"A-431 Thawing人皮膚鱗癌細胞系
細胞背景資料：該細胞源自一位患有皮膚鱗狀細胞癌的８５歲女性，是GiardDJ等人建立的一系列細胞株中的一株。該細胞在免疫抑制小鼠體內(nèi)可成瘤，在瓊脂上培養(yǎng)可形成克隆；是一個超三倍體人細胞株。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
A-431 Thawing人皮膚鱗癌細胞系
細胞生長：貼壁
【細胞培養(yǎng)中支原體、黑蛟蟲、真菌的污染情況總結(jié)】支原體：黑色的，好象多為多形，培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會渾濁，原體感染，國內(nèi)血清很多都沒有做支原體陰性檢測，而支原體是牛血清中最常見的微生物之一。而且它不能用過濾的辦法除去。支原體感染細胞以后，細胞病變不很明顯，只是慢慢死去。用泰樂菌素，獸用支原體病的藥，但可用于細胞培養(yǎng)，無任何不良反應。如果作為常用的抗生素的話, 建議用８ug/ml的濃度；黑蛟蟲：可以穿透濾膜，也可以通過空氣傳播，低倍下為黑色點狀，高倍下可看見黑色的小蟲游來游去，培養(yǎng)液也是不渾的，一般不會太影響，細胞還是可以用的。常常是細胞生長狀態(tài)良好，且觀測到的運動物無明顯增多，且培養(yǎng)液顏色、透明度無明顯變化，可在同一批號的血清養(yǎng)的細胞中發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象。對細胞生長狀態(tài)不會有明顯影響，在細胞增殖旺盛之后會自然消失，除更換血清外無須特殊處理。建議如果細胞有可能是此種污染的話，可以增加細胞的種板密度，以提高細胞的生存率；真菌：一般培養(yǎng)液清亮，不變色，鏡下有絲狀物，有些真菌開始很像死細胞碎片，只是它很多很多的小塊很清楚，象珊瑚狀，不象細胞碎片分不清，慢慢的會長出很細的黑色絲狀物。真菌生長的比較慢，不象細菌那么容易被發(fā)現(xiàn)，但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細胞就被污染了，也很難救活了。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
傳代的操作步驟注意事項：1)操作前要洗手，進入超凈臺后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點燃酒精燈，操作在火焰附近進行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時間不能太長，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。3)操作動作要準確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動，增加污染機會。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細胞傳代的操作步驟：1)吸除培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許，以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘，當發(fā)現(xiàn)細胞質(zhì)回縮，細胞間隙增大后，立即終止消化。4)吸除消化液，向瓶內(nèi)注入Hanks液數(shù)毫升，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細胞時，動作要輕，以免把已松動的細胞沖掉流失，如用胰蛋白酶液單獨消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液沖洗，直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。6)計數(shù)板計數(shù)后，把細胞懸液分成等份分裝入數(shù)個培養(yǎng)瓶中，置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細胞傳代的操作步驟：1)吸出細胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
A-431 Thawing人皮膚鱗癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞(絕大部分１min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化；什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的(比如Calu-３細胞)，吹打不超過２０次后(一般１０次即可)，成小規(guī)模聚集(１０個細胞左右)，是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。
細胞形態(tài)特性：上皮樣
NCIH661細胞系相關產(chǎn)品：YTMLC-90細胞、H1618細胞、HUVEC-C[HUVEC]細胞
QG-56細胞系相關產(chǎn)品：SY5Y細胞、Tu-686細胞、SB細胞
U-373MG ATCC細胞系相關產(chǎn)品：IPLB-Sf21-AE細胞、A2780-CP細胞、HK-2 [Human kidney]細胞
CCF-STTG1細胞系相關產(chǎn)品：MT-2J細胞、ME 180細胞、NCI-H1184細胞
WI-38細胞系相關產(chǎn)品：RD細胞、LMTK-細胞、OCI-AML3細胞
Hs-578Bst細胞系相關產(chǎn)品：MN 60細胞、P3-Jiyoye細胞、UMR-106細胞
Pt K1 (NBL-3)細胞系相關產(chǎn)品：Jurkat 77細胞、Hs-281-T細胞、Huh-7.5.1細胞
HUC-1細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H187細胞、Astrocyte type I clone細胞、TE-12細胞
YD-15細胞系相關產(chǎn)品：Ketr3細胞、NSC34細胞、Panc-10.05細胞
IFRS1細胞系相關產(chǎn)品：SNU-423細胞、GM06141細胞、TE13細胞
NCI-H250細胞系相關產(chǎn)品：H-295細胞、H1341細胞、NCI-H226細胞
RCC23細胞系相關產(chǎn)品：L 929細胞、BHK-21細胞、HCC-1438細胞
NCIH1838細胞系相關產(chǎn)品：High Five細胞、A-20細胞、RMS 1598細胞
GM07404A細胞系相關產(chǎn)品：SNU407細胞、HTori-3細胞、CTLL(2)細胞
NCI-H676細胞系相關產(chǎn)品：SKN-SH細胞、JEKO細胞、RMG-1細胞
RTE細胞系相關產(chǎn)品：ECC-1細胞、HLE-B3細胞、HCC2218細胞
HCE-2 [50.B1]細胞系相關產(chǎn)品：G-401細胞、HRA-19細胞、NCIH378細胞
PG-4細胞系相關產(chǎn)品：SuDHL 5細胞、786-O細胞、Karpas299細胞
GA-10-Clone-4細胞系相關產(chǎn)品：MGH-U3細胞、NCIH2135細胞、SKLMS-1細胞
BJ1細胞系相關產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞、T241細胞、NCI-H510A細胞
SNU1細胞系相關產(chǎn)品：K-1735細胞、SNU449細胞、MM-1S細胞
SNU1細胞系相關產(chǎn)品：K-1735細胞、SNU449細胞、MM-1S細胞
KM H-2細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1838細胞、Kit 225細胞、AZ521細胞
RS4;11細胞系相關產(chǎn)品：KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
細胞、Colo741細胞、D10G41細胞
UCLA NPA871細胞系相關產(chǎn)品：MADB106細胞、A2780 CP70細胞、MDAMB361細胞
HPMEC細胞系相關產(chǎn)品：Hela-mock細胞、GEO細胞、FAK+/+細胞
A-431 Thawing人皮膚鱗癌細胞系
Jurkat細胞系相關產(chǎn)品：Pt-K1細胞、ACC2細胞、mRMEC細胞
CAL 51細胞系相關產(chǎn)品：Bac 1.2F5細胞、Hs27細胞、L540細胞
Hs-746T細胞系相關產(chǎn)品：NOZAWA細胞、CCRF/CEM-C7細胞、EAhy926細胞
C3H10T1/2細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1573細胞、PCI-04B細胞、HCEpiC細胞
SK-ChA1細胞系相關產(chǎn)品：Sc-1細胞、BetaTC6細胞、SCaBER細胞
MSTO-211H細胞系相關產(chǎn)品：H-748細胞、Bx-PC3細胞、ECGI10細胞
Line 697細胞系相關產(chǎn)品：HUT 226細胞、L-cells細胞、HeLa-S3細胞
Cloudman M3細胞系相關產(chǎn)品：Dami細胞、Hs600T細胞、H1650細胞
KBM-7/Hap8細胞系相關產(chǎn)品：HEP3B2細胞、GCT0404細胞、4T1-A細胞
U251細胞系相關產(chǎn)品：Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞、H-2444細胞、B16-F10-BL6細胞
HCC2157細胞系相關產(chǎn)品：IMR-32細胞、Panc10.05細胞、OV433細胞
RCF細胞系相關產(chǎn)品：HA細胞、Malme-3 M細胞、MRASMC細胞
CNE1-LUC細胞系相關產(chǎn)品：TE3A細胞、C643細胞、H-889細胞
NCIH2110細胞系相關產(chǎn)品：CL1.0細胞、SK-N-BE(1)細胞、LA 4細胞
CC-LP-I細胞系相關產(chǎn)品：MES-SA Dx5細胞、NCIH2052細胞、OVHM細胞
Granta519細胞系相關產(chǎn)品：TE15細胞、Balb/c 3T3細胞、Ishikawa細胞
MC/9細胞系相關產(chǎn)品：A7r5細胞、H-1355細胞、CMEC/D3細胞
TJ905細胞系相關產(chǎn)品：CCC-HEL-1細胞、SNU-407細胞、Pa017C細胞
C1498細胞系相關產(chǎn)品：EB-3細胞、BJA-B1細胞、Mono Mac 1細胞
HAEC細胞系相關產(chǎn)品：Baby Hamster Kidney 21細胞、A-72細胞、DU4475細胞
TALL1細胞系相關產(chǎn)品：VERO76細胞、293-H細胞、SHZ-88細胞
RCF細胞系相關產(chǎn)品：HA細胞、Malme-3 M細胞、MRASMC細胞
Line 697細胞系相關產(chǎn)品：HUT 226細胞、L-cells細胞、HeLa-S3細胞
Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞系相關產(chǎn)品：PCI-4B細胞、KATO III細胞、GFP-Olig2細胞
Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞系相關產(chǎn)品：Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞、201T細胞、Hs695T細胞
CCC-HEH-2細胞系相關產(chǎn)品：SK-GT-4細胞、Tn5 B1-4細胞、MESSADX5細胞
Dami細胞系相關產(chǎn)品：H-1954細胞、SK-NMC細胞、U-138MG細胞
HPAF-II細胞系相關產(chǎn)品：Reh細胞、DMS114細胞、A375-SM細胞
DHL10細胞系相關產(chǎn)品：H1793細胞、TB-1 Lu細胞、32D CL3細胞
JeKo-1細胞系相關產(chǎn)品：UM2細胞、BCP-1細胞、H1734細胞
Rat Skin 1細胞系相關產(chǎn)品：UCLA SO M21細胞、B16BL-6細胞、CAL39細胞
ME16C細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H250細胞、Hs-611-T細胞、3T3J2細胞
RC-2細胞系相關產(chǎn)品：HR-1細胞、HPDE細胞、OKT3細胞
A-431 Thawing人皮膚鱗癌細胞系
2T細胞系相關產(chǎn)品：HEK-293A細胞、rUCMSCs細胞、NCM460細胞
LTEP-a2細胞系相關產(chǎn)品：S37細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細胞、WRL68細胞
JC細胞系相關產(chǎn)品：NCI H157細胞、THEECs細胞、MDCKII-WT細胞
COLO 680N細胞系相關產(chǎn)品：SVG(P12)細胞、J45.01細胞、5637細胞
HCEC細胞系相關產(chǎn)品：HARAB細胞、VSC4.1細胞、B104 [Rat neuroblastoma]細胞
HOP92細胞系相關產(chǎn)品：MCF.7細胞、OCI-Ly03細胞、KYSE-270細胞
Madin-Darby Bovine Kidney細胞系相關產(chǎn)品：C3H/10T1/2細胞、WM 239-A細胞、U-266 AR1細胞
SK-N-MC細胞系相關產(chǎn)品：Panc-02細胞、TE354T細胞、MDA-MB231細胞
H-2029細胞系相關產(chǎn)品：NCTC-929細胞、UM-UC3細胞、SK MES 1細胞
ECC-10細胞系相關產(chǎn)品：LICR-LON-HN6-R細胞、Z138細胞、MDA-MB436細胞
Becker細胞系相關產(chǎn)品：WI38細胞、L cell line細胞、PCI:SG231細胞
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