"COS-7 ThawingSV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：此細(xì)胞株源自CV-１細(xì)胞株，經(jīng)轉(zhuǎn)染起始點(diǎn)缺失的SV４０病毒突變體得到；編碼表達(dá)野生型T抗原，所以該細(xì)胞適合作為需要SV４０T抗原表達(dá)的載體的轉(zhuǎn)染宿主。該細(xì)胞表達(dá)T抗原，允許SV４０病毒的溶解性生長，支持４０℃時溫度敏感性A２０９病毒的復(fù)制，支持起始區(qū)域缺陷的SV４０突變體的復(fù)制。因含有SV４０病毒的DNA序列，該細(xì)胞需要在２級生物安全柜中操作。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
COS-7 ThawingSV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞系
細(xì)胞生長：貼壁
解凍細(xì)胞常見實(shí)驗(yàn)問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細(xì)胞時，發(fā)現(xiàn)會出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長緩慢等問題，究竟是什么原因?qū)е?，我們該怎么進(jìn)行解決？以下是國內(nèi)外細(xì)胞培養(yǎng)專家針對解凍細(xì)胞實(shí)驗(yàn)問題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細(xì)胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡，因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠高，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細(xì)胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開始培養(yǎng)；３)對冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時細(xì)胞需要幾周時間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的條件在對數(shù)期；４)被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍最近冷凍的細(xì)胞。細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時間越長，存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時間和方法。在冷凍時細(xì)胞應(yīng)處于對數(shù)期。
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
預(yù)防細(xì)胞污染的注意事項(xiàng)：實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前，超凈臺用紫外燈照射30-60min，然后用75%酒精擦拭超凈臺臺面，并開啟超凈臺風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)10min左右再開始實(shí)驗(yàn)操作。實(shí)驗(yàn)用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺內(nèi)；實(shí)驗(yàn)用品用完應(yīng)移出超凈臺，以利于氣流的流通。實(shí)驗(yàn)完成后用75%酒精擦拭超凈臺臺面。每次操作只處理一種細(xì)胞；即使不同細(xì)胞使用相同的培養(yǎng)基也不要共享同一瓶培養(yǎng)基，避免細(xì)胞間的交叉污染。操作時小心取用無菌的物品，避免污染。勿碰觸吸管尖頭，不小心碰觸后應(yīng)立即更換；不要在打開的容器瓶口正上方操作，容器打開后，傾斜45°操作，操作完成后及時蓋上瓶蓋。CO2培養(yǎng)箱的清潔是較易被忽視的地方，應(yīng)1-2個月對培養(yǎng)箱定期進(jìn)行清潔消毒。先用75%酒精擦拭培養(yǎng)箱內(nèi)壁、隔板、水盤2-3次，用雙蒸水清洗，再用酒精棉球擦拭一遍，后紫外燈照射4h以上。水盤內(nèi)加入無菌水（應(yīng)每周更換），待培養(yǎng)箱內(nèi)溫度、濕度、CO2濃度穩(wěn)定后再放入細(xì)胞。定期清洗或更換超凈臺過濾膜、預(yù)濾網(wǎng)。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
COS-7 ThawingSV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液，用PBS清洗(沖洗)，加入適量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以蓋住細(xì)胞，消化溫度是３７℃；２)顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時細(xì)胞消化適度；(３)吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養(yǎng)液?！敬荡蚍稚⒓?xì)胞操作】１)吹打制懸：用滴管將已經(jīng)消化細(xì)胞吹打成細(xì)胞懸液；２)吸細(xì)胞懸液入離心管：將細(xì)胞懸液吸入１０ml離心管中；３)平衡離心：平衡后將離心管放入臺式離心機(jī)中，以１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心６-８分鐘；４)棄上清液，加入新培養(yǎng)液：棄去上清液，加入２ml培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細(xì)胞制成細(xì)胞懸液?！痉盅b稀釋細(xì)胞操作】１)顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞量，必要是計(jì)數(shù)。注意密度過小會影響傳代細(xì)胞的生長，傳代細(xì)胞的密度應(yīng)該不低于５×１０５/ml。最后要做好標(biāo)記；２)分裝：將細(xì)胞懸液吸出分裝至２～３個培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋；３)繼續(xù)培養(yǎng)：用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，適當(dāng)旋松瓶蓋，放入CO２培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細(xì)胞２小時后開始貼附在瓶壁上。
細(xì)胞形態(tài)特性：成纖維細(xì)胞樣
CWR22Rv1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2110細(xì)胞、Det 562細(xì)胞、HME-1細(xì)胞
HO-8910 PM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL-40細(xì)胞、H-2227細(xì)胞、NCI-H345細(xì)胞
OVMANA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-5細(xì)胞、LIXC-002細(xì)胞、PA317細(xì)胞
SF763細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H510A細(xì)胞、MONO-MAC 6細(xì)胞、PBMC細(xì)胞
NK-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WPMY1細(xì)胞、CAL-62細(xì)胞、MDA-MB-361細(xì)胞
67NR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs839T細(xì)胞、H2195細(xì)胞、LLCMK2細(xì)胞
Clone 929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mv1Lu細(xì)胞、HET1A細(xì)胞、N1E-115細(xì)胞
KRC-Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Foreskin Fibroblast細(xì)胞、EAC細(xì)胞、Y3M細(xì)胞
NCI-H82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VSC4.1細(xì)胞、PT67細(xì)胞、H2108細(xì)胞
2780細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：aTC1 Clone 6細(xì)胞、T-47D細(xì)胞、HCC-1428細(xì)胞
GM03571細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fetal Rhesus Kidney-4細(xì)胞、HCC-1395細(xì)胞、SU86.86細(xì)胞
P560細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuT-78細(xì)胞、H889細(xì)胞、OVCAR-10細(xì)胞
KMH-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly1細(xì)胞、SJRH-30細(xì)胞、aTC1 Clone 6細(xì)胞
HEM-L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Z310細(xì)胞、SU.86.86細(xì)胞、ECC-12細(xì)胞
HMEC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEP-sm 1細(xì)胞、LU-65M細(xì)胞、SKNBE(2c)細(xì)胞
SNU368細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB-4細(xì)胞、D10G41細(xì)胞、PVEC細(xì)胞
PLA801-95D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJSA細(xì)胞、Panc05.04細(xì)胞、MPC 11細(xì)胞
FHs 74 Int細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KPL1細(xì)胞、H-510細(xì)胞、HEC-251細(xì)胞
NCI-H1781細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：253JBV細(xì)胞、NHEK細(xì)胞、ESC-410細(xì)胞
RERF-LCMS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1882細(xì)胞、MAntle cell VERona-1細(xì)胞、BLO-11細(xì)胞
HCC0015細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV434細(xì)胞、IBMF-7細(xì)胞、IMCD-3細(xì)胞
HCC0015細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV434細(xì)胞、IBMF-7細(xì)胞、IMCD-3細(xì)胞
HuPT3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LU165細(xì)胞、624-mel細(xì)胞、COLO-738細(xì)胞
NALM 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-1386細(xì)胞、BT-549細(xì)胞、EC-109細(xì)胞
PANC.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293T/17細(xì)胞、Kupffer細(xì)胞、SCC 9細(xì)胞
SHEP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC-39細(xì)胞、Panc-08.13細(xì)胞、Hs940T細(xì)胞
COS-7 ThawingSV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞系
67NR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs839T細(xì)胞、H2195細(xì)胞、LLCMK2細(xì)胞
H-727細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293A細(xì)胞、U251細(xì)胞、PK-13細(xì)胞
RGCs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MES-1細(xì)胞、C81-61細(xì)胞、3T6 Swiss Albino細(xì)胞
IEC 18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H865細(xì)胞、alpha-TC1-6細(xì)胞、CL-40細(xì)胞
Large Cell Lung Cancer-103H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WPMY-1細(xì)胞、A2780CP細(xì)胞、NCI-SNU-423細(xì)胞
C22 (Clara)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM-192C細(xì)胞、HCC1833細(xì)胞、NCI/ADRRES細(xì)胞
MHCC97細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK N SH細(xì)胞、BPH1細(xì)胞、LN299細(xì)胞
Lymph Node Carcinoma of the prostate細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1623細(xì)胞、H-719細(xì)胞、OVSAHO細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Gingival carcinoma Neck Metastasis細(xì)胞、Okayama University Medical School-23細(xì)胞、FHL124細(xì)胞
HuT-78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC-PK1細(xì)胞、University of Arizona Cell Culture-812細(xì)胞、LS-513細(xì)胞
786-O RCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMA 560細(xì)胞、Murine Carcinoma-38細(xì)胞、VK2/E6E7細(xì)胞
HCC0202細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-CPAP細(xì)胞、HT-29/CX-1細(xì)胞、OV-1063細(xì)胞
MKN-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM12 SM細(xì)胞、108CC15細(xì)胞、NR-8383細(xì)胞
NS1-1 Ag4.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1238細(xì)胞、PANC1005細(xì)胞、EB3 [Human Burkitt lymphoma]細(xì)胞
OVCAR-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IAR20細(xì)胞、NK-92MI細(xì)胞、Hs 895.T細(xì)胞
Ramos (RA)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALB/3T3 clone A31細(xì)胞、H19-7細(xì)胞、Nb-2細(xì)胞
HCT116/L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC 1005細(xì)胞、LAC細(xì)胞、U-2-OS細(xì)胞
HCC-1438細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN229細(xì)胞、PA I細(xì)胞、BpRcl細(xì)胞
Hca-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARO81細(xì)胞、RASMCs細(xì)胞、SK Mel 2細(xì)胞
HS 683T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H522細(xì)胞、U266細(xì)胞、3T3-Swiss細(xì)胞
SF 763細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM2131細(xì)胞、RD細(xì)胞、HT-29細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AGS細(xì)胞、P388.D1細(xì)胞、P3X63 AG8-653細(xì)胞
IPEC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3 (Jiyoye)細(xì)胞、CCRF/CEM/0細(xì)胞、SKNO1細(xì)胞
CAMA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 51細(xì)胞、TSU-Pr1細(xì)胞、H929細(xì)胞
CHL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-128細(xì)胞、HEK/EBNA細(xì)胞、MGH-U1細(xì)胞
MNNGHOS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BIC1細(xì)胞、V 79細(xì)胞、H28細(xì)胞
C-32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EST81細(xì)胞、Cloudman M3細(xì)胞、UK Pan-1細(xì)胞
BC-027細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOVAS細(xì)胞、SW 620細(xì)胞、CT-26 WT細(xì)胞
H-EMC-SS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BSC-40細(xì)胞、HS 683T細(xì)胞、U-373 MG細(xì)胞
U266-B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC0403細(xì)胞、SK-MEL-5細(xì)胞、Super Tube細(xì)胞
Hs895.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BMU-S1細(xì)胞、D10細(xì)胞、H1395細(xì)胞
NCIH1688細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H23細(xì)胞、AGS細(xì)胞、786-0WT細(xì)胞
Helacyton gartleri細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCGC細(xì)胞、VP229細(xì)胞、RBL.2H3細(xì)胞
COS-7 ThawingSV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞系
HO8910/PM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bac12F5細(xì)胞、U-118-MG細(xì)胞、MUS-M1細(xì)胞
Hs604T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TSCCa細(xì)胞、P3X63細(xì)胞、GA-10 clone 4細(xì)胞
HNE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SP-2細(xì)胞、DMS 79細(xì)胞、NCI-SNU-119細(xì)胞
Hs895.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BMU-S1細(xì)胞、D10細(xì)胞、H1395細(xì)胞
Panc 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA317細(xì)胞、TE5細(xì)胞、OCI-Ly01細(xì)胞
C-127細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：McARH7777細(xì)胞、TOV112細(xì)胞、BPH-1細(xì)胞
H-2198細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS-11細(xì)胞、NCCIT細(xì)胞、JJN-3細(xì)胞
HOS/MNNG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2347細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-51細(xì)胞、JROECL19細(xì)胞
Panc 3.27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774細(xì)胞、P3JHR-1細(xì)胞、HS852.T細(xì)胞
SKUT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tn5 B1-4細(xì)胞、Calf Pulmonary Artery Endothelial細(xì)胞、HepG2細(xì)胞
Hs 606細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L132細(xì)胞、NCI-H2081細(xì)胞、NTERA-2 clone D1細(xì)胞
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