"A-431 epithelioid cells人皮膚鱗癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：該細(xì)胞源自一位患有皮膚鱗狀細(xì)胞癌的８５歲女性，是GiardDJ等人建立的一系列細(xì)胞株中的一株。該細(xì)胞在免疫抑制小鼠體內(nèi)可成瘤，在瓊脂上培養(yǎng)可形成克隆；是一個超三倍體人細(xì)胞株。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細(xì)胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細(xì)胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細(xì)胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細(xì)胞濃度過低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細(xì)胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
HDSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEPsm細(xì)胞、MHH-CALL-2細(xì)胞、Kit 225-K6細(xì)胞
PANC 327細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HepG2/C3A細(xì)胞、PC-3M IE8細(xì)胞、2E8細(xì)胞
U373細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ASPC1細(xì)胞、BIC1細(xì)胞、Y-79細(xì)胞
細(xì)胞生長：貼壁
A-431 epithelioid cells人皮膚鱗癌細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前，細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細(xì)胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細(xì)胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細(xì)胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存：計數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細(xì)胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存：使用分離試劑從基層分離細(xì)胞，分離時盡可能溫和，使對細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細(xì)胞，確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細(xì)胞/ml密度，在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
L132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 579細(xì)胞、UCLA SO M14細(xì)胞、SK-LMS-1細(xì)胞
PC-3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Murine Lung Epithelial-12細(xì)胞、NCIH128細(xì)胞、8226/S細(xì)胞
SO-RB50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U118-MG細(xì)胞、NP69SV40T細(xì)胞、H-660細(xì)胞
SUM 159細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C8-D1A細(xì)胞、IALM細(xì)胞、NCI-H2066細(xì)胞
BXPC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARPE-19細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細(xì)胞、H-7721細(xì)胞
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
A-431 epithelioid cells人皮膚鱗癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮樣
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細(xì)胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細(xì)胞的實驗穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開的時候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
NCI-H1404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：THP-1細(xì)胞、159PT細(xì)胞、XWLC-05細(xì)胞
H-441細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：769-P細(xì)胞、OVCAR 5細(xì)胞、SUM-190PT細(xì)胞
Colo699細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2330細(xì)胞、H-661細(xì)胞、HCT116/L細(xì)胞
H-250細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H520細(xì)胞、Functional Liver Cell-7細(xì)胞、OUMS-27細(xì)胞
HemECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Beta-TC-6細(xì)胞、H-1184細(xì)胞、COS-7細(xì)胞
BI-Mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KHYG-1細(xì)胞、SkChA1細(xì)胞、SW.620細(xì)胞
NCI-747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos-2G6-4C10細(xì)胞、CHG5細(xì)胞、FRO81-2細(xì)胞
HRGEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-18細(xì)胞、HTR8svn細(xì)胞、RERF-LCMS細(xì)胞
DMS-53細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPDEC細(xì)胞、Hs 695.T細(xì)胞、HL-7702細(xì)胞
CW-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2066細(xì)胞、C-4 I細(xì)胞、Rat Chondrosarcoma Swarm細(xì)胞
A-431 epithelioid cells人皮膚鱗癌細(xì)胞系
Human fetal lung fibroblast 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI AML3細(xì)胞、LC-1 sq細(xì)胞、WM239細(xì)胞
MF2059細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM266mel細(xì)胞、HBL 100細(xì)胞、SU.86細(xì)胞
A1847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H345細(xì)胞、NCI-H647細(xì)胞、P-2003細(xì)胞
CT-26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Immortal Pig Intestinal-2I細(xì)胞、Hs-606-T細(xì)胞、A2780/Taxol細(xì)胞
MM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit225細(xì)胞、Rabbit Kidney 13細(xì)胞、C3A細(xì)胞
Immortal Pig Intestinal-2I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO Lec1細(xì)胞、LM TK negative細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-27細(xì)胞
Immortal Pig Intestinal-2I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO Lec1細(xì)胞、LM TK negative細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-27細(xì)胞
KATOIII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-841細(xì)胞、Z310細(xì)胞、NIH:OVCAR-4細(xì)胞
GM04678細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P388細(xì)胞、L cells (TK-)細(xì)胞、GCT細(xì)胞
L(TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC57G細(xì)胞、SUNE-1細(xì)胞、RKO-AS-45-1細(xì)胞
Rat Lung-65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-07e細(xì)胞、OCI Ly3細(xì)胞、Mv.1.Lu細(xì)胞
NCIH1755細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FET細(xì)胞、RGM-1細(xì)胞、MILE SVEN1細(xì)胞
AR4IP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D341 Med細(xì)胞、IEC 6細(xì)胞、SUDHL-16細(xì)胞
Hs-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE2細(xì)胞、NTERA2-D1細(xì)胞、SNU5細(xì)胞
SHEP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC-39細(xì)胞、Panc-08.13細(xì)胞、Hs940T細(xì)胞
HEC251細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL1-0細(xì)胞、IHH4細(xì)胞、MDA453細(xì)胞
Detroit 562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL6細(xì)胞、PaTu 8988s細(xì)胞、Hs746T細(xì)胞
GES-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCET細(xì)胞、PC-14細(xì)胞、GI-1細(xì)胞
HOCF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Psi2-DAP細(xì)胞、RPMI1788細(xì)胞、Clone Y1細(xì)胞
NCIH1755細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FET細(xì)胞、RGM-1細(xì)胞、MILE SVEN1細(xì)胞
HD-LM-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EOC 20細(xì)胞、GM04679細(xì)胞、FU-MMT-1細(xì)胞
OCI/AML-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC94細(xì)胞、SKNFI細(xì)胞、HC11細(xì)胞
EA. hy 926細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM190PT細(xì)胞、THLE-2細(xì)胞、AU 565細(xì)胞
L-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L02細(xì)胞、ATN-1細(xì)胞、HOS-143B細(xì)胞
SKML-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT26.CL25細(xì)胞、TE32細(xì)胞、PG13細(xì)胞
870細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1650細(xì)胞、BTI-Tn5B14細(xì)胞、EFO 27細(xì)胞
NCI-H87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：7404細(xì)胞、RH-35細(xì)胞、COLO824細(xì)胞
Kuramochi細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML-4細(xì)胞、OP9細(xì)胞、SNU-C1細(xì)胞
P-36細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT_116細(xì)胞、Chinese Hamster Ovary細(xì)胞、VM-CUB-1細(xì)胞
NCI-H1944細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL2H3細(xì)胞、RA細(xì)胞、NCI-H596細(xì)胞
Ku812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VK-2/E6E7細(xì)胞、HTh 74細(xì)胞、EFM192細(xì)胞
293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WC00044細(xì)胞、A-2058細(xì)胞、4175細(xì)胞
CEMC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DK-MG細(xì)胞、H9c2 (2-1)細(xì)胞、MDCK.2細(xì)胞
HCM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-AD293細(xì)胞、AG 9細(xì)胞、WIL2-S細(xì)胞
HL-60 Clone 15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HHUA細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 7666細(xì)胞、TE-6細(xì)胞
HCT/FU細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 27細(xì)胞、Panc-1-P細(xì)胞、HUVSMC細(xì)胞
IM-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW948細(xì)胞、CPA47細(xì)胞、NCL-H548細(xì)胞
UC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCFB（HCF）細(xì)胞、NCIH650細(xì)胞、DH-82細(xì)胞
Hep 3B2.1-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB134細(xì)胞、LAPC4細(xì)胞、BT-325細(xì)胞
Hs 683.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TPC1細(xì)胞、RPTC細(xì)胞、HS5細(xì)胞
AMC-HN-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL7405細(xì)胞、HMSC細(xì)胞、SKMES-1細(xì)胞
HCT FET細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBLAN5T細(xì)胞、MDCK supertube細(xì)胞、HO1-N-1細(xì)胞
IEC 18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H865細(xì)胞、alpha-TC1-6細(xì)胞、CL-40細(xì)胞
U-CH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL33細(xì)胞、Rin-M-5F細(xì)胞、CT26WT細(xì)胞
NCI-H2106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Institute for Medical Research-32細(xì)胞、SK-OV-433細(xì)胞、VMM-5A細(xì)胞
HIEC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JeKo-1細(xì)胞、Ramos-RA1細(xì)胞、LNCaP FGC細(xì)胞
Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-5細(xì)胞、A-101D細(xì)胞、FCCH1018細(xì)胞
LTEP-sm細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H146細(xì)胞、293/EBNA細(xì)胞、HFL-I細(xì)胞
HIEC-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM04679細(xì)胞、SW1573細(xì)胞、RPMI2650細(xì)胞
MN-9D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mono Mac6細(xì)胞、BT549細(xì)胞、H-2405細(xì)胞
Murine Carcinoma-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-739細(xì)胞、95-D細(xì)胞、87MG細(xì)胞
A-431 epithelioid cells人皮膚鱗癌細(xì)胞系
HNE2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKN-AS細(xì)胞、Panc-05.04細(xì)胞、HPAEC細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-12T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA MB 134VI細(xì)胞、293細(xì)胞、N-Tera-2細(xì)胞
PLA801-95D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJSA細(xì)胞、Wien 133細(xì)胞、SCC 9細(xì)胞
Colo699細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2330細(xì)胞、HBZY 1細(xì)胞、B16F0細(xì)胞
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