"HTR-8 Cell:人滋養(yǎng)細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
CSQT-2細胞系相關產品：Blotchy fibroblast-11細胞、COR-L88細胞、BT-474細胞
COR-L88細胞系相關產品：FLC-7細胞、JCA1細胞、H-1385細胞
HOPC細胞系相關產品：UACC-893細胞、Normal Rat Kidney細胞、H209細胞
Huh 7.5.1細胞系相關產品：LM(TK-)細胞、SuDHL 2細胞、UM2細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
HTR-8 Cell:人滋養(yǎng)細胞系
細胞凍存基本方法：１．細胞：選對數(shù)生長期細胞，收集細胞２４小時前換液一次。２．計數(shù)：按常規(guī)方法把細胞制成細胞懸液，計數(shù)，令細胞密度達５×１０(６)/ml，離心去上清，吸入離心管中。３．凍存液：先用培養(yǎng)液９分＋DMSO １分（或甘油）配成１０％的DMSO凍存液，按上法一滴滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。４．分裝：分裝入無菌安剖中，每安剖加１.５毫升細胞懸液。５．封口：用塑料安剖時擰緊瓶口即可；如用火焰封閉安剖口后，仔細檢查，定要封嚴，必要時可浸入藍色液中觀察，為安全起見，把安剖縫入紗布小袋中，以防液氮浸入后，融解時因受熱發(fā)生爆炸傷人；紗袋一端系以線繩，末端扎有小牌，注明：細胞名稱，凍存日期，以便日后查找。細胞株(系)的使用，為醫(yī)學研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的，長期連續(xù)傳代的細胞，不僅消耗大量的人力和物力，而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉化，因而細胞失去原有的遺傳特性，有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷，種子丟失。因此，在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞，以備替換使用。細胞冷凍與復蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術。
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
培養(yǎng)細胞真的不難，最關鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
Hep 2細胞系相關產品：RA細胞、HEK 293FT細胞、HOSEpiC細胞
KU-19-19細胞系相關產品：MM1.S細胞、SK-NEP-1細胞、HT細胞
NPC-039細胞系相關產品：MCF 7B細胞、PE/CA-PJ-34細胞、Sp2/O-Ag14細胞
RA-FLSs細胞系相關產品：HCC0044細胞、ZR75-30細胞、L6細胞
Tb 1 Lu (NBL-12)細胞系相關產品：VMM-5A細胞、SU-DHL-2細胞、RASMCs細胞
細胞生長特性：貼壁生長
HTR-8 Cell:人滋養(yǎng)細胞系
細胞復蘇相關注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉速和時間，轉的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候對一般細胞沒有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞形態(tài)特性：上皮樣
NPA87-1細胞系相關產品：SUM 52PE細胞、Y3細胞、HT 1376細胞
GM3569細胞系相關產品：P3.NS-1/1.Ag4.1細胞、MDA-MB361細胞、KNS-81細胞
EST50細胞系相關產品：CCD-1095Sk細胞、GLRK 13細胞、SKES1細胞
NCI-H1963細胞系相關產品：IMR-90細胞、MSB1細胞、OsA-CL細胞
SKCol1細胞系相關產品：AtT 20細胞、NCIH250細胞、OVCAR-8/ADR細胞
Hs695細胞系相關產品：NB4細胞、C-33-A細胞、M109細胞
MDA157細胞系相關產品：Mink Lung細胞、T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、UCLA NPA-87-1細胞
HTR-8 Cell:人滋養(yǎng)細胞系
AR-42J細胞系相關產品：SCC4細胞、RAEC細胞、RCC_7860細胞
HCT-8/V細胞系相關產品：DR2R 1610細胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、TCCSUP細胞
SVG(P12)細胞系相關產品：BPH1細胞、NCI-SNU-886細胞、COLO320-DM細胞
COLO-394細胞系相關產品：H810細胞、T2 (174 x CEM.T2)細胞、NBL-12細胞
C4-I細胞系相關產品：BpRc1細胞、D-341 Med細胞、Hs 888.Lu細胞
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X63-Ag8-653細胞系相關產品：CemT4細胞、C-4-I細胞、NCIH1155細胞
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MC3T3-E1 Subclone 4細胞系相關產品：RCF細胞、H184A1細胞、CAL 148細胞
MC3T3-E1 Subclone 4細胞系相關產品：RCF細胞、H184A1細胞、CAL 148細胞
MDA-MB-415細胞系相關產品：NCI.H23細胞、QSG7701細胞、H-1930細胞
Panc 10.05細胞系相關產品：U373-MG細胞、CMT-93細胞、SNUC2A細胞
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J45.01細胞系相關產品：H-87細胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞、KYSE0030細胞
NCI-H1563細胞系相關產品：HO-8910PM細胞、U87MG細胞、FHCRC-11細胞
SW 780細胞系相關產品：Hs-695-T細胞、H82sclc細胞、H-1734細胞
H-2405細胞系相關產品：Lu-99A細胞、WiDr細胞、WM115F細胞
HTori3細胞系相關產品：GM637A細胞、MDA330細胞、P30/Ohkubo細胞
AZ521細胞系相關產品：3T6 Swiss Albino細胞、X63Ag8-653細胞、Uhth-74細胞
CCRF SB細胞系相關產品：H-1355細胞、KTCTL-140細胞、A101D細胞
Z138細胞系相關產品：NCI-H520細胞、HeLa 229細胞、KATOIII細胞
U-2-OS細胞系相關產品：AM-38細胞、NCI-H2087細胞、SUM149-PT細胞
SUM149-PT細胞系相關產品：MHCC-LM3細胞、Vero E-6細胞、NOMO-1細胞
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HEK-293 c18細胞系相關產品：brain-derived Endothelial cells.3細胞、Caki2細胞、GES-1細胞
Hs 578Bst細胞系相關產品：HCC1171細胞、Tu686細胞、J82細胞
MAVER1細胞系相關產品：SNU-761細胞、HuNS1細胞、FF-WT-BJ細胞
MDA 435細胞系相關產品：SP2細胞、A-375.S2細胞、T47D細胞
NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞系相關產品：293GP細胞、KY70細胞、CHO-ori細胞
HuT-102細胞系相關產品：102PT細胞、SK-UT-1細胞、P3-X63Ag8細胞
OACP4 C細胞系相關產品：H1581細胞、LLCPK1細胞、MOLT4細胞
H-1915細胞系相關產品：S180細胞、NPC-TW039細胞、Pt-K2細胞
PF-382細胞系相關產品：HuT-102細胞、Hs888 Lu細胞、SNU-398細胞
REC 1細胞系相關產品：HCC-4006細胞、U266B1細胞、HOS (TE85, Clone F5)細胞
PLB-985細胞系相關產品：NCI-H676細胞、CAL 12細胞、KMH2細胞
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BEAS2B細胞系相關產品：JOSK-M細胞、MCA 38細胞、WM-239-A細胞
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HTR-8 Cell:人滋養(yǎng)細胞系
Rainbow Trout Embryo細胞系相關產品：SupB15W細胞、BOWES細胞、TOG細胞
RK 13細胞系相關產品：NCIH2405細胞、HNE3細胞、SNU601細胞
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PLC PRF 5細胞系相關產品：RLE-6TN細胞、U-2932細胞、DMS-53細胞
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SKOV-3細胞系相關產品：MOLT 3細胞、MADB-106細胞、G-292細胞
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P3-Jiyoye細胞系相關產品：M-NFS-60細胞、SHZ-88細胞、SK-RC-39細胞
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NCI-UMC-11細胞系相關產品：WM-115細胞、OC-3-VGH細胞、SHG 44細胞
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