"RKO Thawing人結(jié)腸癌細胞系
細胞背景資料：RKO是一個低分化的結(jié)腸癌細胞系。RKO細胞含有野生型P５３，但缺乏人甲狀腺受體核受體(h-TRbeta１)。RKO細胞的P５３蛋白的水平高于RKO-E６細胞。RKO細胞系是RKO-E６和RKO-AS４５-１的親本細胞系。該細胞系在裸鼠中成瘤，且在軟瓊脂中形成集落。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
RKO Thawing人結(jié)腸癌細胞系
細胞生長：貼壁
養(yǎng)了幾年細胞，說一點自己培養(yǎng)細胞方面的看法：１)培養(yǎng)細胞前，可以看看細胞特點說明書，包括細胞正常生長的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等；２)不同細胞生長周期不同，有的生長很快，比如說MDA-MB-２３１，傳代的時候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了，有的又是特別慢，等的人心焦，BT４７４就是，傳代是一分二，復蘇起始的時候兩周多才能長滿，所以就要在培養(yǎng)細胞的過程中多多摸索了；３)對于嬌弱的細胞，就得細心呵護了，胰酶消化不能過久，吹得時候要輕柔，離心時候也要注意轉(zhuǎn)速和時間，每天都要去看一下細胞，肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細胞生長狀況；４)凍存細胞復蘇后第二天更換一次培養(yǎng)基；５)培養(yǎng)箱隔一段時間徹底用酒精棉擦洗一次；６)養(yǎng)細胞的教訓：不能偷懶!細胞虐我千百遍，我待細胞如初戀。１)不管買的細胞、惠贈的細胞，剛拿到手趕緊做兩件事：檢測是否有支原體污染; 迅速擴增凍存；２)發(fā)現(xiàn)有污染迅速處理掉，特別是當你養(yǎng)了很多種細胞時; 細菌污染，真菌污染很容易發(fā)現(xiàn)，支原體污染的話，細胞會長的慢，買個支原體檢測的kit定期檢測一下；３)傳代細胞日常的值日清潔是必須的，此外還要定期熏蒸；４)細胞的傳代一定要規(guī)律，保持相同的confluency和傳代時間間隔，不要隨心所欲或者拖延；５)注意個人衛(wèi)生。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：消化３-５分鐘。１：２。３天內(nèi)可長滿。
傳代的操作步驟注意事項：1)操作前要洗手，進入超凈臺后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點燃酒精燈，操作在火焰附近進行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時間不能太長，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。3)操作動作要準確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動，增加污染機會。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細胞傳代的操作步驟：1)吸除培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許，以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘，當發(fā)現(xiàn)細胞質(zhì)回縮，細胞間隙增大后，立即終止消化。4)吸除消化液，向瓶內(nèi)注入Hanks液數(shù)毫升，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細胞時，動作要輕，以免把已松動的細胞沖掉流失，如用胰蛋白酶液單獨消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液沖洗，直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。6)計數(shù)板計數(shù)后，把細胞懸液分成等份分裝入數(shù)個培養(yǎng)瓶中，置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細胞傳代的操作步驟：1)吸出細胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
RKO Thawing人結(jié)腸癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
有關(guān)實驗室細胞培養(yǎng)基知識普及：經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種，Corning、Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI １６４０、MEM、DMEM/F１２都是應用最廣泛的培養(yǎng)基。其他如M１９９、IMDM、L１５培養(yǎng)基等也用于某些細胞的培養(yǎng)；MEM是由Eagle’s基礎(chǔ)培養(yǎng)基(BME)發(fā)展而來的，其中增加了組分的范圍及濃度；BEM(DMEM)培養(yǎng)基是為小鼠成纖維細胞設計的，現(xiàn)在常用于貼壁細胞的培養(yǎng)。DMEM的基酸濃度是MEM的兩倍，維生素濃度是MEM的４倍，采用雙倍的HCO３-和CO２濃度起到更好的緩沖作用。最初的配方中葡萄糖含量為１０００mg/L，后來為了某些細胞的生長需要，將葡萄糖含量又調(diào)整為４５００mg/L，這就是大家常說的低糖和高糖了；aMEM含有附加的基酸、維生素以及核苷和脂肪酸，它可廣泛應用于各種細胞類型，包括對營養(yǎng)成分要求苛刻的細胞；Ham’s F１２是為在低血清濃度下克隆CHO細胞而設計的，現(xiàn)在也廣泛應用于克隆形成率的分析及原代培養(yǎng)。F１２還可以與DMEM等體積混合使用，得到一種高濃度與成分多樣化相結(jié)合的產(chǎn)物，這種培養(yǎng)基已應用于許多原代培養(yǎng)及更難養(yǎng)的細胞系的培養(yǎng)；RPMI １６４０培養(yǎng)基是專為淋巴細胞培養(yǎng)而設計的，現(xiàn)在已廣泛應用于懸浮細胞的培養(yǎng)。
細胞形態(tài)特性：上皮樣
rHSC-99細胞系相關(guān)產(chǎn)品：624細胞、Onda 11細胞、Panc327細胞
L-929細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN12PM6細胞、HANK-1細胞、Hs.27細胞
CCD-841CoN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPF細胞、Tsup-1細胞、hTERT-RPE細胞
RKO-AS45-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0827細胞、MDA-MB-468-RED細胞、OCI Ly19細胞
HDLM-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC-97細胞、D407細胞、H2106細胞
PA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Becker細胞、NUGC-2細胞、NCIH1819細胞
MCA-205細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293 c18細胞、NCI-SNU-1040細胞、Nb2a細胞
PL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF-CEM細胞、UACC-893細胞、NTera2 cl.D1細胞
Huh 7.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MiaPaCa2細胞、Lewis Lung Cancer細胞、SUM 190細胞
OCI AML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN-45細胞、SUNE1細胞、GM00346B細胞
XWLC-05細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1770細胞、V79-1細胞、Hela-mock細胞
Hs 934.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV4-11細胞、NCIH2030細胞、G 401細胞
MFE296細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL1細胞、CCD-841CoTr細胞、HBL1細胞
OVHM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV-522細胞、NCIH1963細胞、H9c2(2-1)細胞
Human Embryonic Skin細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BeWo細胞、A2008細胞、H1105細胞
MGH-U1 (EJ)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lewis lung carcinoma line 1細胞、NTC-200細胞、P3J-HR-1細胞
SuperTube細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1930細胞、TGW-I-nu細胞、LM6細胞
RKO_AS45細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCL-H548細胞、X63-Ag8.653細胞、Saos2細胞
Human Embryo Kidney-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-251-MG細胞、JROECL 21細胞、C-26細胞
CCC-HSF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：McArdle RH-7777細胞、UMNSAH-DF-1細胞、2780細胞
TR146細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞、T98 G細胞、TF-1細胞
TR146細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞、T98 G細胞、TF-1細胞
P3X63細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM3570細胞、L6565細胞、TE 354.T細胞
4T1.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHG-44細胞、143 B細胞、Colon26細胞
OVCA-420細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN-m5F細胞、Fetal Rhesus Kidney-4細胞、Pa14C細胞
HCC1937細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JROECL 21細胞、SHSY-5Y細胞、DMS53細胞
RKO Thawing人結(jié)腸癌細胞系
NCI-SNU-423細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE2細胞、JKT-1細胞、PMVEC細胞
LUDLU-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOP62細胞、SY5Y細胞、NCIH1734細胞
SK.MEL.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Co 115細胞、HCT.116細胞、PLA801C細胞
MLO-Y4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HELF細胞、Hs 832(C).T細胞、Jiyoye (P-2003)細胞
MGH-U3 (RN)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63Ag8細胞、MCF-10 Attached細胞、BV-173細胞
Ketr-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C42細胞、CCD 966SK細胞、MES-SA/Dx5細胞
SRA 01/04細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HN4細胞、CEM-0細胞、MC38細胞
COLO 320細胞系相關(guān)產(chǎn)品：THLE-2細胞、UM-UC-3細胞、NCI-H1876細胞
LLC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JHH-7細胞、MDA-MB435細胞、JROECL33細胞
M-O7e細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCE-T細胞、EFO27細胞、NCIH548細胞
Hs 636.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFO-27細胞、HCC1428細胞、PAa細胞
LTEP-sm細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H146細胞、293/EBNA細胞、HFL-I細胞
SKNEP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuLEC-5a細胞、KM-12細胞、786-O細胞
Clone 166細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-33Co細胞、COLO 320F細胞、SV40 MES 13細胞
Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H9c2 (2-1)細胞、R1800[RA]細胞、M059K細胞
NCI-H510細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1755細胞、BE(2)M17細胞、BI-Mel細胞
A-375細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H647ell細胞、A.704細胞、Hs683T細胞
aTC1 Clone 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D407 RPE細胞、NCTC 1469細胞、4T1細胞
EBC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 04.03細胞、NK 10a細胞、KNS-62細胞
HT1376細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RH30SJ細胞、RL-65細胞、NK62a細胞
SuDHL 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSKMC細胞、BE2M17細胞、NCIH3255細胞
T-ALL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H716細胞、NCIH2342細胞、ReNcell CX細胞
STO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1092細胞、WEHI3B細胞、H-146細胞
HS 1.Tes細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCFs細胞、NCI-747細胞、NCI-H-69細胞
NCIH1915細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW260細胞、293細胞、MDA 435細胞
NCI-H676細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKN-SH細胞、OCILY-3細胞、BC-027細胞
ME180細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNT1-a細胞、L78細胞、Fetal Human Colon細胞
RCC10 RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1187細胞、HEC-1B細胞、Rat Skin 1細胞
MONO-MAC 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2135細胞、P30/OHK細胞、EOC 20細胞
MDA-MB-436細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF/CEM/0細胞、MRASMC細胞、SCC090細胞
QBI-293A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G401細胞、C33-A細胞、Hs729細胞
Hs294T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAPCa-2b細胞、DanG細胞、J-82細胞
NCI-H1568細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC26細胞、H2030細胞、D-283 Med細胞
RKO Thawing人結(jié)腸癌細胞系
L-5178-Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Clone 929細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞、GM03569D細胞
Hs940.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293 HEK細胞、UMNSAH-DF 1細胞、IGROV細胞
SHSY5Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1666細胞、MEF細胞、FL-83B細胞
BLO 11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L105細胞、HEK-2細胞、MKN28細胞
SKRC 39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JM1細胞、HOCF細胞、NCI H69細胞
MM-1S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C12細胞、Human Embryonic Skin細胞、G 292 Clone A 141B1細胞
TSUpr1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU761細胞、UCLA NPA871細胞、KG1細胞
MonoMac6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS53細胞、SUM190細胞、NCI-H810細胞
BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UO-31細胞、MC-38細胞、NIH:OVCAR-8細胞
T-HEECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QBI-HEK 293A細胞、MV4;11細胞、MDA134細胞
HTR8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JHH2細胞、Farage OL細胞、HDQP1細胞
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