"A-875 cell line人黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:NGF受體陽(yáng)性。
細(xì)胞傳代后放入培養(yǎng)箱沒(méi)有搖勻,或者放入時(shí)搖勻,但在細(xì)胞貼壁前,又移動(dòng)了培養(yǎng)瓶,頻繁開(kāi)關(guān)培養(yǎng)箱引起的振動(dòng)或者培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液過(guò)少,培養(yǎng)箱擱板表面不平整,這些因素會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)不均勻。研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳,常見(jiàn)原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。運(yùn)輸過(guò)程對(duì)細(xì)胞有嚴(yán)重影響。解凍過(guò)程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–80°C 太久。一些懸浮細(xì)胞抱團(tuán)生長(zhǎng)是正?,F(xiàn)象,大部分懸浮細(xì)胞在細(xì)胞密度很高的情況下,很可能會(huì)出現(xiàn)部分細(xì)胞抱團(tuán)生長(zhǎng)的現(xiàn)象,聚團(tuán)細(xì)胞很容易死亡并演化成絮狀物,殃及周圍的懸浮細(xì)胞,因此在培養(yǎng)懸浮細(xì)胞時(shí)需控制好細(xì)胞密度。如果出現(xiàn)了細(xì)胞團(tuán),可以通過(guò)細(xì)胞篩去掉部分較大的細(xì)胞團(tuán),也可以嘗試一下方法:將細(xì)胞懸液收集到15ml離心管中,靜置20min左右,小心取上層細(xì)胞上清培養(yǎng)(該方法只能去除部分較大的細(xì)胞團(tuán))。部分細(xì)胞本身存在一定的空泡(如HepG2,Ishikawa及一些耐藥株等),這個(gè)是正?,F(xiàn)象。如果只有少數(shù)細(xì)胞有內(nèi)出現(xiàn)極少空泡,則很可能是細(xì)胞狀態(tài)不佳,可以通過(guò)調(diào)整血清濃度,控制消化,控制傳代比例及時(shí)間等方法來(lái)調(diào)整細(xì)胞狀態(tài);如果大部分細(xì)胞出現(xiàn)空泡,且單個(gè)細(xì)胞內(nèi)空泡數(shù)目偏多,則可能細(xì)胞代次較高,細(xì)胞老化所致,需更換代次較早的細(xì)胞。
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
A-875 cell line人黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞傳代培養(yǎng)的胰酶消化法:傳代培養(yǎng):是指細(xì)胞從一個(gè)培養(yǎng)瓶以1:2或1:2以上的比例轉(zhuǎn)移,接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。傳代細(xì)胞,可根據(jù)不同細(xì)胞采取不同的方法進(jìn)行細(xì)胞傳代。貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞用消化法傳代,部分貼壁的細(xì)胞用直接吹打或用硅膠軟刮的刮除法傳代。懸浮細(xì)胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進(jìn)行傳代,或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進(jìn)行傳代。實(shí)驗(yàn)步驟:①入無(wú)菌室之前用肥皂洗手,再用75% 的酒精擦拭消毒雙手;②倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),確定細(xì)胞是否傳代及細(xì)胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液37℃下預(yù)熱;③超凈臺(tái)臺(tái)面應(yīng)整潔,用75%酒精棉球擦拭清潔;④打開(kāi)超凈工作臺(tái)的紫外燈照射臺(tái)面20min左右,關(guān)閉紫外燈,打開(kāi)風(fēng)機(jī)清潔空氣除去臭氧;⑤點(diǎn)燃酒精燈;取出無(wú)菌試管,巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過(guò)酒精燈火焰略燒后插在無(wú)菌試管內(nèi);⑥將培養(yǎng)用液瓶口用75%酒精消毒,過(guò)酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上;⑦倒掉培養(yǎng)細(xì)胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用2-3ml Hanks液洗去殘留的就培養(yǎng)基,或用少量胰酶涮洗一下;⑧每個(gè)大培養(yǎng)瓶加入1ml胰酶,小培養(yǎng)瓶用量酌減,蓋好瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察。當(dāng)細(xì)胞收回突起變圓時(shí)立即翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶,使細(xì)胞脫離胰酶,然后將胰酶倒掉。注意勿使細(xì)胞提早脫落入消化液中;⑨加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基,反復(fù)吹打消化好的細(xì)胞使其脫壁并分散,再根據(jù)分傳瓶數(shù)補(bǔ)加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(7-10ml/大瓶;3-5ml/小瓶)制成細(xì)胞懸液,然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋好瓶蓋,適度擰緊后稍回轉(zhuǎn),以利于CO2的進(jìn)入,將培養(yǎng)瓶放回CO2培養(yǎng)箱;⑩對(duì)懸浮培養(yǎng)細(xì)胞,步驟7-9不做。直接將細(xì)胞懸液進(jìn)行離心去除舊培養(yǎng)基上清,加入新鮮培養(yǎng)基,然后分裝到各瓶中。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:3傳代;3-4天1次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
絕大部分細(xì)胞消化的時(shí)候是只要用胰酶潤(rùn)洗一遍即可。吸去胰酶后,殘留的那些無(wú)法計(jì)算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足夠消化細(xì)胞。對(duì)于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞,連續(xù)這樣傳代,對(duì)細(xì)胞傷害很大。簡(jiǎn)單的程序是PBS潤(rùn)洗吸去,胰酶潤(rùn)洗吸去,然后37℃消化。比較難消化的細(xì)胞(潤(rùn)洗方法5min還不能消化),這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育。不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個(gè)圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層,只要能移動(dòng)了,多半呈沙壯移動(dòng),其實(shí)已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞,這是沒(méi)有必要的。一般能移動(dòng)了,說(shuō)明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細(xì)胞已經(jīng)獨(dú)立分布了(雖然沒(méi)有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個(gè)時(shí)候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細(xì)胞就是完全成單個(gè)細(xì)胞懸液,之后在貼壁的過(guò)程中仍然會(huì)聚集,這個(gè)是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,尤其是腫瘤細(xì)胞的一個(gè)特性。如果和標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)不一致,那可能是自己沒(méi)消化好導(dǎo)致的,但如果消化方法正確,仍然成片分布,甚至完全吹打成單細(xì)胞懸液,貼壁后仍然成片分布,這是細(xì)胞的特性,是因?yàn)橘N壁過(guò)程中重新聚集了。這個(gè)時(shí)候你拼了命要去讓它均勻分布,你的細(xì)胞之后會(huì)對(duì)你越來(lái)越不好。
A-875 cell line人黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:多角形
KE-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs706T細(xì)胞、SUP-B1細(xì)胞、T47D:A細(xì)胞
Pro-5 Lec1.3c細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH28細(xì)胞、VM Cub 1細(xì)胞、HS-294T細(xì)胞
IPLB-Sf21AE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H378細(xì)胞、NCI-SNU-520細(xì)胞、hFOB細(xì)胞
OVSAHO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-266-mel細(xì)胞、Hs683T細(xì)胞、UWB1.289+BRCA1細(xì)胞
COLO824細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U87MG細(xì)胞、G422細(xì)胞、H146細(xì)胞
MLE12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KATO 3細(xì)胞、Hs 606.T細(xì)胞、SK-ES1細(xì)胞
KB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-ALL1細(xì)胞、H-2171細(xì)胞、SUM-159PT細(xì)胞
KM12-SM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:143B TK-細(xì)胞、Potorous tridactylus Kidney 2細(xì)胞、HLFa細(xì)胞
Mouse Forestomach Carcinoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCA 205細(xì)胞、GM00346B細(xì)胞、Capan-1細(xì)胞
IM-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW948細(xì)胞、CPA47細(xì)胞、NCL-H548細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RINm-5F細(xì)胞、3T3-Swiss albino細(xì)胞、EBC1細(xì)胞
0V-1063細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780S細(xì)胞、QGY 7701細(xì)胞、JB 6細(xì)胞
U2932細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL95細(xì)胞、Rat-1細(xì)胞、HUT-226細(xì)胞
A-875 cell line人黑色素瘤細(xì)胞系
GM01232細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tu212細(xì)胞、32D.3細(xì)胞、J82 COT細(xì)胞
RPMI8402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-33 A細(xì)胞、MDCC MSB1細(xì)胞、Rat 1細(xì)胞
COLO 320DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:4T1.2細(xì)胞、R2C細(xì)胞、C3H/10T1/2 CL8細(xì)胞
COLO 320DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:4T1.2細(xì)胞、R2C細(xì)胞、C3H/10T1/2 CL8細(xì)胞
BT 549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DU4475細(xì)胞、HS-729細(xì)胞、Mouse podocyte細(xì)胞
NCI-H1437細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2141細(xì)胞、MV 3細(xì)胞、KBM-7/Hap8細(xì)胞
MADB-106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNG/HOS Clone F-5細(xì)胞、MUTZ-1細(xì)胞、Caov-3細(xì)胞
WM 451-Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC2185細(xì)胞、H-716細(xì)胞、MKN 45細(xì)胞
CNE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPBALL細(xì)胞、SUSM1細(xì)胞、IA-LM細(xì)胞
RPE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Hepatocyte Line 5細(xì)胞、H-1793細(xì)胞、HFLS細(xì)胞
GM00346細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細(xì)胞、BT474細(xì)胞、HFL-1細(xì)胞
CHO cell clone K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-95細(xì)胞、SKNSH細(xì)胞、HCC9724細(xì)胞
H-711細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03570細(xì)胞、SNK1細(xì)胞、NIT-1細(xì)胞
3T6-Swiss albino細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-9/S1細(xì)胞、STC-1細(xì)胞、G361細(xì)胞
Mc Coy細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHs74 Int細(xì)胞、526細(xì)胞、KASUMI1細(xì)胞
Factor Dependent Cell-Paterson 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa S-3細(xì)胞、RPMI-8402細(xì)胞、G-Olig2細(xì)胞
Calu 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV-1-Lu細(xì)胞、SW780細(xì)胞、RT4-D6-P2T細(xì)胞
VMRCLCD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-5178-Y-R細(xì)胞、PaTu-8988s細(xì)胞、Astrocyte type I clone細(xì)胞
University of Arizona Cell Culture-893細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM2132細(xì)胞、SKBr3細(xì)胞、Sp2/O細(xì)胞
NR 8383細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RH-30細(xì)胞、SF 539細(xì)胞、PLC8024細(xì)胞
H2122細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR-8/SV-neo細(xì)胞、H2023細(xì)胞、RMa-bm細(xì)胞
A253細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPE-hTERT細(xì)胞、ME16C細(xì)胞、LED-WiDr細(xì)胞
NU-GC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TK-1細(xì)胞、Ramos G6.C10細(xì)胞、BERH-2細(xì)胞
PG [Human lung carcinoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2009細(xì)胞、LWnt3A細(xì)胞、CL11細(xì)胞
95-D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Line 870 Emory University-4細(xì)胞、SHP77細(xì)胞、SCI1細(xì)胞
Panc3_27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG13細(xì)胞、Hs 746.T細(xì)胞、SVG p12細(xì)胞
HPAF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 729細(xì)胞、SKMEL-24細(xì)胞、SNK1細(xì)胞
NIH:OVCAR4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly8細(xì)胞、CHL-1細(xì)胞、DK-MG細(xì)胞
NS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-889細(xì)胞、OVCAR-5細(xì)胞、AN3細(xì)胞
Hs 895.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS 79細(xì)胞、SRA01/04細(xì)胞、HOP 92細(xì)胞
CT 26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI/ADR-RES細(xì)胞、CMT 64細(xì)胞、GM-346細(xì)胞
SK-RC-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PE/CA-PJ34細(xì)胞、BT.549細(xì)胞、COR-L51細(xì)胞
H1755細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc_04_03細(xì)胞、ME180細(xì)胞、MDAPCa-2b細(xì)胞
DOK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM12878細(xì)胞、Nthy ori 3.1細(xì)胞、NB-19細(xì)胞
HAVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC95細(xì)胞、P3/NS1/1-Ag4-1細(xì)胞、Colon-38細(xì)胞
IHH4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC929細(xì)胞、NCI-H1836細(xì)胞、VP267細(xì)胞
Huh-7.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293-H細(xì)胞、NCI-H510細(xì)胞、MA104細(xì)胞
ARO81-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IBRS2細(xì)胞、Bowes melanoma cells細(xì)胞、CoCL2細(xì)胞
MFE 280細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C57 Mouse Tumor 64細(xì)胞、SK ES 01細(xì)胞、HCC-1833細(xì)胞
HCC0078細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT144細(xì)胞、OVCAR-4細(xì)胞、HRCEC細(xì)胞
HTh74細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1568細(xì)胞、KG1A細(xì)胞、KY-50細(xì)胞
WiDrTC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-251細(xì)胞、H-1954細(xì)胞、CHO-K1細(xì)胞
BNL-HCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker 256細(xì)胞、Vero細(xì)胞、QGY細(xì)胞
A-875 cell line人黑色素瘤細(xì)胞系
RKO_AS45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCL-H548細(xì)胞、X63-Ag8.653細(xì)胞、Saos2細(xì)胞
MV-522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 102細(xì)胞、451-LU細(xì)胞、Caki2細(xì)胞
3T3-L1 ad細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-283 Med細(xì)胞、Hs 819.T細(xì)胞、H2009細(xì)胞
L-929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN12PM6細(xì)胞、HANK-1細(xì)胞、Hs.27細(xì)胞
Z138細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H520細(xì)胞、OV1063細(xì)胞、OsA-CL細(xì)胞
H-1869細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tb 1-Lu細(xì)胞、YAC細(xì)胞、A375細(xì)胞
IPLB-SF 21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HITT15細(xì)胞、Human Epithelioma-2細(xì)胞、HOS-MNNG細(xì)胞
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