"HCCC-9810 Cell:人膽管細(xì)胞型肝癌細(xì)胞系 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 細(xì)胞背景資料:HCCC-9810細(xì)胞株源自一位女性肝膽管細(xì)胞癌患者。 HCCC-9810細(xì)胞呈上皮細(xì)胞樣,染色體模式數(shù)為71,但染色體數(shù)目可以在22-117的范圍內(nèi)變動(dòng)。倍增時(shí)間為20.4小時(shí)。 AFP,CEA和CA19-9的分泌水平低,在裸鼠中的成瘤率為20%。 130T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 132細(xì)胞、HuPT4細(xì)胞、F81細(xì)胞 LC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1836細(xì)胞、JB6 clone 30, subclone 7b細(xì)胞、CO115細(xì)胞 NCTC 3960細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-157細(xì)胞、HOS/MNNG細(xì)胞、JAR細(xì)胞 HSC 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P1-Raji細(xì)胞、YES2細(xì)胞、SNU368細(xì)胞 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 HCCC-9810 Cell:人膽管細(xì)胞型肝癌細(xì)胞系 細(xì)胞凍存基本方法:1.細(xì)胞:選對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞,收集細(xì)胞24小時(shí)前換液一次。2.計(jì)數(shù):按常規(guī)方法把細(xì)胞制成細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù),令細(xì)胞密度達(dá)5×10(6)/ml,離心去上清,吸入離心管中。3.凍存液:先用培養(yǎng)液9分+DMSO 1分(或甘油)配成10%的DMSO凍存液,按上法一滴滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細(xì)胞重懸。4.分裝:分裝入無菌安剖中,每安剖加1.5毫升細(xì)胞懸液。5.封口:用塑料安剖時(shí)擰緊瓶口即可;如用火焰封閉安剖口后,仔細(xì)檢查,定要封嚴(yán),必要時(shí)可浸入藍(lán)色液中觀察,為安全起見,把安剖縫入紗布小袋中,以防液氮浸入后,融解時(shí)因受熱發(fā)生爆炸傷人;紗袋一端系以線繩,末端扎有小牌,注明:細(xì)胞名稱,凍存日期,以便日后查找。細(xì)胞株(系)的使用,為醫(yī)學(xué)研究和測(cè)試工作帶來了極大的方便。但細(xì)胞的傳代是有限制的,長(zhǎng)期連續(xù)傳代的細(xì)胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細(xì)胞的生長(zhǎng)與形態(tài)等會(huì)有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細(xì)胞失去原有的遺傳特性,有時(shí)還會(huì)由于細(xì)胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實(shí)際工作中常需凍存一定數(shù)量的細(xì)胞,以備替換使用。細(xì)胞冷凍與復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞傳代方法:1:2傳代 細(xì)胞凍存的步驟:1)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來選擇;3)將分裝上述細(xì)胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況,然后再繼續(xù)凍存。 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 HCO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU368細(xì)胞、Wien 133細(xì)胞、SJSA-1細(xì)胞 HuT102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA-801D細(xì)胞、RPMI-8226細(xì)胞、NCl-H157細(xì)胞 SK-RC-52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SC細(xì)胞、H4IIE細(xì)胞、HT 1080.T細(xì)胞 DU-4475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1359細(xì)胞、CCD 841 CoTr細(xì)胞、HSKMC細(xì)胞 JURKAT E-6.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEL細(xì)胞、NCIH647細(xì)胞、Balb/c3T3細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng) HCCC-9810 Cell:人膽管細(xì)胞型肝癌細(xì)胞系 細(xì)胞傳代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn):體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞或細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞,并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營(yíng)養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細(xì)胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進(jìn)行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細(xì)胞“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中,細(xì)胞培增3~6次。細(xì)胞傳代后,一般經(jīng)過三個(gè)階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度,即細(xì)胞群的分裂相數(shù)/100個(gè)細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細(xì)胞可達(dá)3~5%;細(xì)胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時(shí)期,稱指數(shù)增生期(對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期),適宜進(jìn)行各種試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)步驟:1.將長(zhǎng)成的培養(yǎng)細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺(tái)中倒掉瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細(xì)胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細(xì)胞,如果細(xì)胞變圓,相互之間不再連接成片,這時(shí)應(yīng)立即在超凈臺(tái)中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細(xì)胞懸液。3.將細(xì)胞懸液吸出2ml左右,加到另一個(gè)培養(yǎng)瓶中并向每個(gè)瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細(xì)胞在2小時(shí)左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶?jī)?nèi)形成單層,需要再次進(jìn)行傳代。 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞樣 C4I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:V 79-4細(xì)胞、SL-1細(xì)胞、MUM2B細(xì)胞 LNCaP-ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLA 144細(xì)胞、Japanese Tissue Culture-28細(xì)胞、P3HRI細(xì)胞 MDA361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0038細(xì)胞、RCC 786-O細(xì)胞、QG56細(xì)胞 HuLEC-5a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AG06814-M細(xì)胞、OCI-AML-5細(xì)胞、NBLAN5T細(xì)胞 PTK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JIII細(xì)胞、OVCAR3細(xì)胞、MDA-MB-435 S細(xì)胞 HeLaS3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-N-RT-BM細(xì)胞、HCC0202細(xì)胞、AC29細(xì)胞 MEL-526細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tj-905細(xì)胞、HEK 293-H細(xì)胞、WILL2細(xì)胞 HCCC-9810 Cell:人膽管細(xì)胞型肝癌細(xì)胞系 HUT-125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL-92_1_7細(xì)胞、hTERT-RPE-1細(xì)胞、VeroE6細(xì)胞 HS-68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1438細(xì)胞、CCD-112 CoN細(xì)胞、ChaGo-K-1細(xì)胞 HMEC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP-sm 1細(xì)胞、PCI-4B細(xì)胞、MDA-MB-134 VI細(xì)胞 CT26-clone 25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRCV細(xì)胞、Hce8693細(xì)胞、SF 539細(xì)胞 HCC4006細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KAT-5細(xì)胞、HCC-94細(xì)胞、H-1184細(xì)胞 IOSE 80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2330細(xì)胞、NALM-6細(xì)胞、FHC細(xì)胞 U-251_MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKGT4細(xì)胞、MDA-MB-134VI細(xì)胞、A673細(xì)胞 KOSC-2 cl3-43細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calu6細(xì)胞、MDCC-MSB1細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細(xì)胞 TALL 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Michigan Cancer Foundation-12F細(xì)胞、SW837細(xì)胞、MPC-5細(xì)胞 TALL 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Michigan Cancer Foundation-12F細(xì)胞、SW837細(xì)胞、MPC-5細(xì)胞 HCC-1954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMECs細(xì)胞、P3-X63Ag8細(xì)胞、EST50細(xì)胞 C3H10T1/2 clone8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COS-1細(xì)胞、MCF10A細(xì)胞、NCIH322細(xì)胞 SW 839細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EL 4細(xì)胞、TT細(xì)胞、FU-97細(xì)胞 Rainbow Trout Embryo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SupB15W細(xì)胞、BOWES細(xì)胞、TOG細(xì)胞 L-1210細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cattle chondrocytes細(xì)胞、3T3J2細(xì)胞、MJ細(xì)胞 CMECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1573細(xì)胞、JHH2細(xì)胞、mREC細(xì)胞 Panc 08.13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AZ 521細(xì)胞、HKF細(xì)胞、HSAS1細(xì)胞 Hs819.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKO-007細(xì)胞、H-524細(xì)胞、NCIH2073細(xì)胞 P3 NS1 Ag4/1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OLN93細(xì)胞、Panc 2.03細(xì)胞、H-740細(xì)胞 SW-1783細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRhK4細(xì)胞、CHOK1細(xì)胞、U14細(xì)胞 CAL 33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO1-N1細(xì)胞、HOP 92細(xì)胞、KM932細(xì)胞 M109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JAR細(xì)胞、RGC5細(xì)胞、Hs895.T細(xì)胞 H838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:E.G7-OVA細(xì)胞、Hs 600.T細(xì)胞、AML-2細(xì)胞 CAL 62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTC200細(xì)胞、TB1 Lu細(xì)胞、SP2-0-Ag14細(xì)胞 AgC11x3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cloudman M3細(xì)胞、SUM 102細(xì)胞、NTera 2/cl.D1細(xì)胞 Tb1Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J-774細(xì)胞、SUM-52細(xì)胞、BE(2)C細(xì)胞 HSC-T6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs742T細(xì)胞、MM6細(xì)胞、HOC-1細(xì)胞 SUDHL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-119細(xì)胞、JIMT-1細(xì)胞、COS1細(xì)胞 Hs 819.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPVECs細(xì)胞、NU-GC-3細(xì)胞、M3 Clone M-3細(xì)胞 Tn5 B1-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL51細(xì)胞、UCLA-RO 81細(xì)胞、B-3細(xì)胞 MEF (CF-1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPDE6c7細(xì)胞、RMG-I細(xì)胞、1301細(xì)胞 CAL 39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM1S細(xì)胞、NCI-H1522細(xì)胞、MMAc.SF細(xì)胞 CCD 1112SK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-432細(xì)胞、OV1-P細(xì)胞、H-1650細(xì)胞 SCC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1048細(xì)胞、TE7細(xì)胞、SUM-149PT細(xì)胞 HCV-29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:E.L.4細(xì)胞、NCI-H-295細(xì)胞、Hmy.2 CIR細(xì)胞 UCH-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC10RGB細(xì)胞、LA-N-5細(xì)胞、H1944細(xì)胞 NCM460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Metastatic Variant 522細(xì)胞、Panc-02細(xì)胞、NCI-H774細(xì)胞 HAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Baby Hamster Kidney 21細(xì)胞、A-72細(xì)胞、DU4475細(xì)胞 HPAF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 729細(xì)胞、SKMEL-24細(xì)胞、SNK1細(xì)胞 WPE-int細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-2108細(xì)胞、DMS-53細(xì)胞、BIC細(xì)胞 SUM149細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KBM7細(xì)胞、PA317細(xì)胞、SP-2/0-AG14細(xì)胞 GM05887細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL.2H3細(xì)胞、H-209細(xì)胞、ZR75_1細(xì)胞 HBVP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1793細(xì)胞、Panc-8_13細(xì)胞、Reuber H35細(xì)胞 HCCC-9810 Cell:人膽管細(xì)胞型肝癌細(xì)胞系 Kit225/K6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J111細(xì)胞、GM00215細(xì)胞、OCI-AML4細(xì)胞 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