"A101D Adherent人黑色素瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
正確的細胞復蘇需知事項：細胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢？沒錯，就是記得到時間了，拿出來復蘇。那么，細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢？細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞：補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至７０%單層時收獲細胞，計數(shù)活細胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì)；５-１５%甘油；如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長，應在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長２４小時)內(nèi)凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞，以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題！細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點：當從液氮罐內(nèi)取出細胞時，有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護面罩和防護服十分必要；其實，細胞復蘇只是一個簡單的實驗，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié)，不然，也不一定會盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護目鏡；盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
A101D Adherent人黑色素瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
為了防止因污染或技術原因使長期培養(yǎng)功虧一簣，考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異，有時因寄贈、交換和購買，培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室，的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要?，F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-７０℃~-１９６℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是：在-７０℃以下時，細胞內(nèi)的酶活性均己停止，即代謝處于完全停止狀態(tài)，故可以長期保存。細胞低溫保存的關鍵，在于通過０~２０℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi)，水晶呈針狀，極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復蘇：凍存細胞較脆弱，要輕柔操作。凍存細胞要快速融化，并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感，離心去除凍存培養(yǎng)基，然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。１ml凍存細胞使用１０~２０ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù)，細胞接種應該至少在３×１０(５)活細胞/ml；培養(yǎng)細胞１２到２４小時，更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基，去除凍存劑。離心方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml凍存細胞加入到大約２５ml完全生長培養(yǎng)基，輕輕混勻；以大約８０x離心２到３分鐘；棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞，并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板，細胞接種應該至少為３×１０(５)活細胞/ml。細胞的分化：一個成年人全身細胞總數(shù)約１０１２個，可以區(qū)分為２００多種不同類型的細胞：形態(tài)結(jié)構(gòu)，代謝，行為，功能等各不相同。追根溯源，這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以，通常把發(fā)育過程中，細胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段，也發(fā)生在胎兒出生以后，乃至成人階段。例如，人體血細胞的產(chǎn)生和分化，這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞，轉(zhuǎn)入分化，通常從細胞周期中G１期開始時一個確定的點G０點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞，它們的基因表達和代謝活動各不相同。
ECV304細胞系相關產(chǎn)品：H82細胞、3T3L1細胞、GOS-3細胞
MOLT4細胞系相關產(chǎn)品：HME-1細胞、VeroE6細胞、Medical University of Graz-Chordoma 1細胞
H747細胞系相關產(chǎn)品：SUD-4細胞、MDA MB 231細胞、SUM-52PE細胞
細胞傳代方法：１：４-１：６傳代，２-３天換液１次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
L-929細胞系相關產(chǎn)品：SN12PM6細胞、HANK-1細胞、Hs.27細胞
NCIH226細胞系相關產(chǎn)品：H-524細胞、LTPA細胞、COLO320DM細胞
mREC細胞系相關產(chǎn)品：SKNBE(2c)細胞、16-HBE14o細胞、LLC-PK-1細胞
細胞生長特性：貼壁生長
A101D Adherent人黑色素瘤細胞系
細胞形態(tài)特性：上皮細胞
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié)：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過２０%，因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足，過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時須更換培養(yǎng)基？視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換；３)購買的復蘇細胞，為何會有脫落？因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩，收到后可以離心收集；４)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少，大都是因為離心過程操作上的失誤，造成細胞的物理性損傷，以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心，應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
6T-CEM細胞系相關產(chǎn)品：SNU-449細胞、MALME 3M細胞、Cattle chondrocytes細胞
BEP2D細胞系相關產(chǎn)品：HuT102細胞、HFL-I細胞、LS-1034細胞
Dunn LM8細胞系相關產(chǎn)品：343MG細胞、Fortner's melanotic melanoma #3細胞、BMSCs（mBMSCs）細胞
H-2172細胞系相關產(chǎn)品：B16-F10--RED細胞、H341細胞、GM04671細胞
CNE-2Z細胞系相關產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-27細胞、WM35細胞、Line 870 Emory University-4細胞
HOC細胞系相關產(chǎn)品：H-2073細胞、293S細胞、H1648細胞
CAKI 1細胞系相關產(chǎn)品：OCI Ly10細胞、MILE SVEN1細胞、RC-4B/C細胞
EBNA293細胞系相關產(chǎn)品：HSC-I細胞、OV-1063細胞、MiaPaCa2細胞
AMO1細胞系相關產(chǎn)品：RKO-AS-45-1細胞、MHCC 97-L細胞、OPM2細胞
MCF 10A細胞系相關產(chǎn)品：OCI-Ly01細胞、HBdSMC細胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞
8305-C細胞系相關產(chǎn)品：CDC/EU.HMEC-1細胞、TGHAVSMC細胞、MCF12F細胞
NCI H747細胞系相關產(chǎn)品：NKL細胞、HeLa-S3細胞、Colon 26細胞
HLMVEC細胞系相關產(chǎn)品：MKN 7細胞、ML-2細胞、HPaSteC(HPSC)細胞
A101D Adherent人黑色素瘤細胞系
NHDF細胞系相關產(chǎn)品：CAL 33細胞、UCLA-SO-M21細胞、D341 Med細胞
OCI-AML3細胞系相關產(chǎn)品：HCC0078細胞、UPCI:SCC90細胞、P3X63Ag8.653細胞
L5178Y TK+/-3.7.2c細胞系相關產(chǎn)品：293S細胞、A375mel細胞、H4IIEC3細胞
L5178Y TK+/-3.7.2c細胞系相關產(chǎn)品：293S細胞、A375mel細胞、H4IIEC3細胞
NTera2 cl.D1細胞系相關產(chǎn)品：PaTu8988s細胞、253J B-V細胞、CoC1細胞
CT26-clone 25細胞系相關產(chǎn)品：MRCV細胞、Hce8693細胞、SF 539細胞
Hs695T細胞系相關產(chǎn)品：Rat Basophilic Leukemia-1細胞、COLO320/DM細胞、SUPM2細胞
293-GP細胞系相關產(chǎn)品：SHG 44細胞、SKES1細胞、Panc2.03細胞
PaTu8988s細胞系相關產(chǎn)品：Hs863T細胞、HCEC-B4G12細胞、HPBALL細胞
GOS-3細胞系相關產(chǎn)品：SW-837細胞、8305C_1細胞、OV-90細胞
FU-97細胞系相關產(chǎn)品：NCl-H157細胞、MAD109細胞、Hs819T細胞
LC2/Ad細胞系相關產(chǎn)品：RCM1細胞、McG-1細胞、Hep II細胞
X63Ag8.653細胞系相關產(chǎn)品：HT144mel細胞、Leydig細胞、SW-962細胞
KYSE-140細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB-453細胞、PCI-SG231細胞、BV-2細胞
FAK+/+細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1869細胞、Melanoma 14細胞、RD-ES細胞
PL12細胞系相關產(chǎn)品：16HBE140細胞、PA-TU-8988S細胞、HIBEpiC細胞
U20S細胞系相關產(chǎn)品：GP-293細胞、HNE-1細胞、GA-10(Clone 4)細胞
GC1-SPG細胞系相關產(chǎn)品：SaOS-2細胞、SUM149-PT細胞、H-1048細胞
T_T_細胞系相關產(chǎn)品：BN-CL2細胞、NCIH82細胞、LP1細胞
COLO-684細胞系相關產(chǎn)品：DMS 273細胞、NCI-SNU-668細胞、Hs852細胞
H-1793細胞系相關產(chǎn)品：ECC-10細胞、Swiss 3T6細胞、SCC-25細胞
MDA134細胞系相關產(chǎn)品：RBL 1細胞、H-1993細胞、MDCK細胞
LAD-2細胞系相關產(chǎn)品：293FT細胞、PLC-PRF-5細胞、TB1 Lu細胞
TB1 Lu細胞系相關產(chǎn)品：SK_HEP1細胞、P3HR-1細胞、LA-N-1細胞
HCC9724細胞系相關產(chǎn)品：BIU87細胞、MRAEC細胞、T-47D細胞
SCH細胞系相關產(chǎn)品：SUP T1細胞、Metastatic Variant 522細胞、DoHH-2細胞
Duck embryo細胞系相關產(chǎn)品：ECC12細胞、SCLC21H細胞、Sp 2817細胞
TCMK1細胞系相關產(chǎn)品：CMT.64細胞、OCI Ly1細胞、H-23細胞
VMRCRCZ細胞系相關產(chǎn)品：BE(2)-C細胞、SL1細胞、NU-GC-3細胞
HCC2108細胞系相關產(chǎn)品：BNCL2細胞、MXI細胞、SW1783細胞
SK MEL 28細胞系相關產(chǎn)品：Fetal Human Colon細胞、NP69細胞、HREC細胞
PJ34細胞系相關產(chǎn)品：P3HRI細胞、SNU-878細胞、HOP 62細胞
NE1-E6E7細胞系相關產(chǎn)品：SNU668細胞、H-1105細胞、MOLT 4細胞
Panc10.05細胞系相關產(chǎn)品：MUGCHOR1細胞、MLE-12細胞、Japanese Tissue Culture-28細胞
NRK 49F細胞系相關產(chǎn)品：MCA205細胞、YAC-1細胞、T-CAM2細胞
P3-X63-Ag 8.653細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1618細胞、NBLS細胞、TGW細胞
A-431細胞系相關產(chǎn)品：RL95-2細胞、Raji細胞、SKBR-3細胞
SNU-484細胞系相關產(chǎn)品：T.T細胞、KTC-1細胞、EBNA293細胞
MDA-361細胞系相關產(chǎn)品：MCF7-CTRL細胞、C-28/I2細胞、MFE-280細胞
BJA-B-1細胞系相關產(chǎn)品：GES1細胞、OVCAR-10細胞、SLMT-1細胞
H719細胞系相關產(chǎn)品：CAL-78細胞、MV411細胞、HuT 78細胞
U266 Bl細胞系相關產(chǎn)品：H1651細胞、TM4細胞、SU.86.86細胞
A101D Adherent人黑色素瘤細胞系
HGSMC細胞系相關產(chǎn)品：TE12細胞、RC92A細胞、NCI H82細胞
NCIH1651細胞系相關產(chǎn)品：KG-1細胞、HuT 78細胞、NCIH1792細胞
Human Corneal Endothelial Cells-12細胞系相關產(chǎn)品：SGC-7901/DDP細胞、BAEC細胞、UPCI-SCC-154細胞
EAC細胞系相關產(chǎn)品：U-373 MG細胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞、Swiss-3T3細胞
H125細胞系相關產(chǎn)品：MOLM16細胞、LLC-WRC 256細胞、RPPVEC細胞
MDA435細胞系相關產(chǎn)品：NUGC-3細胞、MFE280細胞、JEG3細胞
PF382細胞系相關產(chǎn)品：FRTL-5 Cl 2細胞、RWPE1細胞、PC 61 5.3細胞
5637細胞系相關產(chǎn)品：2T細胞、H292細胞、SUP T1細胞
MAVER-1細胞系相關產(chǎn)品：AML-193細胞、NCI-H2170細胞、SNU-520細胞
Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞系相關產(chǎn)品：PCI-4B細胞、H3396細胞、HOP-62細胞
H-2347細胞系相關產(chǎn)品：Anglne細胞、A-1847細胞、H-226細胞
Dunn LM8細胞系相關產(chǎn)品：343MG細胞、D283 Med細胞、LNCaP FGC細胞
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