"A2058 Adherent人黑色素瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟：常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時要注意以下幾點：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個月充氮一次。液氮溫度達-１９６℃，使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應(yīng)防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo)，使液氮直達瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉毎麅龃婀?、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
A2058 Adherent人黑色素瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
冷凍細胞解凍程序：依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類，若因?qū)嶒炐枰仨氂兴煌瑫r，務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細胞適應(yīng)后，方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清)，對細胞而言差異極大，請務(wù)必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于３７°C水槽中回溫，回溫后噴以７０%酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管，立即放入３７°C水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在１分鐘內(nèi)全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細胞種類和濃度，于無菌操作臺內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T２５或T７５flask中。取出已解凍之細胞懸浮液，緩緩加入T２５或T７５flask內(nèi)之培養(yǎng)基，混合均勻，放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言，１%以下之冷凍保護劑DMSO，不會對細胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細胞中去除，待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細胞分化之細胞，需立即去除DMSO者，則可將解凍后之細胞懸浮液放入５-１０ml培養(yǎng)基中，離心３００xg(約１０００rpm)，５分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細胞均勻混合后，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中，再放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
LAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC 7901細胞、CFSC-8B細胞、Panc 5.04細胞
AHH-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Be Wo細胞、3T6-Swiss albino細胞、WEHI231細胞
3T3-J2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Potorous tridactylus Kidney 1細胞、C-127細胞、VK2細胞
細胞傳代方法：１：６-１：１２傳代，２-３天換液１次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
T 98 G細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHs74Int細胞、MLA144細胞、MPC-83細胞
NCIH3255細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EAhy 926細胞、A-375細胞、VK2 (E6/E7)細胞
NCI-H250細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-295細胞、H1341細胞、NCI-H226細胞
細胞生長特性：貼壁生長
A2058 Adherent人黑色素瘤細胞系
細胞形態(tài)特性：上皮細胞
為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代？體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性，也就是說當(dāng)一個細胞被其他細胞包圍的時候，它就會停止生長，及時傳代后，細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染；試劑保存不當(dāng)；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細胞濃度；讓細胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補加谷酷肢或生長因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺操作細胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預(yù)防冷凍管爆裂。
P388-D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL-I細胞、SU8686細胞、CoCL3細胞
HUT 226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-2185細胞、HCoEpiC細胞、CMT 167細胞
MDA-MB415細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMCUB-1細胞、CAL 85-1細胞、Y-1細胞
GM03569細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA NPA-87-1細胞、NCIH3255細胞、BV2細胞
GM03573細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L5178Y TK+/-3.7.2c細胞、GM03320細胞、H-2141細胞
16-HBE14o細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN12-PM6細胞、HEC1-B細胞、P-388D1細胞
U-2 OS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL 1-0細胞、HSAS3細胞、MMQ細胞
DF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1184細胞、UPCI:SCC090細胞、NCIH727細胞
NHA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPP-89細胞、CNE細胞、NIE 115細胞
RCC10 RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1187細胞、HEC-1B細胞、Rat Skin 1細胞
UWB1.289+BRCA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan 1細胞、MDA-MB-435細胞、SUM149細胞
CHL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-03.27細胞、MALME.3M細胞、SUDHL-8細胞
TERT-RPE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-55細胞、GM00637I細胞、H4-II-E細胞
A2058 Adherent人黑色素瘤細胞系
LS-411細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1693細胞、MC3T3-E1 Subclone 14細胞、OVCA433_Bast細胞
GOS-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-837細胞、8305C_1細胞、OV-90細胞
PC-9/S1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU86-86細胞、H-498細胞、D407細胞
IFRS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-423細胞、GM06141細胞、TE13細胞
BHP-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Mel 2細胞、FCCH1018細胞、OE33細胞
Bat lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEP-sm細胞、SHI1細胞、H-187細胞
CCD 966 SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780 CP70細胞、149PT細胞、BE2-C細胞
KMB-17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE354T細胞、IOSE-80細胞、Med 283細胞
OS-RC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NUGC2細胞、SF-767細胞、3T6細胞
JC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H157細胞、THEECs細胞、MDCKII-WT細胞
Detroit562細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NALM-6細胞、OE-33細胞、UCD-MLA-144細胞
LM(TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0015細胞、373 MG細胞、B/C3T3細胞
HLMVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN 7細胞、ML-2細胞、HPaSteC(HPSC)細胞
RSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DH-L5細胞、TKB1細胞、UWB1.289細胞
M1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VM-CUB-1細胞、COLO-320細胞、MDA-MB-435S細胞
SR-786細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML-4細胞、EFM-192B細胞、SK-RC-52細胞
H676B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM T4細胞、AN3細胞、ROS1728細胞
Colo16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBMEC細胞、NCIH520細胞、Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞
H1781細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAC1細胞、mREC細胞、HEC151細胞
SU-DHL-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-522細胞、SW 579細胞、NIHOVCAR3細胞
hCMEC/D3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SACC-83細胞、EBTr細胞、MN9D細胞
H1184細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV-CA 432細胞、KCL22S細胞、YAC細胞
OsACL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞、LU65細胞、SUM-159-PT細胞
TKB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Embryo Lung-1細胞、AMC-HN-8細胞、KYSE270細胞
RGC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-295細胞、MFE 296細胞、KYSE 180細胞
3-LL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 966 SK細胞、SRS-82細胞、SW-954細胞
CNE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT15細胞、RMC-1細胞、MDA-330細胞
GM637細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly19細胞、DMS273細胞、H865細胞
KFB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YAC-1細胞、KYSE0030細胞、TK-10細胞
KOPN-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1954細胞、FRO 81-2細胞、SW 1088細胞
MADB 106細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT FET細胞、KMS18細胞、KMS18細胞
Hep G2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKLU1細胞、NCI-H187細胞、C8166-CD4細胞
SNU-C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NGP細胞、GLAG-66細胞、Ly7細胞
DBTRG-05MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBTr細胞、HB611細胞、NCI-SNU-216細胞
SU86-86細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-4細胞、S3 HeLa細胞、UPCI:SCC090細胞
FRhK4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH508細胞、CCLP-1細胞、Tn 5B1-4細胞
C32 [Human melanoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T/GHA-VSMC細胞、WC00097細胞、SCC-15細胞
SKML-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT26.CL25細胞、TE32細胞、PG13細胞
HL60細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MT-3 [Human leukocytes]細胞、Farage細胞、MDA MB 436細胞
HCA7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI1細胞、H128細胞、Hs-606-T細胞
IOSE-Mar細胞系相關(guān)產(chǎn)品：4T1-A細胞、GM02132細胞、SEG1細胞
KE-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs706T細胞、SUP-B1細胞、T47D:A細胞
A2058 Adherent人黑色素瘤細胞系
3T6 Swiss Albino細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D283-MED細胞、NCI H23細胞、TI-73細胞
LS 123細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS1034細胞、GRSL細胞、YTMLC-90細胞
Hs 822.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-MC細胞、CV 1細胞、GCT0404細胞
EU-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC0203細胞、Vero 76細胞、DHL-5細胞
MUS-M1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KE-37細胞、PCI-4M細胞、BNCL2細胞
DU4475細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP細胞、MT-4細胞、KTC1細胞
NCI-747細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos-2G6-4C10細胞、CHG5細胞、FRO81-2細胞
TE353.SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu-3細胞、P3/NSI/1-AG4-1細胞、BC-021細胞
K-1735細胞系相關(guān)產(chǎn)品：786.O細胞、Calu 6細胞、HSAS3細胞
Balb/c3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-SF 21AE細胞、NCI-H-128細胞、EC-GI細胞
SKCO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FAT細胞、HC11細胞、STC-1細胞
MDA-MB415細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMCUB-1細胞、HEK 293 EBNA細胞、OV-CA 432細胞
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