"RWPE-1 Adherent人正常前列腺上皮細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：腫瘤抑制基因： p５３ + [PubMed: ９２１４６０５] pRB + [PubMed: ９２１４６０５] 一位正常男性前列腺組織切片的周圍區(qū)域的上皮細(xì)胞用單拷貝的人乳頭瘤病毒的１８(HPV-１８)進(jìn)行轉(zhuǎn)化，建立了RWPE-１ (ATCC CRL-１１６０９) 細(xì)胞株 [PubMed: ９２１４６０５]. 在三維Matrigel培養(yǎng)時，在雄激素作用下，RWPE-１細(xì)胞形成腺胞并向培養(yǎng)基中分泌PSA。[PubMed: １１１７０１４２]. 當(dāng)與Matrigel或基質(zhì)細(xì)胞混合注射雄性裸鼠時，RWPE-１細(xì)胞也能形成腺胞[PubMed: １１３０４７２４] 并產(chǎn)生PSA。 來源于RWPE-１的細(xì)胞再用Kirstin鼠類腫瘤病毒轉(zhuǎn)染Ki-ras基因，建立了能成瘤的RWPE-２細(xì)胞株(ATCC CRL-１１６１０) [PubMed: ９２１４６０５] 和 RWPE２-W９９ (ATCC CRL-２８５３) 細(xì)胞株。 另外，用N--N-(MNU)處理RWPE-１，建立了一系列模擬前列腺癌進(jìn)程中不同時期的成瘤細(xì)胞株。 它們是 WPE１-NA２２ (ATCC CRL-２８４９), WPE１-NB１４ (ATCC CRL-２８５０, WPE１-NB１１ (ATCC CRL-２８５１) 和 WPE１-NB２６ (ATCC CRL-２８５２) 細(xì)胞株。 據(jù)提供者報(bào)道，RWPE-１ 細(xì)胞株(ATCC CRL-１１６０９)經(jīng)過檢測，乙肝、丙肝、人免疫缺陷病毒都呈陰性。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞培養(yǎng)更好經(jīng)驗(yàn)詳解：1)收到細(xì)胞，首先要鏡檢：觀察細(xì)胞形態(tài)是否正常，對于貼壁細(xì)胞則要注意看貼壁情況是否很好，觀察細(xì)胞密度，有疑議及時咨提供細(xì)胞的技術(shù)人員。 由于運(yùn)輸?shù)臅r間或者溫度的變化，很多貼壁細(xì)胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長的狀態(tài)和平時會有點(diǎn)不一樣，主要是貼壁牢固問題。比如293T，平時貼壁就不是很牢，在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面，會發(fā)生大片的脫落，細(xì)胞聚集在一起，但是細(xì)胞生長還是正常的，通過離心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的貼壁生長。2)當(dāng)通過上一步的觀察，細(xì)胞初步?jīng)]有問題時，進(jìn)行下一步操作。當(dāng)收到的細(xì)胞密達(dá)到80%左右時，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基；或更換新鮮的培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中，隨后每天觀察。 細(xì)胞在低于正常生長溫度情況下，會調(diào)整為靜止期，或者慢速生長期，恢復(fù)37度的環(huán)境至少3個小時左右，才能重新調(diào)整到接近對數(shù)生長期的狀態(tài)，在對數(shù)生長期進(jìn)行細(xì)胞的傳代會大大增加傳代的成功率，和細(xì)胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細(xì)胞密度超過90%，并且細(xì)胞狀態(tài)很好時，則復(fù)溫后2個小時需要立即傳代。傳代的比例應(yīng)依據(jù)不同的細(xì)胞而定。對于生長比較快，狀態(tài)穩(wěn)定，不易受外界影響的細(xì)胞可以一次多傳幾瓶；對于生長較慢，細(xì)胞比較薄，狀態(tài)容易波動的細(xì)胞類型，一次少傳些，每瓶細(xì)胞密度大些，便于穩(wěn)定生長。至于一些比較陌生的細(xì)胞，次處理也可以依照第二種情況。
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
RWPE-1 Adherent人正常前列腺上皮細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液，用PBS清洗(沖洗)，加入適量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以蓋住細(xì)胞，消化溫度是３７℃；２)顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時細(xì)胞消化適度；(３)吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養(yǎng)液?！敬荡蚍稚⒓?xì)胞操作】１)吹打制懸：用滴管將已經(jīng)消化細(xì)胞吹打成細(xì)胞懸液；２)吸細(xì)胞懸液入離心管：將細(xì)胞懸液吸入１０ml離心管中；３)平衡離心：平衡后將離心管放入臺式離心機(jī)中，以１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心６-８分鐘；４)棄上清液，加入新培養(yǎng)液：棄去上清液，加入２ml培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細(xì)胞制成細(xì)胞懸液。【分裝稀釋細(xì)胞操作】１)顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞量，必要是計(jì)數(shù)。注意密度過小會影響傳代細(xì)胞的生長，傳代細(xì)胞的密度應(yīng)該不低于５×１０５/ml。最后要做好標(biāo)記；２)分裝：將細(xì)胞懸液吸出分裝至２～３個培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋；３)繼續(xù)培養(yǎng)：用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，適當(dāng)旋松瓶蓋，放入CO２培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細(xì)胞２小時后開始貼附在瓶壁上。
Walker-Ca.256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu 177細(xì)胞、WSU-DLCL(2)細(xì)胞、KNS42細(xì)胞
10T1/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BGC-823細(xì)胞、MT2細(xì)胞、NTERA2細(xì)胞
H-510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-2 ad細(xì)胞、FHL124細(xì)胞、SK-BR3細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：３傳代,２-３天傳一代。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
H498細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-23.5細(xì)胞、NCI-H676細(xì)胞、Mel-MeWo細(xì)胞
RS 4;11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC5細(xì)胞、H-1404細(xì)胞、D-341 Med細(xì)胞
HCT8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3 NS1 Ag4細(xì)胞、G361mel細(xì)胞、MDA MB231細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
RWPE-1 Adherent人正常前列腺上皮細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞
接收細(xì)胞相關(guān)問題：如不能在收到細(xì)胞后及時操作細(xì)胞，T２５及離心管發(fā)貨的細(xì)胞將可以消毒后在３７度過夜，血清發(fā)貨的細(xì)胞在室溫下靜置１-２天(注意不要放冰箱)，干冰發(fā)貨的可以在確認(rèn)干冰未完全升華時將細(xì)胞直接放回液氮或者-８０度冰箱，若干冰完全升華，請即刻復(fù)蘇細(xì)胞。T２５瓶及離心管在培養(yǎng)箱平衡是為了讓細(xì)胞盡快適應(yīng)培養(yǎng)箱環(huán)境，同時使部分因運(yùn)輸導(dǎo)致脫落的細(xì)胞貼壁，此步驟非常必要。T２５瓶如果在顯微鏡下可以看到部分不貼壁的細(xì)胞，可以收集上清后離心(１２００rpm，５min)后，將沉淀用新的培養(yǎng)基重懸后接種至新的培養(yǎng)瓶或皿中。部分細(xì)胞在運(yùn)輸過程中，由于不斷震蕩及環(huán)境不適，可能導(dǎo)致細(xì)胞破碎死亡，從而使培養(yǎng)基中漂浮很多細(xì)胞碎片及顆粒狀物質(zhì)。這種情況下，平衡后，貼壁細(xì)胞用PBS洗兩遍再加新的培養(yǎng)基培養(yǎng)或者傳代至新瓶中培養(yǎng)即可；懸浮細(xì)胞可以離心(１０００rpm，３min)收集細(xì)胞，并用PBS重懸后再離心一次，再用新的培養(yǎng)基重懸并接種細(xì)胞。
HCC-1187細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：High 5細(xì)胞、Wistar Institute-38細(xì)胞、OCI-Ly8細(xì)胞
IMR 32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RenCa細(xì)胞、MDA-MB-134 VI細(xì)胞、H1048細(xì)胞
MB39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mc Ardle 7777細(xì)胞、JROECL 19細(xì)胞、NIH-3T3-L1細(xì)胞
JM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H929細(xì)胞、Pro-5WgaRI3C細(xì)胞、GM03190A細(xì)胞
SHG-44細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4細(xì)胞、A253細(xì)胞、SF295細(xì)胞
NCIH841細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C33-A細(xì)胞、HARAB細(xì)胞、NCI-SNU-761細(xì)胞
CEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細(xì)胞、HEK-293H細(xì)胞、H740細(xì)胞
TJ905細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCC-HEL-1細(xì)胞、SNU-407細(xì)胞、Pa017C細(xì)胞
KYSE0030細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hOMF細(xì)胞、P31/Fujioka細(xì)胞、Human Epithelioma-2細(xì)胞
MDA-MB453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD966SK細(xì)胞、NCI-H1734細(xì)胞、NCIH2135細(xì)胞
VM Cub 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：INS1E細(xì)胞、HLEpiC細(xì)胞、22Rv1細(xì)胞
SK-N-BE2C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB468細(xì)胞、TE 32.T細(xì)胞、OVCAR-432細(xì)胞
Tj-905細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GH 3細(xì)胞、COLO678細(xì)胞、mousepodocyte細(xì)胞
RWPE-1 Adherent人正常前列腺上皮細(xì)胞系
TGBC-11-TKB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI7951細(xì)胞、J82 COT細(xì)胞、LC-1 sq細(xì)胞
mIMCD3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-023細(xì)胞、CEM C7細(xì)胞、CNE-1細(xì)胞
Madison 109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-BL2141細(xì)胞、SK RC 52細(xì)胞、H510細(xì)胞
Madison 109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-BL2141細(xì)胞、SK RC 52細(xì)胞、H510細(xì)胞
HPMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hela-mock細(xì)胞、GEO細(xì)胞、FAK+/+細(xì)胞
Rat-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS18細(xì)胞、Kit225-K6細(xì)胞、526細(xì)胞
MC/CAR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-2058細(xì)胞、A 72細(xì)胞、WEHI 3B細(xì)胞
IOSE 29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-EBNA1細(xì)胞、F442A細(xì)胞、Hx147細(xì)胞
LLC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC 52細(xì)胞、Eca 109細(xì)胞、OCI-AML-2細(xì)胞
Hela-Ap-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-2/ad細(xì)胞、HSKMC細(xì)胞、MKN1細(xì)胞
HS-68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1438細(xì)胞、CCD-112 CoN細(xì)胞、ChaGo-K-1細(xì)胞
TE354T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2008細(xì)胞、RPMI6666細(xì)胞、PANC 813細(xì)胞
MDA MB 361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H3255_DA細(xì)胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細(xì)胞、HFF-1細(xì)胞
HIT clone T15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NL20細(xì)胞、SVEC4-10細(xì)胞、NW-38細(xì)胞
SJCRH30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SBC-3細(xì)胞、RCC-10RGB細(xì)胞、NCI660細(xì)胞
CA-46細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-95-8細(xì)胞、Daoy細(xì)胞、9L細(xì)胞
MBMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNLMG-B5537SKIN細(xì)胞、alphaTC1 Clone 6細(xì)胞、UPCI:SCC90細(xì)胞
IEC 18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H865細(xì)胞、alpha-TC1-6細(xì)胞、CL-40細(xì)胞
MDA361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0038細(xì)胞、RCC 786-O細(xì)胞、QG56細(xì)胞
EB-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1783細(xì)胞、SK-NM-C細(xì)胞、Y3-Ag 1.2.3細(xì)胞
NS1-Ag 4/1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Meat Animal Research Center-145細(xì)胞、AMO-1細(xì)胞、ESC細(xì)胞
Fetal Human Lens-124細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：bEnd.3[BEND3]細(xì)胞、A375-S2細(xì)胞、A-431細(xì)胞
D407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-3細(xì)胞、IB-RS-2細(xì)胞、Panc5.04細(xì)胞
7404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：4-1st細(xì)胞、Hs 706.T細(xì)胞、Hs 821.T細(xì)胞
MDAMB134細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIT.T15細(xì)胞、Panc-10.05細(xì)胞、Nittby-Salford 1細(xì)胞
MUGCHOR1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：no.11細(xì)胞、HCCC-9810細(xì)胞、WIL2S細(xì)胞
7404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：4-1st細(xì)胞、Hs 706.T細(xì)胞、Hs 821.T細(xì)胞
SNU119細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA1386細(xì)胞、MUTZ-3細(xì)胞、CL1-0細(xì)胞
HeLaS3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP-N-RT-BM細(xì)胞、HCC0202細(xì)胞、AC29細(xì)胞
TOV21G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細(xì)胞、PANC-1細(xì)胞、SNU398細(xì)胞
NCIH1688細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H23細(xì)胞、AGS細(xì)胞、786-0WT細(xì)胞
NCIH2023細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP 100細(xì)胞、COLO 206細(xì)胞、Glioma-261細(xì)胞
Panc02.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2198細(xì)胞、U118MG細(xì)胞、UWB1-289細(xì)胞
PGBE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Simpson細(xì)胞、Clone 15 HL-60細(xì)胞、C6661細(xì)胞
OCI Ly19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-3255細(xì)胞、M-20細(xì)胞、HCC70細(xì)胞
PANC0813細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293c18細(xì)胞、P3/ag細(xì)胞、BRL-3A細(xì)胞
LY細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H7721細(xì)胞、H35 Reuber細(xì)胞、Karpas-422細(xì)胞
Farage Original Line細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE-Van細(xì)胞、HO1N1細(xì)胞、HEL 299細(xì)胞
MNNG/HOS Cl #5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Chinese Hamster Lung細(xì)胞、CHP-212細(xì)胞、Hs 895 T細(xì)胞
SUM190PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA-801C細(xì)胞、MLE 12細(xì)胞、NOMO1細(xì)胞
GB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 680N細(xì)胞、HL1細(xì)胞、rUCMSCs細(xì)胞
OCI/AML-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC94細(xì)胞、SKNFI細(xì)胞、HC11細(xì)胞
RWPE-1 Adherent人正常前列腺上皮細(xì)胞系
F-81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BIC細(xì)胞、WM266細(xì)胞、X63細(xì)胞
NCI H82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SP2/0 Ag-14細(xì)胞、SNU668細(xì)胞、Clone Y-1細(xì)胞
MN60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-679細(xì)胞、VMRCRCZ細(xì)胞、WISH細(xì)胞
HL 60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 948細(xì)胞、B-104細(xì)胞、RERFLCMS細(xì)胞
A875細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU182細(xì)胞、U2932細(xì)胞、H820細(xì)胞
CAL33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-1846細(xì)胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細(xì)胞、F-81細(xì)胞
NK-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WPMY1細(xì)胞、CAL-62細(xì)胞、MDA-MB-361細(xì)胞
SU4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NW38細(xì)胞、MCA-38細(xì)胞、CAL-39細(xì)胞
TE85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：tdott細(xì)胞、NCIH208細(xì)胞、Hs 840.T細(xì)胞
1.1B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN-18細(xì)胞、KG-1a細(xì)胞、MPVECs細(xì)胞
3T3 L1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NL20SV細(xì)胞、2008細(xì)胞、H2286細(xì)胞
MB39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mc Ardle 7777細(xì)胞、3AA細(xì)胞、COR-L51細(xì)胞
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