"KYSE-270 Thawing人食道鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
KYSE-270 Thawing人食道鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長：貼壁
常見細(xì)胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié)：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的含量多少會對細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過２０%，因?yàn)楹窟^低會導(dǎo)致細(xì)胞營養(yǎng)不足，過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時須更換培養(yǎng)基？視細(xì)胞生長密度而定，或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換；３)購買的復(fù)蘇細(xì)胞，為何會有脫落？因?yàn)檫\(yùn)輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩，收到后可以離心收集；４)購買的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少，大都是因?yàn)殡x心過程操作上的失誤，造成細(xì)胞的物理性損傷，以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心，應(yīng)待細(xì)胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因？研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細(xì)胞解凍后，加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細(xì)胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時用力不當(dāng)，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：５傳代
正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項(xiàng)：細(xì)胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢？沒錯，就是記得到時間了，拿出來復(fù)蘇。那么，細(xì)胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項(xiàng)呢？細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細(xì)胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細(xì)胞：補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長至７０%單層時收獲細(xì)胞，計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細(xì)胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì)；５-１５%甘油；如果細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長，應(yīng)在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長２４小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞，以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題！細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點(diǎn)：當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時，有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要；其實(shí)，細(xì)胞復(fù)蘇只是一個簡單的實(shí)驗(yàn)，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié)，不然，也不一定會盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護(hù)目鏡；盡量降低DMSO對細(xì)胞的損傷等等。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
KYSE-270 Thawing人食道鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
細(xì)胞傳代的一般方法：開始細(xì)胞傳代前，仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全：一般主要有：細(xì)胞(單層細(xì)胞，鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-０.２%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或１９９等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液（１萬單位）、７.５％NaHC０３溶液、０.２５％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(１００m１)、克氏瓶、膠塞、吸管(１０ml、１m１）、細(xì)胞吹打管（２０ml）(以上用具需經(jīng)１２１℃至少１５分鐘高壓滅菌)、C０２ 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、４℃、-２０℃冰箱；操作步驟：鏡檢細(xì)胞，挑選生長狀態(tài)良好，細(xì)胞界限清晰，具有立體感，形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液：按以下配比配制MEM-０.２%LH培養(yǎng)液１００ml內(nèi)，加入滅活小牛血清１０m１，慶大霉素溶液０.３m１，７.５%碳酸鈉溶液３ml。（僅供一般參考）。消化細(xì)胞；先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面１-２次，每次１０m１，棄去洗液，向細(xì)胞瓶內(nèi)加入０.２５％胰蛋白酶溶液，每瓶１m１，細(xì)胞瓶平放，使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入１０m１細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞，按所需的傳代比例分裝于小方瓶(１００m１)中，再加入１０m１細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝，然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞，置于３７±１℃孵箱培養(yǎng)。約２～４天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定)；填寫傳代記錄。
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮樣
L-M (TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp2/0細(xì)胞、SKGT2細(xì)胞、SKG IIIa細(xì)胞
RCC10 RGB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1187細(xì)胞、HEC-1B細(xì)胞、Rat Skin 1細(xì)胞
Suzhou Human Glioma-44細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：52PE細(xì)胞、H-157細(xì)胞、B16 melanoma F10細(xì)胞
Human Fetal Thymocyte-8810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1569細(xì)胞、H-69細(xì)胞、KATO III細(xì)胞
MLOY4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC615.3細(xì)胞、GM346細(xì)胞、GM00346細(xì)胞
293F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1876細(xì)胞、T_T_細(xì)胞、MV4;11細(xì)胞
H-II-E-C3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：beta-TC6細(xì)胞、MDCK-2細(xì)胞、NE1細(xì)胞
H-146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1359細(xì)胞、H64細(xì)胞、KALS1細(xì)胞
CCD-112 CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：266 Bl細(xì)胞、H211細(xì)胞、Panc-02細(xì)胞
130-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G361-mel細(xì)胞、Pt-K2細(xì)胞、SUM 159PT細(xì)胞
WML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMR-106細(xì)胞、BCP1細(xì)胞、K7M2細(xì)胞
CAL 120細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV-1.K細(xì)胞、D562細(xì)胞、MRC9細(xì)胞
TE-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV4:11細(xì)胞、CHOS細(xì)胞、NCI-H820細(xì)胞
HL-60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-813細(xì)胞、CX-1細(xì)胞、KNS62細(xì)胞
T24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KCL22S細(xì)胞、MDA PCa 2b細(xì)胞、RGC5細(xì)胞
HCT-116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGW-I-nu細(xì)胞、ssMCF7細(xì)胞、RCC-JF細(xì)胞
A549-Taxol細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLM細(xì)胞、KYSE410細(xì)胞、LNCaP-Clone-FGC細(xì)胞
SU-86-86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCA 7細(xì)胞、NCIH820細(xì)胞、OVCA8細(xì)胞
H-1792細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Detroit 562細(xì)胞、NTERA-2 clone D1細(xì)胞、HuPT3細(xì)胞
WM 239-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCP1細(xì)胞、H-2106細(xì)胞、TE353.SK細(xì)胞
MM96L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-767細(xì)胞、DoHH2細(xì)胞、IEC18細(xì)胞
MM96L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-767細(xì)胞、DoHH2細(xì)胞、IEC18細(xì)胞
SNK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 966SK細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細(xì)胞、H-2085細(xì)胞
MDA-MB-435S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs_578t細(xì)胞、EoL-1 cell細(xì)胞、G402細(xì)胞
P3X63 Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2291細(xì)胞、FCCH1024細(xì)胞、SU-DHL6細(xì)胞
Hs 294T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA-2 clone D1細(xì)胞、OVCAR.5細(xì)胞、CHL細(xì)胞
KYSE-270 Thawing人食道鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系
H-128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H125細(xì)胞、UO-31細(xì)胞、H-9細(xì)胞
bEnd.3[BEND3]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1819細(xì)胞、FL83B細(xì)胞、BC3 H1細(xì)胞
A 2780 CP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-620細(xì)胞、SKNBE-1細(xì)胞、NCI-H1838細(xì)胞
CORL51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1299細(xì)胞、CF Pac1細(xì)胞、Hs746-T細(xì)胞
NCIH1573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT26細(xì)胞、KYSE50細(xì)胞、MOVAS細(xì)胞
KMM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMS1598細(xì)胞、SACCLM細(xì)胞、Hs-578T細(xì)胞
TGW-nu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNEP細(xì)胞、OCI Ly10細(xì)胞、TE-85細(xì)胞
KHYG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：no-11細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-12A細(xì)胞、P30OHK細(xì)胞
LA-N-6(OAN)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mel RM細(xì)胞、MHCC97H細(xì)胞、NG 108-15細(xì)胞
LL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMNSAH-DF 1細(xì)胞、HL-60細(xì)胞、SW 1116細(xì)胞
ABC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1869細(xì)胞、L 363細(xì)胞、NCIH1930細(xì)胞
Cattle chondrocytes細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L5178YR細(xì)胞、S37細(xì)胞、P3JHR1細(xì)胞
HBVP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1793細(xì)胞、Panc-8_13細(xì)胞、Reuber H35細(xì)胞
T-47-D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BTI-TN5B1-4細(xì)胞、Panc_08_13細(xì)胞、KMST6細(xì)胞
CORL88細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1819細(xì)胞、Vx2細(xì)胞、MESSA/Dx5細(xì)胞
786-0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH716細(xì)胞、TOG細(xì)胞、NCIH2291細(xì)胞
SNT-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero E-6細(xì)胞、HPAEC細(xì)胞、HET-1A細(xì)胞
LS123細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-68細(xì)胞、A-172 MG細(xì)胞、HSMC細(xì)胞
NCI-H596細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK supertube細(xì)胞、Vero C1008細(xì)胞、Los Angeles Prostate Cancer-4細(xì)胞
Hs739T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 7細(xì)胞、B-cell with DC Morphology細(xì)胞、H-2171細(xì)胞
Case 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2106細(xì)胞、BGC823細(xì)胞、H1666細(xì)胞
SN4741細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tb1.Lu細(xì)胞、Tn-5細(xì)胞、Fetal Human Lens-124細(xì)胞
526細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC-52細(xì)胞、LUDLU-1細(xì)胞、H548細(xì)胞
NHLF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：149PT細(xì)胞、A-1847細(xì)胞、Anglne細(xì)胞
Meat Animal Research Center-145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hu-P-T3細(xì)胞、CWR22R細(xì)胞、CCD-841-CoN細(xì)胞
DITNC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GES-1細(xì)胞、LU165細(xì)胞、HEK-AD293細(xì)胞
SCL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNCL-2細(xì)胞、LNCaP subline C4-2細(xì)胞、PIG3細(xì)胞
SW-1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat FHCRC細(xì)胞、NCI-H889細(xì)胞、JURKAT E-6.1細(xì)胞
NG10815細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30-OHK細(xì)胞、B78細(xì)胞、IOSE-80細(xì)胞
OCI-Ly 10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IEC 18細(xì)胞、HLE B-3細(xì)胞、WILL-2細(xì)胞
L615細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02132C細(xì)胞、KOSC-2細(xì)胞、Earles's cells細(xì)胞
H-1105細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UWB1289細(xì)胞、Pt K2 (NBL-5)細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細(xì)胞
SACC-83細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM-TK-細(xì)胞、SGC996細(xì)胞、HCC-38細(xì)胞
KYSE-270 Thawing人食道鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系
MKN 28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AG06814-N細(xì)胞、RPMI #1846細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細(xì)胞
NBLAN5T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KFB細(xì)胞、HEL-299細(xì)胞、CEK細(xì)胞
P3X63Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293A細(xì)胞、SCC-7細(xì)胞、SNU407細(xì)胞
VP 267細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細(xì)胞、ELD-1細(xì)胞、GM03190細(xì)胞
SNGM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2009細(xì)胞、RT4-D6-P2T細(xì)胞、293-FT細(xì)胞
CAOV4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G-292, clone A141B1細(xì)胞、Hs 766細(xì)胞、Panc08.13細(xì)胞
H2107細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：38C-13細(xì)胞、HIT T-15細(xì)胞、KB細(xì)胞
My-La 2059細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-266 AR1細(xì)胞、H345細(xì)胞、MIMVEC細(xì)胞
MN60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-679細(xì)胞、VMRCRCZ細(xì)胞、WISH細(xì)胞
GM02132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-620細(xì)胞、VMM5A細(xì)胞、A549ATCC細(xì)胞
NCI-H2106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Institute for Medical Research-32細(xì)胞、SK-OV-433細(xì)胞、VMM-5A細(xì)胞
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