"HCCC-9810 Thawing人膽管細胞型肝癌細胞系
細胞背景資料：HCCC-９８１０細胞株源自一位女性肝膽管細胞癌患者。 HCCC-９８１０細胞呈上皮細胞樣，染色體模式數(shù)為７１，但染色體數(shù)目可以在２２-１１７的范圍內(nèi)變動。倍增時間為２０.４小時。 AFP，CEA和CA１９-９的分泌水平低，在裸鼠中的成瘤率為２０%。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
HCCC-9810 Thawing人膽管細胞型肝癌細胞系
細胞生長：貼壁
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗。【操作步驟】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握好細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導致細胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當消化液濃度過高時，消化時間應縮短，過低時細胞消化時間相對延長。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HCCC-9810 Thawing人膽管細胞型肝癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
很多朋友討論細胞培養(yǎng)問題，見到很多很好的經(jīng)驗總結(jié)，這里說一些我個人的經(jīng)驗，因為一些比較特殊的原因，我自己培養(yǎng)接觸過近３００種細胞，常用于做實驗的，累積有百余種，可以說遇到過許多各式各樣古怪的細胞。這里挑細胞消化開始做我的篇專題，并不是因為細胞消化最重要，而是近期看到大家頻繁討論這個話題，我就拋磚引玉，下面幾點拙見，可能與其它朋友總結(jié)的一些經(jīng)驗有點出入，僅供大家參考。許多同學對細胞消化做了許多研究，得出了很多有價值的經(jīng)驗，也見到很多人的困惑。其實細胞培養(yǎng)，尤其是細胞系的培養(yǎng)，就消化而言，不是太難，做得多了，善于總結(jié)經(jīng)驗，就能把細胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟，細節(jié)操作，我這里就不講了，只講一些基本操作背后的知識，如果不對之處，歡迎指正，總結(jié)下來，細胞培養(yǎng)中消化很重要，但其實消化并不是細胞培養(yǎng)的關(guān)鍵所在(雖然很重要)，關(guān)鍵所在是細胞來源，血清質(zhì)量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細胞遇到各種各樣的問題，很多時候bottleneck沒有找到，雖然通過其它方法有所改善，但仍然是事倍功半。因為人們往往注意自己的操作，總覺得自己沒有經(jīng)驗，而忽視試劑，溶液尤其是細胞的質(zhì)量，后者其實才是許多細胞培養(yǎng)實驗室常見的問題。
細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣
Sp2/0-Ag-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1404細胞、SW 1463細胞、MCAEC細胞
GM03571細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fetal Rhesus Kidney-4細胞、HCC-1395細胞、SU86.86細胞
MKN1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK2細胞、KLN-205細胞、Ly3細胞
Y3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCCLM3細胞、DiFi細胞、DHL8細胞
HSC-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H69細胞、Co 205細胞、HKC細胞
LL/2 (LLC1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa229細胞、ROS 17/2.8細胞、LAN6細胞
SK Mel 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR 5細胞、MUG-Chor1細胞、SW-579細胞
RCC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM933細胞、NCI-SNU-423細胞、HEK 293-F細胞
DrG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1373細胞、OAW42細胞、JB6 clone 30, subclone 7b細胞
BNCL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI 2細胞、QGY-7701細胞、A72細胞
H-2029細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC-929細胞、UM-UC3細胞、SK MES 1細胞
HCoEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P36細胞、C8D1A細胞、HONE-1細胞
PK(15)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW403細胞、T/G HA-VSMC細胞、BGC823細胞
Wien133細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL-CL-11細胞、BALL1細胞、LTEP-a2細胞
SJCRH30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SBC-3細胞、SKNEP-1細胞、TM3細胞
DHL-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MyLa2059細胞、H1869細胞、MDA231-LM2-4175細胞
NTC-200細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-05.04細胞、MDAMB-231細胞、K7M2 wt細胞
NFS60細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT-125細胞、PLC PRF 5細胞、P1-Raji細胞
HBE 135-E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SaOS細胞、HPAEpiC細胞、Clone 929細胞
NCI H716細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly10細胞、NW-38細胞、SW 1990細胞
NCI-UMC-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-115細胞、H1623細胞、NK-92 MI細胞
TE-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GOS-3細胞、Hs 675.T細胞、SNT-8細胞
F56 [Human neoplasm]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL-11細胞、PANC-02-03細胞、TE-85 clone 5細胞
CEMx721.174.T2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tn5B1-4細胞、TE-13細胞、2BS細胞
HFL 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIA Paca2細胞、Panc 04.03細胞、HCC-1937細胞
SN12PM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO679細胞、HeLa細胞、KYSE180細胞
HCCC-9810 Thawing人膽管細胞型肝癌細胞系
OACP4C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、EOC 20細胞、NB-4細胞
NCI-SNU-C2A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU 86.86細胞、TE4細胞、TE4細胞
KP-N-NS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV 1細胞、NTERA-2cl.D1細胞、OVCAR420細胞
RPMI-1788細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1693細胞、LK2細胞、SCC-1395細胞
A101D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-C2B細胞、NCI-A549細胞、B6Tert-1細胞
PT67細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CWR22Rv1細胞、OCILY3細胞、CCD841CoN細胞
H-1238細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARH77細胞、Anip[973]細胞、THLE-3細胞
RMS 1598細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC 61.5.3細胞、JJN-3細胞、NCIH1693細胞
MGSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM 115細胞、Hs675細胞、16HBE14o-細胞
TE 32.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF 767細胞、WEHI-3B細胞、C1498細胞
LICR-LON-HN6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NW-38細胞、HOP-62細胞、H2023細胞
NTera2 cl.D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PaTu8988s細胞、253J B-V細胞、CoC1細胞
H2126細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMC-HN-8細胞、NCI-HUT-520細胞、K562/ADP細胞
HEC251細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL1-0細胞、IHH4細胞、MDA453細胞
BT 325細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCaP-37細胞、KNS-62細胞、DU-4475細胞
VCaP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs274T細胞、LNCaP-C4-2細胞、SKOV-3細胞
174xCEM.T2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H446細胞、GA10細胞、H-460細胞
CCRFCEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM-1S細胞、SR786細胞、HTori:3細胞
JCA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTC-200細胞、H-1975細胞、Fox/NY細胞
BSC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Granta-519細胞、SNU-119細胞、H69/P細胞
MCA38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-hth74細胞、DMS 273細胞、P3/NSI/1-AG4-1細胞
HR-8348細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV(4;11)細胞、NCI-H441細胞、PLC/PRF5細胞
R2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3-Ag1,2,3細胞、SW-620細胞、HOP-92細胞
H1385細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM.1S細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞、HeLa229細胞
CHO-Lec1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1963細胞、H4-II-EC3細胞、A2780CP細胞
Hce8693細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI-SCC-154細胞、ME-1 [Human leukemia]細胞、CMT-167細胞
HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI8402細胞、NIH3T3細胞、C 643細胞
AU565細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BV2細胞、COLO-741細胞、RL-952細胞
SKMES細胞系相關(guān)產(chǎn)品：THLE2細胞、HcerEpic細胞、hFOB1.19細胞
MDCK-II細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-Lu-65細胞、MN-60細胞、HCC94細胞
ML-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAMA細胞、H2452細胞、NCIH508細胞
SKNBE(2c)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Melan-a細胞、HCA 7細胞、NCI-H522細胞
AtT-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1436細胞、HConEpic細胞、A-253細胞
HCCC-9810 Thawing人膽管細胞型肝癌細胞系
HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QSG7701細胞、HOP62細胞、THPI細胞
Douglas Foster-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2227細胞、APRE-19細胞、NIH:OVCAR-3細胞
LS-411細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1693細胞、MC3T3-E1 Subclone 14細胞、OVCA433_Bast細胞
H226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1882細胞、SK N SH細胞、CEM.C1細胞
SK-MES細胞系相關(guān)產(chǎn)品：624-mel細胞、BBE細胞、MPP 89細胞
CAMA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Microglia Clone 3細胞、PC3M-IE8細胞、WERI細胞
H-508細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLCPK1細胞、NCIH727細胞、University of Arizona Cell Culture-812細胞
DMS153細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL-9細胞、NCI-H1819細胞、SK-Mel1細胞
Sci-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Anip-973細胞、EC-9706細胞、ECC 10細胞
SCC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1048細胞、TE7細胞、SUM-149PT細胞
C-4-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan2細胞、beta-TC6細胞、Jijoye細胞
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