"PNT1A Thawing人前列腺癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
PNT1A Thawing人前列腺癌細胞系
細胞生長:貼壁
傳代培養(yǎng)及其操作步驟:原代細胞培養(yǎng)成功以后,需要進行分離培養(yǎng),否則細胞會因生存空間不足或密度過大,營養(yǎng)障礙,影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株),可以進行細胞克隆,易于保存,但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料,便于實驗?!静僮鞑襟E】1)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液;2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜;3)置37℃孵箱或室溫(25℃溫度)下進行消化,2~5min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察,當發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后,應(yīng)立即中止消化;4)吸出消化液,向瓶內(nèi)加入Hanks液少量,輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶,把殘留消化液沖掉,然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液,終止消化;5)使用彎頭吸管,吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液,按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細胞,使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔,以防用力過猛損傷細胞;6)用計數(shù)板計數(shù)后,分別接種于新的培養(yǎng)瓶中,置CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng);7)細胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般2~3d后應(yīng)換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面,即可使用;也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液。【注意事項】1)掌握好細胞消化的時間,消化時間過短時,細胞不宜從瓶壁脫落,過長的消化會導(dǎo)致細胞脫落、損傷;2)掌握好消化濃度,當消化液濃度過高時,消化時間應(yīng)縮短,過低時細胞消化時間相對延長。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
預(yù)防細胞污染的注意事項:實驗進行前,超凈臺用紫外燈照射30-60min,然后用75%酒精擦拭超凈臺臺面,并開啟超凈臺風扇運轉(zhuǎn)10min左右再開始實驗操作。實驗用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺內(nèi);實驗用品用完應(yīng)移出超凈臺,以利于氣流的流通。實驗完成后用75%酒精擦拭超凈臺臺面。每次操作只處理一種細胞;即使不同細胞使用相同的培養(yǎng)基也不要共享同一瓶培養(yǎng)基,避免細胞間的交叉污染。操作時小心取用無菌的物品,避免污染。勿碰觸吸管尖頭,不小心碰觸后應(yīng)立即更換;不要在打開的容器瓶口正上方操作,容器打開后,傾斜45°操作,操作完成后及時蓋上瓶蓋。CO2培養(yǎng)箱的清潔是較易被忽視的地方,應(yīng)1-2個月對培養(yǎng)箱定期進行清潔消毒。先用75%酒精擦拭培養(yǎng)箱內(nèi)壁、隔板、水盤2-3次,用雙蒸水清洗,再用酒精棉球擦拭一遍,后紫外燈照射4h以上。水盤內(nèi)加入無菌水(應(yīng)每周更換),待培養(yǎng)箱內(nèi)溫度、濕度、CO2濃度穩(wěn)定后再放入細胞。定期清洗或更換超凈臺過濾膜、預(yù)濾網(wǎng)。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
PNT1A Thawing人前列腺癌細胞系
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
有關(guān)實驗室細胞培養(yǎng)基知識普及:經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種,Corning、Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12都是應(yīng)用最廣泛的培養(yǎng)基。其他如M199、IMDM、L15培養(yǎng)基等也用于某些細胞的培養(yǎng);MEM是由Eagle’s基礎(chǔ)培養(yǎng)基(BME)發(fā)展而來的,其中增加了組分的范圍及濃度;BEM(DMEM)培養(yǎng)基是為小鼠成纖維細胞設(shè)計的,現(xiàn)在常用于貼壁細胞的培養(yǎng)。DMEM的基酸濃度是MEM的兩倍,維生素濃度是MEM的4倍,采用雙倍的HCO3-和CO2濃度起到更好的緩沖作用。最初的配方中葡萄糖含量為1000mg/L,后來為了某些細胞的生長需要,將葡萄糖含量又調(diào)整為4500mg/L,這就是大家常說的低糖和高糖了;aMEM含有附加的基酸、維生素以及核苷和脂肪酸,它可廣泛應(yīng)用于各種細胞類型,包括對營養(yǎng)成分要求苛刻的細胞;Ham’s F12是為在低血清濃度下克隆CHO細胞而設(shè)計的,現(xiàn)在也廣泛應(yīng)用于克隆形成率的分析及原代培養(yǎng)。F12還可以與DMEM等體積混合使用,得到一種高濃度與成分多樣化相結(jié)合的產(chǎn)物,這種培養(yǎng)基已應(yīng)用于許多原代培養(yǎng)及更難養(yǎng)的細胞系的培養(yǎng);RPMI 1640培養(yǎng)基是專為淋巴細胞培養(yǎng)而設(shè)計的,現(xiàn)在已廣泛應(yīng)用于懸浮細胞的培養(yǎng)。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
YAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC-2細胞、SUDHL5細胞、MCA-205細胞
COV362細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL-1細胞、L5178YR細胞、P30 OHK細胞
HCC1187細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARIP細胞、BNL.CL2細胞、MM6細胞
RAMSCs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H920細胞、DHL-6細胞、A3細胞
NCI-H1672細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BL2141細胞、Turbot Embryonic Cell line細胞、OVCA432_Bast細胞
Hs 870.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPVSMC細胞、MRC5細胞、KYSE510細胞
VMRCLCD細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-5178-Y-R細胞、PaTu-8988s細胞、Astrocyte type I clone細胞
PLC8024細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-174T細胞、KYSE30細胞、Panc3_27細胞
LC-1-sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RH35細胞、P30OHK細胞、Panc_03_27細胞
GM3569細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3.NS-1/1.Ag4.1細胞、MDA-MB361細胞、KNS-81細胞
IMCD-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2009細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞、LIM 1215細胞
UACC-812細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT144-mel細胞、CL 1-5細胞、H69C細胞
NCI-H1437細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2141細胞、MV 3細胞、KBM-7/Hap8細胞
CHP-100細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC9細胞、CAL-33細胞、HPDE6c7細胞
WM 239細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PAEC細胞、IBRS2細胞、SJSA1細胞
CCRF-CEM C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIMEC細胞、JiyoyeP-2003細胞、COLO680N細胞
CCD1112Sk細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB1RGB細胞、BL6細胞、MV-4:11細胞
RKO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM451Lu細胞、SKML-28細胞、HSC(Human Schwann)細胞
Walker256-TC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM239細胞、SW-954細胞、HN4細胞
HT3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FDC-P1細胞、HEK293EBNA細胞、OK細胞
MDA1386細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-549細胞、CEM/C1細胞、MN-60細胞
MDA1386細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-549細胞、CEM/C1細胞、MN-60細胞
NCI-H1155細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-146細胞、MDCK-II細胞、RSMC細胞
U 266細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-4細胞、AML-EOL-1細胞、HCS-2/8細胞
H.Ep.-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-886細胞、PLA802細胞、BT-B細胞
Jurkat (clone E6-1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW756細胞、CEM-CCRF (CAMR)細胞、MOLT-16細胞
PNT1A Thawing人前列腺癌細胞系
NG10815細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30-OHK細胞、B78細胞、IOSE-80細胞
OVISE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1954BL細胞、H2087細胞、HM細胞
GM05372E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU423細胞、NBL-7細胞、L5178YR細胞
HEK293-EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 2.03細胞、Hs746T細胞、U-937細胞
L cells (TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Karpas 422細胞、H1882細胞、OV-CA 432細胞
CEM-CCRF (CAMR)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-358細胞、SKM-1細胞、Epstein-Barr-3細胞
DoTc2-4510細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MS-751細胞、RPMI no. 8226細胞、SG231細胞
RT112細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS4;11細胞、P 815細胞、HaCaT細胞
C-4-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Capan2細胞、beta-TC6細胞、Jijoye細胞
H1915細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNG/HOS細胞、AD293細胞、SCC 25細胞
Hk-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B5537SKIN細胞、BT20細胞、PC-10細胞
OV 1063細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pt K2 (NBL-5)細胞、B6Tert-1細胞、RL細胞
HFT8810細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV 3細胞、Bac12F5細胞、CCD1095Sk細胞
A2058細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-480細胞、AMC-HN8細胞、A7r5細胞
U118-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SV-HUC細胞、brain-derived Endothelial cells.3細胞、GH 3細胞
SU-DHL-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-020細胞、Rat-2細胞、NCIH2170細胞
PECAPJ34細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT細胞、C518細胞、Hs611T細胞
COLO320 DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC 7860細胞、A431/P細胞、MDA-1386細胞
624-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞、aNK細胞、NUGC-2細胞
THP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBVP細胞、WM115-mel細胞、MUTZ3細胞
H1436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep 2細胞、NRK clone 49F細胞、D6P2T細胞
293 c18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-668細胞、HPAF-I細胞、A431/P細胞
JB6 [Mouse]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK49F細胞、CL1-5細胞、ST-2細胞
MAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH820細胞、TF1細胞、RBL細胞
SF-767細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU251細胞、IOSE-Mar細胞、CT 26細胞
H1792細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IM9細胞、Caco-2BBe細胞、MRC-V細胞
PanC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TB1 Lu細胞、OLN-93細胞、M-20細胞
Hs-606-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKES1細胞、NCIH1838細胞、LP-1細胞
NCIH1993細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3AA細胞、KPL4細胞、HUV-EC-C細胞
Pro-5WgaRI3C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-423細胞、NCIH69細胞、Hs 934.T細胞
Spodoptera frugiperda clone 9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-Sf21細胞、VP 267細胞、KBM5細胞
MEF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OKAC1細胞、SNT-8細胞、C8-D1A細胞
K562細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM52細胞、LWnt-3A細胞、EO771細胞
PNT1A Thawing人前列腺癌細胞系
MC26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-274-T細胞、TW 01細胞、HC-11細胞
3AA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-12T細胞、LN299細胞、F9細胞
D-283MED細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293 Ad5細胞、KMS-18細胞、P3-NS1/1-Ag4-1細胞
BALB/3T3 clone A31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO-ori細胞、RC-2細胞、LS-174細胞
H-35 Reuber細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 394細胞、SHSY5Y細胞、HCC1569細胞
IGROV1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI.H226細胞、GH3細胞、SW982細胞
RERFLCMS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DI TNC-1細胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1細胞、CV-1 in Origin Simian-1細胞
CNE-2Z細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-27細胞、WM35細胞、Line 870 Emory University-4細胞
SHI-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T24(ECV304)細胞、C32r細胞、A 172細胞
H69C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H522細胞、MEF (CF-1)細胞、Jurkat E6-1細胞
751細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-NEP-1細胞、H-1792細胞、RIN-14B細胞
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