胞、MN9D細胞、CHAGOK1細胞
Transformed Human Liver Epithelial-2細胞系相關產(chǎn)品：OKT3細胞、MOLM-13細胞、RAW264細胞
SW13細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1436細胞、WERI-Rb1細胞、hTERT-HME-1細胞
HPAEC細胞系相關產(chǎn)品：Vero細胞、FBHE細胞、SK-SH-SY5Y細胞
H-460細胞系相關產(chǎn)品：GLC-82細胞、RT-4細胞、B16F0細胞
Colon 26細胞系相關產(chǎn)品：Jiyoye (P-2003)細胞、Ramos細胞、MHCC97細胞
H-250細胞系相關產(chǎn)品：H520細胞、Functional Liver Cell-7細胞、OUMS-27細胞
SKM1細胞系相關產(chǎn)品：QBC-939細胞、KBM-5細胞、NCIH647細胞
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