"HTR-8 cell line人滋養(yǎng)細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
貼壁細(xì)胞傳代:去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察,待細(xì)胞變圓,細(xì)胞間隙明顯,部分細(xì)胞剛開始脫離瓶壁,加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細(xì)胞小心吹打下來(lái),1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細(xì)胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補(bǔ)足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代:一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細(xì)胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時(shí),將細(xì)胞懸液移入離心管中,1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清,細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細(xì)胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細(xì)胞趨于成團(tuán)生長(zhǎng),此時(shí)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好,當(dāng)補(bǔ)液時(shí),需避免反復(fù)吹打。
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
HTR-8 cell line人滋養(yǎng)細(xì)胞系
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)基本操作:①進(jìn)無(wú)菌室前要徹底洗手,按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。②操作者動(dòng)作要輕,安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應(yīng)在火焰近處并經(jīng)過(guò)燒灼進(jìn)行。但要注意,金屬器械不能在火焰中長(zhǎng)時(shí)間燒灼,以防退火;燒過(guò)的器械要冷卻后才能使用;已吸過(guò)培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼,因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會(huì)產(chǎn)生有害物質(zhì),吸管再用時(shí)會(huì)將其帶到培養(yǎng)液中;膠塞、橡皮乳頭及塑料的細(xì)胞培養(yǎng)用品過(guò)火焰是也不能時(shí)間太長(zhǎng),以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體,危害培養(yǎng)細(xì)胞,同時(shí)塑料細(xì)胞培養(yǎng)用品也會(huì)產(chǎn)生變形影響使用。③使用培養(yǎng)液前不宜過(guò)早開瓶,開瓶后的培養(yǎng)液應(yīng)保持斜位,避免直立,以防止下落細(xì)菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應(yīng)立即封閉瓶口,培養(yǎng)的細(xì)胞在處理之前勿過(guò)早暴露在空氣中。④操作時(shí)盡量不要談話,咳嗽以防止來(lái)自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。⑤吸取培養(yǎng)液、細(xì)胞懸液時(shí),應(yīng)專管專用,一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應(yīng)棄去,以防止污染擴(kuò)大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。⑥操作完畢后應(yīng)整理好工作臺(tái)面,用消毒水浸泡的紗布擦拭臺(tái)面;防止細(xì)胞交叉污染:所有從別處轉(zhuǎn)來(lái)的或是自己所建的細(xì)胞系都要早期留有的充足的凍存儲(chǔ)備,一旦懷疑發(fā)生交叉污染,可做細(xì)胞遺傳學(xué)方面的鑒定,如發(fā)現(xiàn)原有的細(xì)胞遺傳物發(fā)生改變,可以復(fù)蘇早期凍存的細(xì)胞使用。重要細(xì)胞系的傳代工作應(yīng)由兩人獨(dú)立進(jìn)行;無(wú)菌室的徹底消毒①新潔爾滅全面徹底擦洗無(wú)菌室。使用前應(yīng)稀釋即配即用。新潔爾滅和酒精相比,的優(yōu)點(diǎn)是便宜,而且可以稀釋50倍用,而同樣量的酒精價(jià)格可能是新潔爾滅的幾十倍。②甲醛熏蒸法:甲醛是一種廣譜滅菌劑菌,其水溶液和氣體對(duì)各種細(xì)菌、芽孢及真菌等微生物均有殺滅作用。甲醛價(jià)廉,熏蒸消毒時(shí)不損壞衣服、家具、皮革、橡膠等。市售的甲醛水溶液中一般含37-40%的甲醛。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2傳代
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
有一些細(xì)胞是數(shù)量多一點(diǎn)比較好生長(zhǎng),生長(zhǎng)狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長(zhǎng)速度慢的細(xì)胞。譬如內(nèi)皮細(xì)胞。而有一些是細(xì)胞是數(shù)量少一點(diǎn)細(xì)胞狀態(tài)會(huì)生長(zhǎng)的比較好,譬如巨噬細(xì)胞和某些腫瘤細(xì)胞。尤其是巨噬細(xì)胞,生長(zhǎng)速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時(shí)就應(yīng)該留很少量的細(xì)胞,這樣細(xì)胞狀態(tài)會(huì)比較好。并且巨噬細(xì)胞比較喜歡扎堆生長(zhǎng),而堆與堆之間是有空間的。如果長(zhǎng)成相連在一起的一滿片的時(shí)候,細(xì)胞形態(tài)基本上就會(huì)差了,老化的會(huì)比較多,對(duì)后期實(shí)驗(yàn)結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細(xì)胞的時(shí)候應(yīng)該摸索該細(xì)胞喜歡的生長(zhǎng)空間密度問(wèn)題。這個(gè)其實(shí)是有一個(gè)方法可以改善的。對(duì)于貼壁細(xì)胞,如果細(xì)胞形態(tài)不好,(或者細(xì)胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時(shí)候進(jìn)行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無(wú)血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進(jìn)行預(yù)吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過(guò)一遍,然后吸走。這時(shí)侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細(xì)胞建議只吹打,不消化)其次,把吹打下來(lái)的細(xì)胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時(shí)間點(diǎn)觀察細(xì)胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個(gè)時(shí)間點(diǎn),已經(jīng)有部分細(xì)胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺(tái),底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況以及形態(tài)。通常稱之為“二傳”。如果一次效果還不理想,可重復(fù)多次。直到找到細(xì)胞上乘形態(tài)。其中要注意,結(jié)合細(xì)胞喜歡的生長(zhǎng)情況。喜歡多一點(diǎn)數(shù)量長(zhǎng)得好的細(xì)胞你就等貼壁細(xì)胞比較多點(diǎn)的時(shí)候再傳。反之亦然。
HTR-8 cell line人滋養(yǎng)細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣
CMT 64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGBC11T細(xì)胞、M20 [Human melanoma]細(xì)胞、NEC8細(xì)胞
HHFK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEMCSS細(xì)胞、MDA-MB-134細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-10A細(xì)胞
SK-MEL 28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS1-Ag4細(xì)胞、OSC19細(xì)胞、IHC-ST1細(xì)胞
HOS (TE85)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H4-IIE-C3細(xì)胞、HT-1080細(xì)胞、PANC-08-13細(xì)胞
6-10B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-ChA-1細(xì)胞、OVCA8細(xì)胞、SU-86-86細(xì)胞
SK-GT-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:6-10B細(xì)胞、H1963細(xì)胞、M2-10B4細(xì)胞
H719細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-78細(xì)胞、MV411細(xì)胞、HuT 78細(xì)胞
H-2107細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:rUCMSCs細(xì)胞、HDQP1細(xì)胞、H-1688細(xì)胞
OVCAR 420細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 02.03細(xì)胞、GM01232細(xì)胞、Hs675T細(xì)胞
BSC-40細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC/9細(xì)胞、WiDrTC細(xì)胞、ANA1細(xì)胞
J774A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H676細(xì)胞、OVCAR 432細(xì)胞、CaEs17細(xì)胞
VMCUB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-508細(xì)胞、CEMC1細(xì)胞、PANC0403細(xì)胞
NCTC-3960細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JVM-2細(xì)胞、HuT102細(xì)胞、TPC-1細(xì)胞
HTR-8 cell line人滋養(yǎng)細(xì)胞系
293-FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-NS1/1Ag 4.1細(xì)胞、H-2066細(xì)胞、LADMAC細(xì)胞
PF-382細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuT-102細(xì)胞、Hs888 Lu細(xì)胞、SNU-398細(xì)胞
FRTL5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPASMC細(xì)胞、HARA-B細(xì)胞、FDCP-1細(xì)胞
ECC 10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC1-Sq細(xì)胞、HCC-2218細(xì)胞、HEEpiC細(xì)胞
NCIH1436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RD-ES細(xì)胞、NR8383細(xì)胞、HLEC細(xì)胞
HCEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HARAB細(xì)胞、VSC4.1細(xì)胞、B104 [Rat neuroblastoma]細(xì)胞
Ly3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H295R細(xì)胞、MDA-MB-330細(xì)胞、LLC-WRC 256細(xì)胞
B95.8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-3-H-I細(xì)胞、HT29細(xì)胞、Kit-225-K6細(xì)胞
HCT/Taxo1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA2-D1細(xì)胞、RKN細(xì)胞、NW-MEL-38細(xì)胞
NTera2/D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK13細(xì)胞、LOUNH91細(xì)胞、HEK293A細(xì)胞
HS-766T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1353細(xì)胞、NCI-H2085細(xì)胞、C32r細(xì)胞
DV90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SRA01/04 (HLE)細(xì)胞、RenCa細(xì)胞、373 MG細(xì)胞
LK 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MZ-CRC-1細(xì)胞、LADMAC細(xì)胞、J774 A1細(xì)胞
MPP-89細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Adeno-293細(xì)胞、COLO 738細(xì)胞、IBRS2細(xì)胞
OCIAML4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NG10815細(xì)胞、A2780/Taxol細(xì)胞、3T3 clone A31細(xì)胞
GOS-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-837細(xì)胞、8305C_1細(xì)胞、OV-90細(xì)胞
Hs 832(C).T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2085細(xì)胞、NW38細(xì)胞、HCC-202細(xì)胞
NCI-SNU-878細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VERO C 1008細(xì)胞、CCRF-CEM C7細(xì)胞、COR L279細(xì)胞
HS-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293-F細(xì)胞、HEK293細(xì)胞、TN5B14細(xì)胞
MC3T3-L1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-Li-7細(xì)胞、BV2細(xì)胞、MES-SA-Dx5細(xì)胞
UM-UC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FM88細(xì)胞、YT細(xì)胞、C3H/10T1/2細(xì)胞
MDCKII-WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MMAc-SF細(xì)胞、HRGEC細(xì)胞、JVM2細(xì)胞
P30-OHK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA468細(xì)胞、KU812-F細(xì)胞、H441細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLRK 13細(xì)胞、EJ1細(xì)胞、HTR-8/SVneo細(xì)胞
OCI/AML-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EC-GI-10細(xì)胞、253J-Bladder-V細(xì)胞、MHCC97-H細(xì)胞
H676B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM T4細(xì)胞、AN3細(xì)胞、ROS1728細(xì)胞
C38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL1細(xì)胞、NCI-H441-4細(xì)胞、RBL 2H3細(xì)胞
OVCA432細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU 19-19細(xì)胞、REC-1細(xì)胞、H-838細(xì)胞
L5178Y TK+/-3.7.2c細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293S細(xì)胞、A375mel細(xì)胞、H4IIEC3細(xì)胞
HCC-95細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit-225細(xì)胞、HDQ-P1細(xì)胞、DMS-273細(xì)胞
H2030細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Molm14細(xì)胞、CALU1細(xì)胞、L 1210細(xì)胞
PCI-4.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CWR22-R1細(xì)胞、D-283細(xì)胞、DMS114細(xì)胞
NCI-H2195細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細(xì)胞、HEK 293 EBNA細(xì)胞、VMCUB1細(xì)胞
Sf21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-251_MG細(xì)胞、NHRF細(xì)胞、HT-3細(xì)胞
NHLF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:149PT細(xì)胞、A-1847細(xì)胞、Anglne細(xì)胞
A3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-763細(xì)胞、X63-Ag8-653細(xì)胞、NPA87細(xì)胞
Detroit 562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL6細(xì)胞、PaTu 8988s細(xì)胞、Hs746T細(xì)胞
C8-D1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MN9D細(xì)胞、CCRF CEM細(xì)胞、CSQT-2細(xì)胞
SNU1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:K-1735細(xì)胞、SNU449細(xì)胞、MM-1S細(xì)胞
EM-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WERI-Rb-1細(xì)胞、SUP T1細(xì)胞、CNE-2細(xì)胞
SW-780細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-251 MG細(xì)胞、Kasumi 1細(xì)胞、ID8細(xì)胞
HPMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hela-mock細(xì)胞、GEO細(xì)胞、FAK+/+細(xì)胞
ACC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:4T1-LUC細(xì)胞、HRA 19細(xì)胞、SUM-149細(xì)胞
HTR-8 cell line人滋養(yǎng)細(xì)胞系
SKBr3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-281-T細(xì)胞、HFTF細(xì)胞、OAW 42細(xì)胞
HEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1116細(xì)胞、KASUMI6細(xì)胞、NCI-446細(xì)胞
Walker/LLC-WRC256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:INS1-E細(xì)胞、CL1-0細(xì)胞、Vero 76 clone E-6細(xì)胞
NCIH1915細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW260細(xì)胞、293細(xì)胞、MDA 435細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375SM細(xì)胞、DMS53細(xì)胞、UMR 106細(xì)胞
KP-N-YN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-954細(xì)胞、GM15452細(xì)胞、Dx5細(xì)胞
SK-MEL 28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS1-Ag4細(xì)胞、NCI-H660細(xì)胞、Hs 281.T細(xì)胞
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