"RWPE-1 Thawing人正常前列腺上皮細胞系
細胞背景資料：腫瘤抑制基因： p５３ + [PubMed: ９２１４６０５] pRB + [PubMed: ９２１４６０５] 一位正常男性前列腺組織切片的周圍區(qū)域的上皮細胞用單拷貝的人乳頭瘤病毒的１８(HPV-１８)進行轉(zhuǎn)化，建立了RWPE-１ (ATCC CRL-１１６０９) 細胞株 [PubMed: ９２１４６０５]. 在三維Matrigel培養(yǎng)時，在雄激素作用下，RWPE-１細胞形成腺胞并向培養(yǎng)基中分泌PSA。[PubMed: １１１７０１４２]. 當與Matrigel或基質(zhì)細胞混合注射雄性裸鼠時，RWPE-１細胞也能形成腺胞[PubMed: １１３０４７２４] 并產(chǎn)生PSA。 來源于RWPE-１的細胞再用Kirstin鼠類腫瘤病毒轉(zhuǎn)染Ki-ras基因，建立了能成瘤的RWPE-２細胞株(ATCC CRL-１１６１０) [PubMed: ９２１４６０５] 和 RWPE２-W９９ (ATCC CRL-２８５３) 細胞株。 另外，用N--N-(MNU)處理RWPE-１，建立了一系列模擬前列腺癌進程中不同時期的成瘤細胞株。 它們是 WPE１-NA２２ (ATCC CRL-２８４９), WPE１-NB１４ (ATCC CRL-２８５０, WPE１-NB１１ (ATCC CRL-２８５１) 和 WPE１-NB２６ (ATCC CRL-２８５２) 細胞株。 據(jù)提供者報道，RWPE-１ 細胞株(ATCC CRL-１１６０９)經(jīng)過檢測，乙肝、丙肝、人免疫缺陷病毒都呈陰性。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
RWPE-1 Thawing人正常前列腺上皮細胞系
細胞生長：貼壁
接收細胞相關問題：如不能在收到細胞后及時操作細胞，T２５及離心管發(fā)貨的細胞將可以消毒后在３７度過夜，血清發(fā)貨的細胞在室溫下靜置１-２天(注意不要放冰箱)，干冰發(fā)貨的可以在確認干冰未完全升華時將細胞直接放回液氮或者-８０度冰箱，若干冰完全升華，請即刻復蘇細胞。T２５瓶及離心管在培養(yǎng)箱平衡是為了讓細胞盡快適應培養(yǎng)箱環(huán)境，同時使部分因運輸導致脫落的細胞貼壁，此步驟非常必要。T２５瓶如果在顯微鏡下可以看到部分不貼壁的細胞，可以收集上清后離心(１２００rpm，５min)后，將沉淀用新的培養(yǎng)基重懸后接種至新的培養(yǎng)瓶或皿中。部分細胞在運輸過程中，由于不斷震蕩及環(huán)境不適，可能導致細胞破碎死亡，從而使培養(yǎng)基中漂浮很多細胞碎片及顆粒狀物質(zhì)。這種情況下，平衡后，貼壁細胞用PBS洗兩遍再加新的培養(yǎng)基培養(yǎng)或者傳代至新瓶中培養(yǎng)即可；懸浮細胞可以離心(１０００rpm，３min)收集細胞，并用PBS重懸后再離心一次，再用新的培養(yǎng)基重懸并接種細胞。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：３傳代,２-３天傳一代。
細胞培養(yǎng)更好經(jīng)驗詳解：1)收到細胞，首先要鏡檢：觀察細胞形態(tài)是否正常，對于貼壁細胞則要注意看貼壁情況是否很好，觀察細胞密度，有疑議及時咨提供細胞的技術人員。 由于運輸?shù)臅r間或者溫度的變化，很多貼壁細胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長的狀態(tài)和平時會有點不一樣，主要是貼壁牢固問題。比如293T，平時貼壁就不是很牢，在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面，會發(fā)生大片的脫落，細胞聚集在一起，但是細胞生長還是正常的，通過離心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的貼壁生長。2)當通過上一步的觀察，細胞初步?jīng)]有問題時，進行下一步操作。當收到的細胞密達到80%左右時，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基；或更換新鮮的培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中，隨后每天觀察。 細胞在低于正常生長溫度情況下，會調(diào)整為靜止期，或者慢速生長期，恢復37度的環(huán)境至少3個小時左右，才能重新調(diào)整到接近對數(shù)生長期的狀態(tài)，在對數(shù)生長期進行細胞的傳代會大大增加傳代的成功率，和細胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細胞密度超過90%，并且細胞狀態(tài)很好時，則復溫后2個小時需要立即傳代。傳代的比例應依據(jù)不同的細胞而定。對于生長比較快，狀態(tài)穩(wěn)定，不易受外界影響的細胞可以一次多傳幾瓶；對于生長較慢，細胞比較薄，狀態(tài)容易波動的細胞類型，一次少傳些，每瓶細胞密度大些，便于穩(wěn)定生長。至于一些比較陌生的細胞，次處理也可以依照第二種情況。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
RWPE-1 Thawing人正常前列腺上皮細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液，用PBS清洗(沖洗)，加入適量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以蓋住細胞，消化溫度是３７℃；２)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察消化細胞，若胞質(zhì)回縮，細胞之間不再連接成片，表明此時細胞消化適度；(３)吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養(yǎng)液?！敬荡蚍稚⒓毎僮鳌浚?吹打制懸：用滴管將已經(jīng)消化細胞吹打成細胞懸液；２)吸細胞懸液入離心管：將細胞懸液吸入１０ml離心管中；３)平衡離心：平衡后將離心管放入臺式離心機中，以１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心６-８分鐘；４)棄上清液，加入新培養(yǎng)液：棄去上清液，加入２ml培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細胞制成細胞懸液?！痉盅b稀釋細胞操作】１)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察細胞量，必要是計數(shù)。注意密度過小會影響傳代細胞的生長，傳代細胞的密度應該不低于５×１０５/ml。最后要做好標記；２)分裝：將細胞懸液吸出分裝至２～３個培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋；３)繼續(xù)培養(yǎng)：用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，適當旋松瓶蓋，放入CO２培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細胞２小時后開始貼附在瓶壁上。
細胞形態(tài)特性：上皮細胞
A-875細胞系相關產(chǎn)品：OVCA-433細胞、Helacyton gartleri細胞、MIA Paca2細胞
C6661細胞系相關產(chǎn)品：MOLP-8細胞、THLE-3細胞、NS1細胞
PC-3M-1E8細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR-4細胞、ARH 77細胞、QBI-293A細胞
NW-38細胞系相關產(chǎn)品：Y3-Ag1.2.3細胞、BEAS-2B細胞、Mevo細胞
Laboratory of Allergic Diseases 2細胞系相關產(chǎn)品：SU-DHL-1細胞、Hep 3B2_1-7細胞、GM-215細胞
SKMel-28細胞系相關產(chǎn)品：Line 207細胞、Hs 888.Lu細胞、A-498細胞
SUDHL-1細胞系相關產(chǎn)品：NCI-SNU-119細胞、JIMT-1細胞、COS1細胞
CEM-T4細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB 468細胞、OCI-AML-2細胞、MDCK (NBL-2)細胞
NFHIOSE-80細胞系相關產(chǎn)品：Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞、RBL2H3細胞、COLO394細胞
PC-3細胞系相關產(chǎn)品：Lec1細胞、C57 Mouse Tumor 93細胞、H2141細胞
H295R-S1細胞系相關產(chǎn)品：AU565細胞、AN3-CA細胞、HEK-2細胞
HPAF-II/CD18細胞系相關產(chǎn)品：MSC細胞、GM-346細胞、SUP-B15細胞
HG2855細胞系相關產(chǎn)品：P116細胞、H-735細胞、MLE-12細胞
NOMO1細胞系相關產(chǎn)品：Keio University-19-19細胞、Evsa T細胞、Kit 225 K6細胞
HFLS-OA細胞系相關產(chǎn)品：HFF-1細胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞、HGF-1細胞
CTV1細胞系相關產(chǎn)品：Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞、SPC-A-1細胞、CORL23細胞
H-1341細胞系相關產(chǎn)品：A1847細胞、MDBK (NBL-1)細胞、D-341Med細胞
S.B.細胞系相關產(chǎn)品：BEL7402細胞、HEK-293-EBNA細胞、DU 145細胞
CCD 841 CoTr細胞系相關產(chǎn)品：COLO-320HSR細胞、CHP212細胞、C3H-10T1/2細胞
C42細胞系相關產(chǎn)品：LUDLU-1細胞、1E8-H細胞、PLA 802細胞
SKG3A細胞系相關產(chǎn)品：IOSE29細胞、B-3細胞、SW-48細胞
SKG3A細胞系相關產(chǎn)品：IOSE29細胞、B-3細胞、SW-48細胞
NCIH1770細胞系相關產(chǎn)品：J45.01細胞、293 F細胞、Kasumi 1細胞
H548細胞系相關產(chǎn)品：Jurkat, Clone E6-1細胞、CCD18Co細胞、TSCCa細胞
WM 2664細胞系相關產(chǎn)品：TE-9細胞、SK-MEL24細胞、MV411細胞
SW-579細胞系相關產(chǎn)品：OCI/AML3細胞、M-G63細胞、MAVER細胞
RWPE-1 Thawing人正常前列腺上皮細胞系
SK-MEL-28細胞系相關產(chǎn)品：HSF細胞、AQ-Mel細胞、4-1st細胞
Caco 2細胞系相關產(chǎn)品：HEM-L細胞、hSCC-25細胞、FRO細胞
A375S2細胞系相關產(chǎn)品：H1341細胞、PANC 1005細胞、PNT1-a細胞
HSKMC細胞系相關產(chǎn)品：C8166-CD4細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞、SIRC細胞
38C-13細胞系相關產(chǎn)品：MAVER細胞、HT-3細胞、U343細胞
LAN-1細胞系相關產(chǎn)品：NCIH460細胞、KMM1細胞、BTI-Tn5B14細胞
P-815細胞系相關產(chǎn)品：P3-X63-Ag8細胞、Human fetal lung fibroblast 1細胞、Panc-327細胞
Porcine Kidney-13細胞系相關產(chǎn)品：H-1048細胞、P3HRI細胞、HPAF II細胞
SMMC7721細胞系相關產(chǎn)品：CTLA4Ig-24細胞、C-6細胞、GM07404細胞
NCIH647細胞系相關產(chǎn)品：Kit 225-K6細胞、Tca-83細胞、CX1細胞
H2087細胞系相關產(chǎn)品：MIN6細胞、HCC0827細胞、CCD-33Co細胞
NSH細胞系相關產(chǎn)品：THC-8307細胞、LA-N-6細胞、HEK 293 EBNA細胞
OSC-19細胞系相關產(chǎn)品：BE2_C細胞、MDA 1386細胞、CL 1-0細胞
Panc 10.05細胞系相關產(chǎn)品：U373-MG細胞、CMT-93細胞、SNUC2A細胞
SK-MEL-3細胞系相關產(chǎn)品：HBZY-1細胞、GM07404D細胞、Strain L-929細胞
H-7721細胞系相關產(chǎn)品：TSU-Pr1細胞、TGBC-11-TKB細胞、HEp-2細胞
MHH-CALL-2細胞系相關產(chǎn)品：HIEC細胞、KYSE 270細胞、OCI/AML-3細胞
Caco2BBe細胞系相關產(chǎn)品：Tn-5B1-4細胞、OVCAR4細胞、LS174T細胞
SKRC-39細胞系相關產(chǎn)品：H1155細胞、SPDC-CCL141細胞、MOLT-3細胞
SL-29細胞系相關產(chǎn)品：MB39細胞、LED-WiDr細胞、E0771細胞
Rat Skin 1細胞系相關產(chǎn)品：UCLA SO M21細胞、B16BL-6細胞、CAL39細胞
LS 1034細胞系相關產(chǎn)品：MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞、LY細胞、OVCA 433細胞
HEL 299細胞系相關產(chǎn)品：H2085細胞、MM.1S細胞、L-5178-Y細胞
OCI AML5細胞系相關產(chǎn)品：H-1693細胞、Hs-688A-T細胞、X63Ag8.653細胞
Panc_05_04細胞系相關產(chǎn)品：JIMT1細胞、H2172細胞、McARH7777細胞
HR-1細胞系相關產(chǎn)品：HEK293F細胞、Walker-256-TC細胞、SNU638細胞
Vero 76 clone E6細胞系相關產(chǎn)品：EFO 27細胞、HMCB細胞、PaTu-8988s細胞
HOP62細胞系相關產(chǎn)品：UM-RC-2細胞、SK-OV-3細胞、Ku812F細胞
Pa18C細胞系相關產(chǎn)品：HS-766T細胞、BSC40細胞、NCI-441細胞
YES 2細胞系相關產(chǎn)品：SNU520細胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞、SUM-159細胞
SKG IIIa細胞系相關產(chǎn)品：HS578T細胞、NIH:OVCAR-3細胞、WEHI 3細胞
NCIH295R細胞系相關產(chǎn)品：TI-73細胞、NCIH1755細胞、NCI-H2591細胞
P30OHK細胞系相關產(chǎn)品：Rat-2細胞、H-4-II-E細胞、SK-MEL-5細胞
RWPE-1 Thawing人正常前列腺上皮細胞系
H2085細胞系相關產(chǎn)品：Epstein-Barr-1細胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞、H1618細胞
3T3 L1細胞系相關產(chǎn)品：NL20SV細胞、IEC6細胞、NALM 6細胞
NW-MEL-38細胞系相關產(chǎn)品：LL/2(LLc1)細胞、D324 Med細胞、NCIH1944細胞
Tu686細胞系相關產(chǎn)品：UCLA-RO 81細胞、SUM102細胞、RPMI8402細胞
SKMEL-24細胞系相關產(chǎn)品：MDA-134細胞、AE 1201細胞、MV4II細胞
Sf21細胞系相關產(chǎn)品：U-251_MG細胞、NHRF細胞、HT-3細胞
COR-L105細胞系相關產(chǎn)品：HSC1細胞、NCIH1435細胞、Tca-8113細胞
BE(2)-C細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H209細胞、MESSA/Dx5細胞、COLO679細胞
HuTu-80細胞系相關產(chǎn)品：Alpha Mouse Liver 12細胞、3T3-L1 ad細胞、Vero from pool #76細胞
Hs-675-T細胞系相關產(chǎn)品：HO8910細胞、C4 I細胞、RPMI-8226S細胞
H-650細胞系相關產(chǎn)品：LCLC103H細胞、ARO 81-1細胞、AtT 20細胞
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