"CV-1 Thawing非洲綠猴腎細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:CV-1細(xì)胞株是1964年由JensenFC等建系的,源自成年雄性非洲綠猴腎,被用于Rous肉瘤病毒的轉(zhuǎn)染研究。可作為SV40載體的轉(zhuǎn)染宿主。
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
CV-1 Thawing非洲綠猴腎細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
【細(xì)胞培養(yǎng)中支原體、黑蛟蟲、真菌的污染情況總結(jié)】支原體:黑色的,好象多為多形,培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會(huì)渾濁,原體感染,國(guó)內(nèi)血清很多都沒有做支原體陰性檢測(cè),而支原體是牛血清中最常見的微生物之一。而且它不能用過濾的辦法除去。支原體感染細(xì)胞以后,細(xì)胞病變不很明顯,只是慢慢死去。用泰樂菌素,獸用支原體病的藥,但可用于細(xì)胞培養(yǎng),無(wú)任何不良反應(yīng)。如果作為常用的抗生素的話, 建議用8ug/ml的濃度;黑蛟蟲:可以穿透濾膜,也可以通過空氣傳播,低倍下為黑色點(diǎn)狀,高倍下可看見黑色的小蟲游來(lái)游去,培養(yǎng)液也是不渾的,一般不會(huì)太影響,細(xì)胞還是可以用的。常常是細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好,且觀測(cè)到的運(yùn)動(dòng)物無(wú)明顯增多,且培養(yǎng)液顏色、透明度無(wú)明顯變化,可在同一批號(hào)的血清養(yǎng)的細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象。對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)不會(huì)有明顯影響,在細(xì)胞增殖旺盛之后會(huì)自然消失,除更換血清外無(wú)須特殊處理。建議如果細(xì)胞有可能是此種污染的話,可以增加細(xì)胞的種板密度,以提高細(xì)胞的生存率;真菌:一般培養(yǎng)液清亮,不變色,鏡下有絲狀物,有些真菌開始很像死細(xì)胞碎片,只是它很多很多的小塊很清楚,象珊瑚狀,不象細(xì)胞碎片分不清,慢慢的會(huì)長(zhǎng)出很細(xì)的黑色絲狀物。真菌生長(zhǎng)的比較慢,不象細(xì)菌那么容易被發(fā)現(xiàn),但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細(xì)胞就被污染了,也很難救活了。
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2傳代
細(xì)胞培養(yǎng)更好經(jīng)驗(yàn)詳解:1)收到細(xì)胞,首先要鏡檢:觀察細(xì)胞形態(tài)是否正常,對(duì)于貼壁細(xì)胞則要注意看貼壁情況是否很好,觀察細(xì)胞密度,有疑議及時(shí)咨提供細(xì)胞的技術(shù)人員。 由于運(yùn)輸?shù)臅r(shí)間或者溫度的變化,很多貼壁細(xì)胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長(zhǎng)的狀態(tài)和平時(shí)會(huì)有點(diǎn)不一樣,主要是貼壁牢固問題。比如293T,平時(shí)貼壁就不是很牢,在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面,會(huì)發(fā)生大片的脫落,細(xì)胞聚集在一起,但是細(xì)胞生長(zhǎng)還是正常的,通過離心收集,加以胰酶的消化,重新打散,又可以正常的貼壁生長(zhǎng)。2)當(dāng)通過上一步的觀察,細(xì)胞初步?jīng)]有問題時(shí),進(jìn)行下一步操作。當(dāng)收到的細(xì)胞密達(dá)到80%左右時(shí),則處理如下:棄除瓶中大部分培養(yǎng)基,僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基;或更換新鮮的培養(yǎng)基,置于培養(yǎng)箱中,隨后每天觀察。 細(xì)胞在低于正常生長(zhǎng)溫度情況下,會(huì)調(diào)整為靜止期,或者慢速生長(zhǎng)期,恢復(fù)37度的環(huán)境至少3個(gè)小時(shí)左右,才能重新調(diào)整到接近對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的狀態(tài),在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期進(jìn)行細(xì)胞的傳代會(huì)大大增加傳代的成功率,和細(xì)胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細(xì)胞密度超過90%,并且細(xì)胞狀態(tài)很好時(shí),則復(fù)溫后2個(gè)小時(shí)需要立即傳代。傳代的比例應(yīng)依據(jù)不同的細(xì)胞而定。對(duì)于生長(zhǎng)比較快,狀態(tài)穩(wěn)定,不易受外界影響的細(xì)胞可以一次多傳幾瓶;對(duì)于生長(zhǎng)較慢,細(xì)胞比較薄,狀態(tài)容易波動(dòng)的細(xì)胞類型,一次少傳些,每瓶細(xì)胞密度大些,便于穩(wěn)定生長(zhǎng)。至于一些比較陌生的細(xì)胞,次處理也可以依照第二種情況。
細(xì)胞來(lái)源說明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
CV-1 Thawing非洲綠猴腎細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
很多朋友討論細(xì)胞培養(yǎng)問題,見到很多很好的經(jīng)驗(yàn)總結(jié),這里說一些我個(gè)人的經(jīng)驗(yàn),因?yàn)橐恍┍容^特殊的原因,我自己培養(yǎng)接觸過近300種細(xì)胞,常用于做實(shí)驗(yàn)的,累積有百余種,可以說遇到過許多各式各樣古怪的細(xì)胞。這里挑細(xì)胞消化開始做我的篇專題,并不是因?yàn)榧?xì)胞消化最重要,而是近期看到大家頻繁討論這個(gè)話題,我就拋磚引玉,下面幾點(diǎn)拙見,可能與其它朋友總結(jié)的一些經(jīng)驗(yàn)有點(diǎn)出入,僅供大家參考。許多同學(xué)對(duì)細(xì)胞消化做了許多研究,得出了很多有價(jià)值的經(jīng)驗(yàn),也見到很多人的困惑。其實(shí)細(xì)胞培養(yǎng),尤其是細(xì)胞系的培養(yǎng),就消化而言,不是太難,做得多了,善于總結(jié)經(jīng)驗(yàn),就能把細(xì)胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟,細(xì)節(jié)操作,我這里就不講了,只講一些基本操作背后的知識(shí),如果不對(duì)之處,歡迎指正,總結(jié)下來(lái),細(xì)胞培養(yǎng)中消化很重要,但其實(shí)消化并不是細(xì)胞培養(yǎng)的關(guān)鍵所在(雖然很重要),關(guān)鍵所在是細(xì)胞來(lái)源,血清質(zhì)量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細(xì)胞遇到各種各樣的問題,很多時(shí)候bottleneck沒有找到,雖然通過其它方法有所改善,但仍然是事倍功半。因?yàn)槿藗兺⒁庾约旱牟僮?,總覺得自己沒有經(jīng)驗(yàn),而忽視試劑,溶液尤其是細(xì)胞的質(zhì)量,后者其實(shí)才是許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室常見的問題。
細(xì)胞形態(tài)特性:成纖維細(xì)胞樣
E304細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SR-786細(xì)胞、3LL細(xì)胞、U138細(xì)胞
RT-112細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C32-mel細(xì)胞、HeLa/DDP細(xì)胞、RCC10細(xì)胞
C38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL1細(xì)胞、NCI-H441-4細(xì)胞、RBL 2H3細(xì)胞
Ramos G6.C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-579細(xì)胞、T-ALL-1細(xì)胞、MDA-MB-175VII細(xì)胞
2780細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:aTC1 Clone 6細(xì)胞、T-47D細(xì)胞、HCC-1428細(xì)胞
LY細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H7721細(xì)胞、H35 Reuber細(xì)胞、Karpas-422細(xì)胞
16HBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC38細(xì)胞、RASMC細(xì)胞、SNB.19細(xì)胞
NCI-H2171細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AN3細(xì)胞、Walker/LLC-WRC 256細(xì)胞、RCK8細(xì)胞
7404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:4-1st細(xì)胞、Hs 706.T細(xì)胞、Hs 821.T細(xì)胞
MDA-MB-436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF/CEM/0細(xì)胞、MRASMC細(xì)胞、SCC090細(xì)胞
NCI-SNU-119細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK clone 49F細(xì)胞、MDAMB134細(xì)胞、H-2172細(xì)胞
2B4-L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNF1細(xì)胞、Hs 343.T細(xì)胞、GM04680細(xì)胞
H-2405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lu-99A細(xì)胞、WiDr細(xì)胞、WM115F細(xì)胞
U266BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HP615細(xì)胞、RMG1細(xì)胞、NOZ細(xì)胞
SNU520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2170細(xì)胞、RIN-m 14B細(xì)胞、H322T細(xì)胞
MDCK-II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-Lu-65細(xì)胞、U-373-MG細(xì)胞、SKMES1細(xì)胞
OCUM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-157細(xì)胞、NCI-H1666細(xì)胞、HEK (AD293)細(xì)胞
NCIH1651細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KG-1細(xì)胞、HuT 78細(xì)胞、NCIH1792細(xì)胞
Hs888T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4 I細(xì)胞、LPC-H12細(xì)胞、GOS3細(xì)胞
LS1034細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK-52E細(xì)胞、NCL-H548細(xì)胞、SK-N-F1細(xì)胞
HCT-8/V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DR2R 1610細(xì)胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞、TCCSUP細(xì)胞
HCT-8/V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DR2R 1610細(xì)胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞、TCCSUP細(xì)胞
8305C_1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2087細(xì)胞、P-815細(xì)胞、H345細(xì)胞
BT-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos (RA 1)細(xì)胞、H-1694細(xì)胞、MC-4細(xì)胞
NCI-H1105細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1694細(xì)胞、RKO-E6細(xì)胞、Sup T-1細(xì)胞
GM02132C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HR-8348細(xì)胞、GLC82細(xì)胞、MC57G細(xì)胞
CV-1 Thawing非洲綠猴腎細(xì)胞系
UMC-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Embryo Kidney-2細(xì)胞、TSCCa細(xì)胞、SNU-620細(xì)胞
MDA-MB415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMCUB-1細(xì)胞、CAL 85-1細(xì)胞、Y-1細(xì)胞
SUM-159-PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp2/0-Ag-14細(xì)胞、SW1271細(xì)胞、OVCAR4細(xì)胞
WILL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Baby Hamster Kidney from litter No. 21細(xì)胞、BMF細(xì)胞、NCIH2172細(xì)胞
Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 540細(xì)胞、RMC細(xì)胞、P3-X63-Ag8-653細(xì)胞
COLO 829細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:F81細(xì)胞、Swiss3T3細(xì)胞、SK-UT-1細(xì)胞
Tohoku Hospital Pediatrics-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2107細(xì)胞、NCI-H1581細(xì)胞、NFS-60細(xì)胞
SCC VII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AN3-CA細(xì)胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細(xì)胞、MFE296細(xì)胞
KE-37細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KE39細(xì)胞、6-T CEM細(xì)胞、HM1900細(xì)胞
Pt-K2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA 231-LM2-4175細(xì)胞、HFT-8810細(xì)胞、HKF細(xì)胞
SNU-878細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HR8348細(xì)胞、OCI-Ly 1細(xì)胞、NCI-SNU-878細(xì)胞
HMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE(2)-M17細(xì)胞、SKGT4細(xì)胞、QGP 1細(xì)胞
L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PMVEC細(xì)胞、DU-4475細(xì)胞、NCI-SNU-668細(xì)胞
SW-900細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HD11細(xì)胞、Hs68細(xì)胞、AMO1細(xì)胞
MCF/Adr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE(2)M-17細(xì)胞、BEL-7404細(xì)胞、CCC-ESF-1細(xì)胞
DMS 114細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB175VII細(xì)胞、BrCL12細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 1846細(xì)胞
BNL.CL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TFK-1細(xì)胞、MA-104細(xì)胞、NCIH244細(xì)胞
RPMI 8226/S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AC16 [Human hybrid]細(xì)胞、NCIH1650細(xì)胞、PANC-1細(xì)胞
SUM149PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1954細(xì)胞、hTERT RPE1細(xì)胞、HEK293-F細(xì)胞
BT-B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HET1A細(xì)胞、Eph4 1424細(xì)胞、G-292 clone A141B1細(xì)胞
PCI-4B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GDM-1細(xì)胞、NUGC4細(xì)胞、HUT125細(xì)胞
VK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L26細(xì)胞、H2170細(xì)胞、H2171細(xì)胞
RPPVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H209細(xì)胞、HCT FET細(xì)胞、UACC893細(xì)胞
HLEB-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM1細(xì)胞、Ramos-2G6-4C10細(xì)胞、U266B1細(xì)胞
JVM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:YES-2細(xì)胞、MES-SA/Dx-5細(xì)胞、SKHEP1細(xì)胞
MES-SA Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs294細(xì)胞、HSC6細(xì)胞、C-33 A細(xì)胞
K7M2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03569D細(xì)胞、Pro-Lec1.3C細(xì)胞、NCI-H1092細(xì)胞
RLE-6TN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H10T1/2CL8細(xì)胞、U-251MG細(xì)胞、RWPE-1細(xì)胞
SKGT2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 895 T細(xì)胞、SK LU 1細(xì)胞、TE 32細(xì)胞
TALL 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Michigan Cancer Foundation-12F細(xì)胞、SW837細(xì)胞、MPC-5細(xì)胞
KYSE30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF7/WT細(xì)胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate細(xì)胞、HCA7細(xì)胞
Panc-03.27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320F細(xì)胞、NKT細(xì)胞、B16-BL6細(xì)胞
SKNBE(2c)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Melan-a細(xì)胞、HCA 7細(xì)胞、NCI-H522細(xì)胞
CV-1 Thawing非洲綠猴腎細(xì)胞系
NUGC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP C4-2細(xì)胞、HBE 135-E6/E7細(xì)胞、H1703細(xì)胞
CW-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2066細(xì)胞、C-4 I細(xì)胞、Rat Chondrosarcoma Swarm細(xì)胞
BPH-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H711細(xì)胞、HEK;293細(xì)胞、Hs-746T細(xì)胞
HONE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-4 S+L-細(xì)胞、GM05372E細(xì)胞、H1522細(xì)胞
H-146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1359細(xì)胞、H64細(xì)胞、KALS1細(xì)胞
Swiss-3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1688細(xì)胞、Capan2細(xì)胞、HCC1395細(xì)胞
Panc04.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK92細(xì)胞、NF639細(xì)胞、Rabbit Kidney 13細(xì)胞
Human Intestinal Epithelial Cell-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGY7701細(xì)胞、CNE-2細(xì)胞、PK (15)細(xì)胞
NCIH2196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT/Taxo1細(xì)胞、CAOV4細(xì)胞、RKO_AS45細(xì)胞
AMJ2-C8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ANA1細(xì)胞、CHO K1細(xì)胞、SGC 7901細(xì)胞
G-292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-CH1細(xì)胞、NCTC clone 1469細(xì)胞、H-647細(xì)胞
"