"COS-1 ThawingSV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：該細(xì)胞源自CV-１細(xì)胞株，經(jīng)轉(zhuǎn)染編碼野生型T抗原、起始點(diǎn)缺陷突變的SV４０得到；細(xì)胞中整合有SV４０基因組完整早期區(qū)段的單個(gè)拷貝。該細(xì)胞表達(dá)T抗原，適用于需要SV４０T抗原表達(dá)的載體的轉(zhuǎn)染；保留SV４０溶細(xì)胞性生長(zhǎng)的特性；支持４０℃時(shí)溫度敏感性A２０９病毒的復(fù)制；支持早期區(qū)段缺失的SV４０純體的復(fù)制。因含有SV４０的DNA序列，該細(xì)胞需要在２級(jí)生物安全柜中操作。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
COS-1 ThawingSV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
解凍細(xì)胞常見(jiàn)實(shí)驗(yàn)問(wèn)題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)會(huì)出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長(zhǎng)緩慢等問(wèn)題，究竟是什么原因?qū)е?，我們?cè)撛趺催M(jìn)行解決？以下是國(guó)內(nèi)外細(xì)胞培養(yǎng)專(zhuān)家針對(duì)解凍細(xì)胞實(shí)驗(yàn)問(wèn)題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過(guò)程中細(xì)胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡，因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠高，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細(xì)胞/毫升；２)解凍過(guò)程中的問(wèn)題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時(shí)間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開(kāi)始培養(yǎng)；３)對(duì)冷凍液過(guò)敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時(shí)后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時(shí)間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時(shí)細(xì)胞需要幾周時(shí)間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時(shí)細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長(zhǎng)階段中的位置。冷凍的條件在對(duì)數(shù)期；４)被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時(shí)培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍最近冷凍的細(xì)胞。細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時(shí)間越長(zhǎng)，存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時(shí)間和方法。在冷凍時(shí)細(xì)胞應(yīng)處于對(duì)數(shù)期。
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
懸浮細(xì)胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細(xì)胞是指細(xì)胞生長(zhǎng)不依賴(lài)支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長(zhǎng)，如淋巴細(xì)胞。在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常會(huì)遇到懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室用的是脂質(zhì)體類(lèi)的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物，散布在細(xì)胞周?chē)?，然后通過(guò)細(xì)胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)，而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細(xì)胞的接觸機(jī)會(huì)比懸浮細(xì)胞高出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時(shí)懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細(xì)胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細(xì)胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細(xì)胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對(duì)懸浮細(xì)胞等難轉(zhuǎn)染細(xì)胞還是挺不錯(cuò)的，電擊對(duì)細(xì)胞有一定的損傷，選用具有細(xì)胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對(duì)細(xì)胞的傷害降到最低，懸浮細(xì)胞不易轉(zhuǎn)染，選對(duì)試劑及良好的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
COS-1 ThawingSV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
很多朋友討論細(xì)胞培養(yǎng)問(wèn)題，見(jiàn)到很多很好的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)，這里說(shuō)一些我個(gè)人的經(jīng)驗(yàn)，因?yàn)橐恍┍容^特殊的原因，我自己培養(yǎng)接觸過(guò)近３００種細(xì)胞，常用于做實(shí)驗(yàn)的，累積有百余種，可以說(shuō)遇到過(guò)許多各式各樣古怪的細(xì)胞。這里挑細(xì)胞消化開(kāi)始做我的篇專(zhuān)題，并不是因?yàn)榧?xì)胞消化最重要，而是近期看到大家頻繁討論這個(gè)話題，我就拋磚引玉，下面幾點(diǎn)拙見(jiàn)，可能與其它朋友總結(jié)的一些經(jīng)驗(yàn)有點(diǎn)出入，僅供大家參考。許多同學(xué)對(duì)細(xì)胞消化做了許多研究，得出了很多有價(jià)值的經(jīng)驗(yàn)，也見(jiàn)到很多人的困惑。其實(shí)細(xì)胞培養(yǎng)，尤其是細(xì)胞系的培養(yǎng)，就消化而言，不是太難，做得多了，善于總結(jié)經(jīng)驗(yàn)，就能把細(xì)胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟，細(xì)節(jié)操作，我這里就不講了，只講一些基本操作背后的知識(shí)，如果不對(duì)之處，歡迎指正，總結(jié)下來(lái)，細(xì)胞培養(yǎng)中消化很重要，但其實(shí)消化并不是細(xì)胞培養(yǎng)的關(guān)鍵所在(雖然很重要)，關(guān)鍵所在是細(xì)胞來(lái)源，血清質(zhì)量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細(xì)胞遇到各種各樣的問(wèn)題，很多時(shí)候bottleneck沒(méi)有找到，雖然通過(guò)其它方法有所改善，但仍然是事倍功半。因?yàn)槿藗兺⒁庾约旱牟僮?，總覺(jué)得自己沒(méi)有經(jīng)驗(yàn)，而忽視試劑，溶液尤其是細(xì)胞的質(zhì)量，后者其實(shí)才是許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室常見(jiàn)的問(wèn)題。
細(xì)胞形態(tài)特性：成纖維細(xì)胞樣
INS1-E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA801-95D細(xì)胞、WEHI 3B細(xì)胞、COLO 699細(xì)胞
COLO-320DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H510A細(xì)胞、L-cell細(xì)胞、PK-15細(xì)胞
MDA 435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SP2細(xì)胞、A-375.S2細(xì)胞、T47D細(xì)胞
H-1299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T98G細(xì)胞、P116細(xì)胞、MFE 296細(xì)胞
UCW 100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPTEC/TERT 1細(xì)胞、SW839細(xì)胞、TCam 2細(xì)胞
B5537SKIN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLTC-1細(xì)胞、HT 29細(xì)胞、OVCAR-3細(xì)胞
H-1618細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI:SG-231細(xì)胞、JROECL 33細(xì)胞、BC-019細(xì)胞
RERF-LC-MS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NH6細(xì)胞、H-211細(xì)胞、RBL-I細(xì)胞
CMK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-411細(xì)胞、CV-1細(xì)胞、NCI-H128細(xì)胞
Homo sapiens No. 578, tumor cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS852.T細(xì)胞、NCI-H146細(xì)胞、Giant Cell Tumor細(xì)胞
T2(174 x CEM.T2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC.1細(xì)胞、H295R細(xì)胞、CNE2Z細(xì)胞
H3255_DA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCS2/8細(xì)胞、KPL-4細(xì)胞、OCI Ly3細(xì)胞
HuH7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-120細(xì)胞、MeT 5A細(xì)胞、M 1細(xì)胞
GM04678細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P388細(xì)胞、L cells (TK-)細(xì)胞、GCT細(xì)胞
RL-65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266S細(xì)胞、RFL-6細(xì)胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis細(xì)胞
GP2-293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AM38細(xì)胞、HEK-A細(xì)胞、CaES-17細(xì)胞
Balb/c3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-SF 21AE細(xì)胞、DLM8細(xì)胞、BL6細(xì)胞
16HBE14o-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 3.27細(xì)胞、SGC7901細(xì)胞、HeLa/S3細(xì)胞
SKG IIIa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS578T細(xì)胞、NIH:OVCAR-3細(xì)胞、WEHI 3細(xì)胞
MCFs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK (AD293)細(xì)胞、PG-4 S+L-細(xì)胞、Ramos.G6.C10細(xì)胞
NCIH128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3, E1 subgroup-4 clone細(xì)胞、EBTr (NBL-4)細(xì)胞、G361mel細(xì)胞
NCIH128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3, E1 subgroup-4 clone細(xì)胞、EBTr (NBL-4)細(xì)胞、G361mel細(xì)胞
Mouse INsulinoma 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U251MG細(xì)胞、H1436細(xì)胞、WI38細(xì)胞
RPMI8226/S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFL-1細(xì)胞、SMA-560細(xì)胞、BEL7404細(xì)胞
RM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH208細(xì)胞、RAMSCs細(xì)胞、CFPAC-1細(xì)胞
KBM-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BPH-1細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細(xì)胞、Oregon J-111細(xì)胞
COS-1 ThawingSV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞系
RA.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TT細(xì)胞、H-1092細(xì)胞、COLO 680N細(xì)胞
102PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMH2細(xì)胞、COLO 16細(xì)胞、C2C12細(xì)胞
PCI-04B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 39細(xì)胞、SUM 190PT細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細(xì)胞
CCD18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-98G細(xì)胞、IM9細(xì)胞、NCI-H2110細(xì)胞
Medical Research Council cell strain-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH441細(xì)胞、T24(ECV304)細(xì)胞、H4-II-E-C3細(xì)胞
VCaP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs274T細(xì)胞、LNCaP-C4-2細(xì)胞、SKOV-3細(xì)胞
SK-GT-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：6-10B細(xì)胞、H1963細(xì)胞、M2-10B4細(xì)胞
MC-3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CESS細(xì)胞、A-172MG細(xì)胞、RFL 6細(xì)胞
NCIH1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUP-T1細(xì)胞、E.L.4細(xì)胞、Panc 2.03細(xì)胞
Be Wo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB330細(xì)胞、LNCaP C4-2B細(xì)胞、IMR-32細(xì)胞
LNCaP C4-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW480E細(xì)胞、DI TNC-1細(xì)胞、NK92細(xì)胞
RMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-2細(xì)胞、NCI-H1355細(xì)胞、Hs343T細(xì)胞
MV3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE7細(xì)胞、IHH-4細(xì)胞、RD-2細(xì)胞
PVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-5178-Y細(xì)胞、MDAMB453細(xì)胞、HeLaS3細(xì)胞
COLO.205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3細(xì)胞、RCM1細(xì)胞、NCI-1155細(xì)胞
HPBALL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBL100細(xì)胞、FDCP1細(xì)胞、3T3-F442A細(xì)胞
RPE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM 266-4細(xì)胞、H-2195細(xì)胞、CCD-112 CoN細(xì)胞
KU812-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：639V細(xì)胞、B35細(xì)胞、Pro-5 Lec1.3c細(xì)胞
D407 RPE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H508細(xì)胞、SuDHL 10細(xì)胞、GM05384細(xì)胞
HMVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H226細(xì)胞、MCF12A細(xì)胞、H4細(xì)胞
LC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1836細(xì)胞、JB6 clone 30, subclone 7b細(xì)胞、CO115細(xì)胞
UMUC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLE細(xì)胞、HFL-1細(xì)胞、H-2029細(xì)胞
LA-N-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Merwin Plasma Cell tumor-11細(xì)胞、NIH:OVCAR-8細(xì)胞、LAD-2細(xì)胞
Capan 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO-K1細(xì)胞、NCI-H128細(xì)胞、ACC-3細(xì)胞
GM15452細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 343.T細(xì)胞、Human Hepatocyte Line 5細(xì)胞、COLO 320細(xì)胞
COLO684細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GP5d細(xì)胞、MDA134細(xì)胞、SNUC1細(xì)胞
UACC 893細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M2-10B4細(xì)胞、RT-BM-1細(xì)胞、293S細(xì)胞
SN12C-PM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-5細(xì)胞、SK-N-FI細(xì)胞、Strain KB細(xì)胞
Karpas 422細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WC00059細(xì)胞、NS-1細(xì)胞、TC7細(xì)胞
LAN6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-8細(xì)胞、AD-293細(xì)胞、U373細(xì)胞
3T3-J2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Potorous tridactylus Kidney 1細(xì)胞、C-127細(xì)胞、VK2細(xì)胞
HRGEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-18細(xì)胞、HTR8svn細(xì)胞、RERF-LCMS細(xì)胞
PMVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC3H1細(xì)胞、FM-88細(xì)胞、RMS1598細(xì)胞
COS-1 ThawingSV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞系
A9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1688細(xì)胞、H-1573細(xì)胞、A-10細(xì)胞
769-P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：143B細(xì)胞、MA 104細(xì)胞、RBE細(xì)胞
RFL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-1197細(xì)胞、CAKI.1細(xì)胞、COLO 738細(xì)胞
HuH28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IHH4細(xì)胞、LS 513細(xì)胞、PTK-2細(xì)胞
AM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFLS-RA細(xì)胞、GLC-15細(xì)胞、HO1N1細(xì)胞
SJ-RH30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-7細(xì)胞、ZR75-1細(xì)胞、HFB細(xì)胞
Y79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL-1細(xì)胞、MAVER細(xì)胞、NCI-H211細(xì)胞
OsACL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Instituto Biologico-Rim Suino-2細(xì)胞、LU65細(xì)胞、SUM-159-PT細(xì)胞
PLC/PRF5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 510細(xì)胞、SUPB15細(xì)胞、LC1sq細(xì)胞
LC-1Sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2172細(xì)胞、Hs 281.T細(xì)胞、Ramos G6.C10細(xì)胞
LS 513細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H292細(xì)胞、Molm14細(xì)胞、XuanWei Lung Cancer-05細(xì)胞
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