"KYSE-270 epithelioid cells人食道鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 貼壁細(xì)胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細(xì)胞施加胰酶選擇,因?yàn)榭偸琴N壁不牢的細(xì)胞先脫落,對腫瘤細(xì)胞來說,這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對于較難消化的細(xì)胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點(diǎn),直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積1/10v。消化到有細(xì)胞脫落。不過有人說EDTA對細(xì)胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細(xì)胞! 751細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-NEP-1細(xì)胞、H-1792細(xì)胞、RIN-14B細(xì)胞 huH 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lewis lung carcinoma細(xì)胞、D283 Med細(xì)胞、343MG細(xì)胞 Hep G2/C3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa-229細(xì)胞、GM05887細(xì)胞、SK-MEL28細(xì)胞 細(xì)胞生長:貼壁 KYSE-270 epithelioid cells人食道鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞的衰老:體外細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)證明:成纖維細(xì)胞:來自胎兒傳代50次后衰老死亡,來自成人傳代20次后衰老死亡(與具體年齡有關(guān);來自小鼠傳代14--28次后衰老死亡,來自烏龜傳代90--125次后衰老死亡。細(xì)胞衰老過程中會發(fā)生一系列的變化,包括:蛋白質(zhì)合成速度降低,已有蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)變化,特異蛋白質(zhì)成份出現(xiàn);同時,細(xì)胞核,線粒體,膜系統(tǒng)、骨架系統(tǒng)等都有結(jié)構(gòu)、功能的改變。細(xì)胞衰老原因,尚無定論,出現(xiàn)過好幾種理論與假說,其中得到較廣泛認(rèn)可的是“自由基損傷假說”。細(xì)胞凋亡:細(xì)胞的死亡是個體存活的正常現(xiàn)象,常見的細(xì)胞死亡形式有3種:壞死、凋亡和細(xì)胞毒性。多細(xì)胞生物的生命活動中,因?yàn)榄h(huán)境因素的突然變化或病原物的入侵,導(dǎo)致一部分細(xì)胞死去,稱為細(xì)胞的病理死亡,或細(xì)胞壞死。壞死是細(xì)胞暴露于嚴(yán)重的物理或化學(xué)刺激時導(dǎo)致的細(xì)胞死亡;細(xì)胞毒性是由細(xì)胞或者化學(xué)物質(zhì)引起的單純的細(xì)胞殺傷事件,不依賴于其它兩種細(xì)胞死亡機(jī)理,如殺傷T細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用。還有一種情況,一部分細(xì)胞的死亡是生物個體正常生命活動(代謝、生長、發(fā)育、分化)的一個必要部分;似乎帶有“犧牲局部,保全整體”的意味。這種情況下的細(xì)胞死亡,明顯地受遺傳控制,稱為細(xì)胞凋亡。凋亡(Apoptosis)則是程序性的、正常的細(xì)胞死亡,是機(jī)體清除無用的或者不想要的細(xì)胞的手段。它與細(xì)胞壞死是兩個截然不同的過程,無論從形態(tài)學(xué)、生物學(xué)還是生化的特征來說,都有明顯的區(qū)別。細(xì)胞凋亡現(xiàn)象普遍存在于生物界。細(xì)胞凋亡與細(xì)胞增殖、分化和衰老起著互補(bǔ)與平衡的作用,在多細(xì)胞動物的發(fā)育、形態(tài)建成與維持中扮演至關(guān)重要的角色。作為細(xì)胞的一種基本生命現(xiàn)象,凋亡失控的結(jié)果將是可怕的:凋亡不足時,易發(fā)生癌變、病毒性疾病和自身免疫疾病;而凋亡過量則可能產(chǎn)生獲得性免疫缺陷綜合征(HIV)、重癥肝炎與退行性神經(jīng)疾病,如老年性癡呆癥(Alzheimer""s disease)、帕金森氏癥(Parkinson""s disease)。因此研究細(xì)胞凋亡及其機(jī)理具有重要的理論和實(shí)踐意義。 細(xì)胞傳代方法:1:5傳代 RPMI-8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Epithelioma-2細(xì)胞、CCRF-CEM細(xì)胞、Turbot Embryonic Cell line細(xì)胞 HCC-1428細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL-CL.2細(xì)胞、HFL1細(xì)胞、130-T細(xì)胞 H184A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:28SC細(xì)胞、Baby Hamster Kidney 21細(xì)胞、Hs888 Lu細(xì)胞 Anip973細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WI-38細(xì)胞、COLO-320-DM細(xì)胞、MDCKII細(xì)胞 SU-DH-L5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC 61細(xì)胞、RetroPack PT67細(xì)胞、EBTr細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 KYSE-270 epithelioid cells人食道鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長特性:貼壁生長 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣 細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴(yán)格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散;3)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細(xì)胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時);2)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化,請將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室。 P3X63 AG8-653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-CAM2細(xì)胞、HMEC細(xì)胞、HELF細(xì)胞 MRC-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1155細(xì)胞、Hep-3B細(xì)胞、SNU-C2A細(xì)胞 Tca8113細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 695T細(xì)胞、SUDHL-5細(xì)胞、Tu-212細(xì)胞 CDC/EU.HMEC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2227細(xì)胞、SKN-SH細(xì)胞、NCI-H209細(xì)胞 CMT 93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FaDu細(xì)胞、Hs445細(xì)胞、P3/NS-1細(xì)胞 H-209細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:253J-BV細(xì)胞、UCLA RO-81A-1細(xì)胞、KS-1 [Human glioblastoma]細(xì)胞 A9(Hamprecht)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC-15細(xì)胞、HCC-1359細(xì)胞、PC-14細(xì)胞 BC-3-H-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP126細(xì)胞、Lewis Lung細(xì)胞、NBL-3細(xì)胞 COLO 206F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA 802細(xì)胞、CCD 966 SK細(xì)胞、Hi-five細(xì)胞 Pro-Lec1.3C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3 clone A31細(xì)胞、UACC 812細(xì)胞、NCI-H1770細(xì)胞 KYSE-270 epithelioid cells人食道鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系 L5178Y-R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:mIMCD3細(xì)胞、RT-BM細(xì)胞、HK2細(xì)胞 Wistar Institute-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK(15)細(xì)胞、WM115細(xì)胞、PC 61-5-3細(xì)胞 EFM-192B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH548細(xì)胞、CEK細(xì)胞、Hs 578T細(xì)胞 LS-174細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OLN-93細(xì)胞、NCI-H1703細(xì)胞、HCC-2279細(xì)胞 H-2172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16-F10--RED細(xì)胞、H341細(xì)胞、GM04671細(xì)胞 HEK 293-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs870T細(xì)胞、KYSE510細(xì)胞、PLA801-95C細(xì)胞 HEK 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OVMANA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-5細(xì)胞、LIXC-002細(xì)胞、PA317細(xì)胞 HES [Human embryonic skin fibroblast]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QSG7701細(xì)胞、HOP62細(xì)胞、THPI細(xì)胞 M14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK MEL-28細(xì)胞、T1-73細(xì)胞、Douglas Foster-1細(xì)胞 L- cell細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMR 106細(xì)胞、32D CL3細(xì)胞、SK MEL-28細(xì)胞 SNU520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2170細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細(xì)胞、MPASMC細(xì)胞 HFLS-RA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Evsa-T細(xì)胞、J774 A.1細(xì)胞、RAW 264.7細(xì)胞 H2073細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:253J B-V細(xì)胞、CSQT-2細(xì)胞、McA-RH8994細(xì)胞 SKCO 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE32細(xì)胞、JJN3細(xì)胞、MDA-MB 231細(xì)胞 MAD109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Karpas422細(xì)胞、S16細(xì)胞、Hs-940細(xì)胞 MEF (CF-1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPDE6c7細(xì)胞、RMG-I細(xì)胞、1301細(xì)胞 RCK-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:University of Arizona Cell Culture-893細(xì)胞、WC00079細(xì)胞、RPMI 7666細(xì)胞 H2195細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-449細(xì)胞、COLO679細(xì)胞、NCI H716細(xì)胞 SK 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