"A-875 Adherent人黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：NGF受體陽(yáng)性。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長(zhǎng)角度來說，針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長(zhǎng)不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)不好》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過低，細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長(zhǎng)；4)胰酶消化時(shí)間過長(zhǎng)或過短：時(shí)間過長(zhǎng)，細(xì)胞死亡；時(shí)間過短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對(duì)性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
A-875 Adherent人黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
我?？吹揭粋€(gè)比較復(fù)雜的四步消化法，這個(gè)挺有意思，我也是次聽說，應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價(jià)值。但我估計(jì)這個(gè)方法可能對(duì)付少數(shù)非常怪異的細(xì)胞才需要這么復(fù)雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細(xì)胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實(shí)是很好消化的細(xì)胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點(diǎn)成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個(gè)視細(xì)胞而定。如果和標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導(dǎo)致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細(xì)胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細(xì)胞的特性，是因?yàn)橘N壁過程中重新聚集了。這個(gè)時(shí)候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細(xì)胞之后會(huì)對(duì)你越來越不好；比較難消化的細(xì)胞(潤(rùn)洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細(xì)胞，一般不超過５min，即可見細(xì)胞成片移動(dòng)，就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會(huì)有難消化的時(shí)候，比如tsDC細(xì)胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動(dòng)。
PA-TU-8988S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2286細(xì)胞、OVCA 420細(xì)胞、MDA1386細(xì)胞
CAL120細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR90細(xì)胞、OCILY-19細(xì)胞、RK-13細(xì)胞
LC-2 ad細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C17.2細(xì)胞、IMR-32細(xì)胞、SMA 560細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：３傳代；３-４天１次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
HCC-44細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NU-GC-2細(xì)胞、BLO11細(xì)胞、TH1細(xì)胞
Sarcoma OSteogenic-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：8305C_1細(xì)胞、MZ-CRC-1細(xì)胞、MC116細(xì)胞
MiaPaCa-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TW-039細(xì)胞、FET細(xì)胞、Potorous tridactylus Kidney 1細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
A-875 Adherent人黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：多角形
體內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)及其操作步驟：【瘤細(xì)胞懸液接種】１)無菌選取生長(zhǎng)良好(有光澤，淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長(zhǎng)期培養(yǎng)瘤細(xì)胞；２)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)８０～１００目篩網(wǎng)過濾成細(xì)胞懸液；３)培養(yǎng)細(xì)胞應(yīng)用PBS洗兩遍；４)計(jì)數(shù)并調(diào)整細(xì)胞濃度至１０７～１０８／ml；５)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細(xì)胞懸液(０.１ml／部位，＞１０６細(xì)胞)。初次接種成功率低，細(xì)胞數(shù)盡可能多一些；６)次日注意觀察動(dòng)物一般情況。初次接種一般有一段較長(zhǎng)的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，最后固定為一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的時(shí)間?！靖顾龅慕⑴c腹水瘤的接種】將實(shí)體瘤細(xì)胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細(xì)胞，將這種腹水反復(fù)傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時(shí)，腹水常呈血性(含大量紅細(xì)胞)，反復(fù)傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。１)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細(xì)胞離心和洗滌，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)；２)消毒動(dòng)物，左下腹穿刺接種１０６腹水瘤細(xì)胞；３)接種腹水瘤細(xì)胞后約７~１２d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９號(hào)針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水經(jīng)３０００rpm離心１５min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?/span>
H510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-1細(xì)胞、BEL7404細(xì)胞、IMR-90細(xì)胞
GH3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI-SCC090細(xì)胞、HCT15細(xì)胞、293T細(xì)胞
138MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TYKnu細(xì)胞、HEK293-EBNA1細(xì)胞、DrG細(xì)胞
H-2591細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTori-3細(xì)胞、A549細(xì)胞、CCRF CEM細(xì)胞
Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NFHIOSE-29細(xì)胞、A 2058細(xì)胞、H-2347細(xì)胞
TK 10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC-116細(xì)胞、AG06814-N細(xì)胞、CAL851細(xì)胞
CAL12T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L6細(xì)胞、SEG1細(xì)胞、NCI H747細(xì)胞
Hs742T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo741細(xì)胞、CEM-C7細(xì)胞、SUM190PT細(xì)胞
SNU-638細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hu-P-T4細(xì)胞、VeroC1008細(xì)胞、Anip[973]細(xì)胞
SNU16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL39細(xì)胞、FL 62891細(xì)胞、RIN14B細(xì)胞
U-251細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 606細(xì)胞、293E細(xì)胞、CT26-clone 25細(xì)胞
H2030細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Molm14細(xì)胞、CALU1細(xì)胞、L 1210細(xì)胞
Mhh-Call 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GP2-293細(xì)胞、RBVEC細(xì)胞、J 774A.1細(xì)胞
A-875 Adherent人黑色素瘤細(xì)胞系
Rat 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AR4IP細(xì)胞、TEV-1細(xì)胞、253J B-V細(xì)胞
NCIH1915細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW260細(xì)胞、293細(xì)胞、MDA 435細(xì)胞
SUNE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D10G41細(xì)胞、SCC 15細(xì)胞、Hs822T細(xì)胞
SUNE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D10G41細(xì)胞、SCC 15細(xì)胞、Hs822T細(xì)胞
EoL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEG-01細(xì)胞、U-138-MG細(xì)胞、C-Li-7細(xì)胞
SK ES 01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN45細(xì)胞、PSN-1細(xì)胞、NCI-H1385細(xì)胞
HCC 70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nthy-ori 3-1細(xì)胞、SK-MEL28細(xì)胞、AC16 [Human hybrid]細(xì)胞
HepG2-luc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNO1細(xì)胞、TE 671細(xì)胞、NRK clone 49F細(xì)胞
Tsup-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCFSTTG1細(xì)胞、58F細(xì)胞、HCC-1954BL細(xì)胞
CCD-112 CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：266 Bl細(xì)胞、H211細(xì)胞、Panc-02細(xì)胞
Jurkat, Clone E6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2452細(xì)胞、HEYA8細(xì)胞、MC3T3E1細(xì)胞
H446細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUIT 2細(xì)胞、OV-CA 432細(xì)胞、SF 767細(xì)胞
EFM192C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H/10T1/2-clone8細(xì)胞、LS411N細(xì)胞、H3255_DA細(xì)胞
SF-763細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF SB細(xì)胞、RH8994細(xì)胞、L cell line細(xì)胞
COR-L51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C26細(xì)胞、MC/9細(xì)胞、LM8細(xì)胞
WM-239細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C8D1A細(xì)胞、Kit 225-K6細(xì)胞、2PK3細(xì)胞
CemT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1937細(xì)胞、X63-Ag8細(xì)胞、GM2219C細(xì)胞
X63-Ag 8.6.5.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MX1細(xì)胞、FRH-0201細(xì)胞、H-1581細(xì)胞
D283-MED細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MBVP細(xì)胞、CAL 78細(xì)胞、WM115-mel細(xì)胞
Lewis lung carcinoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Duck embryo細(xì)胞、293H細(xì)胞、WERI-Rb1細(xì)胞
OVCAR4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL45細(xì)胞、Duke University 145細(xì)胞、H-2195細(xì)胞
DHL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Normal Rat Kidney細(xì)胞、PL11細(xì)胞、Fu97細(xì)胞
Kit 225 K6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1385細(xì)胞、251 MG細(xì)胞、VMM5細(xì)胞
CPA 47細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1954-BL細(xì)胞、CEM T4細(xì)胞、FHL-124細(xì)胞
Evsa-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-9S1細(xì)胞、C42細(xì)胞、NCI-H1703細(xì)胞
D-283細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NP69細(xì)胞、NCIH2023細(xì)胞、Vero-E6細(xì)胞
786-O RCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMA 560細(xì)胞、Murine Carcinoma-38細(xì)胞、VK2/E6E7細(xì)胞
P3JHR1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEMC7細(xì)胞、ECC-10細(xì)胞、JB6Cl30細(xì)胞
TR-146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-231細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細(xì)胞、CHO細(xì)胞
X63Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT144mel細(xì)胞、Leydig細(xì)胞、SW-962細(xì)胞
SK-MEL24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IGROV 1細(xì)胞、EFM192B細(xì)胞、COLO-1細(xì)胞
RMG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：V79-GalK1細(xì)胞、LOU-NH-91細(xì)胞、OSC-19細(xì)胞
NCI-H69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H735細(xì)胞、PL 45細(xì)胞、MHCC 97-H細(xì)胞
T-98G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 320DM細(xì)胞、TC7細(xì)胞、MV-522細(xì)胞
SU86.86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NT2D1細(xì)胞、BIC細(xì)胞、H-1435細(xì)胞
IHHA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G402細(xì)胞、BEL 7405細(xì)胞、TE-32細(xì)胞
ARO81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN12C細(xì)胞、Y3-Ag1,2,3細(xì)胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21細(xì)胞
B16/F10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc_05_04細(xì)胞、CAL 39細(xì)胞、HCC366細(xì)胞
SK HEP 01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HcaF細(xì)胞、Wien-133細(xì)胞、CAMA-1細(xì)胞
PMVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC3H1細(xì)胞、FM-88細(xì)胞、RMS1598細(xì)胞
HEK293-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNMC細(xì)胞、OCI AML4細(xì)胞、U87MG細(xì)胞
SNU-182細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-104細(xì)胞、Hep 3B細(xì)胞、MDA-MB-175細(xì)胞
A-875 Adherent人黑色素瘤細(xì)胞系
FDCP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT4P細(xì)胞、CCRF/CEM細(xì)胞、COR-L23細(xì)胞
RS4:11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3/M細(xì)胞、Ramos (RA 1)細(xì)胞、COLO-394細(xì)胞
KAT5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTori-3.1細(xì)胞、MHH-CALL2細(xì)胞、H-1404細(xì)胞
TE 85.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE(2)M17細(xì)胞、RPTEC/TERT1細(xì)胞、GA-10 (Clone 4)細(xì)胞
beta TC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI1788細(xì)胞、HUVEC-C[HUVEC]細(xì)胞、STTG1細(xì)胞
NB-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HREC細(xì)胞、PGLH7細(xì)胞、F98細(xì)胞
SKCO 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE32細(xì)胞、JJN3細(xì)胞、MDA-MB 231細(xì)胞
REC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JROECL21細(xì)胞、SUD6細(xì)胞、C4-2B細(xì)胞
SkChA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：REC1細(xì)胞、H-146細(xì)胞、LU165細(xì)胞
Hep 3B2.1-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB134細(xì)胞、ML2細(xì)胞、SPC-A-1細(xì)胞
KU 812F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-8226S細(xì)胞、LS-174T細(xì)胞、H4-IIE-C3細(xì)胞
138MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TYKnu細(xì)胞、NCI-H1184細(xì)胞、H-1299細(xì)胞
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