"RWPE-2 Adherent人正常前列腺上皮細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
傳代的操作步驟注意事項(xiàng):1)操作前要洗手,進(jìn)入超凈臺(tái)后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點(diǎn)燃酒精燈,操作在火焰附近進(jìn)行,耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼,金屬器械燒灼時(shí)間不能太長(zhǎng),以免退火,并冷卻后才能夾取組織,吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼,以免燒焦形成碳膜。3)操作動(dòng)作要準(zhǔn)確敏捷,但又不能太快,以防空氣流動(dòng),增加污染機(jī)會(huì)。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分,工作臺(tái)面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細(xì)胞傳代的操作步驟:1)吸除培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許,以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘,當(dāng)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)回縮,細(xì)胞間隙增大后,立即終止消化。4)吸除消化液,向瓶?jī)?nèi)注入Hanks液數(shù)毫升,輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶,把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細(xì)胞時(shí),動(dòng)作要輕,以免把已松動(dòng)的細(xì)胞沖掉流失,如用胰蛋白酶液?jiǎn)为?dú)消化,吸除胰蛋白酶液后,可不用Hanks液沖洗,直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復(fù)吹打瓶壁細(xì)胞,使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。6)計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后,把細(xì)胞懸液分成等份分裝入數(shù)個(gè)培養(yǎng)瓶中,置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代的操作步驟:1)吸出細(xì)胞培養(yǎng)液,放入離心管中,離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液,加入適量之新鮮培養(yǎng)基,混和均勻后,依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中,以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
RWPE-2 Adherent人正常前列腺上皮細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
常規(guī)的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)(增殖,凋亡,遷移,分化之類的),受消化影響不是很大,如果不用胰酶去孵育而使用潤洗的方法消化的話(難消化細(xì)胞例外)。但少數(shù)實(shí)驗(yàn),比如病毒包裝,對(duì)細(xì)胞代數(shù),對(duì)細(xì)胞狀態(tài)要求極高。這個(gè)時(shí)候,胰酶消化,就是潤洗,都會(huì)對(duì)細(xì)胞包裝病毒的能力有影響,傳代次數(shù)一多,細(xì)胞包裝能力就會(huì)逐漸下降(當(dāng)然也有其它因素影響包裝效率)。這個(gè)時(shí)候都不用胰酶消化,用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響ECM相關(guān)酶的活性,來使得細(xì)胞脫離基質(zhì)附著表面,但不切割任何蛋白;EDTA的作用。許多人不用胰酶,只用EDTA,或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白,trypsin切割ECM的一些負(fù)責(zé)粘連和附著的蛋白,而EDTA通過螯合Ca離子,作用于Integrin的活性,所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA,或者對(duì)付特別難消化的細(xì)胞,添加多一些EDTA,就是這個(gè)道理。一般不要試圖延長(zhǎng)消化時(shí)間(如果10min還消化不徹底的話),而應(yīng)該想其它辦法;PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌,是常見的操作,因?yàn)镾erum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學(xué)問可以講,對(duì)于一些難消化細(xì)胞,那么可以配制不含Ca,Mg離子的PBS,因?yàn)檫@些離子也會(huì)抑制trypsin的活性。但對(duì)于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤洗即可消化的細(xì)胞,不需要配制如此溶液。
OCI-Ly 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE8細(xì)胞、RGCs細(xì)胞、A549 ATCC細(xì)胞
H1563細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00346細(xì)胞、T98細(xì)胞、MT2細(xì)胞
MDA-MB435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHK-21細(xì)胞、Me-Wo細(xì)胞、NCI-H1238細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:3傳代,2-3天傳一代。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
UCLA-RO 81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-14細(xì)胞、HTori:3細(xì)胞、MDA.MB.231細(xì)胞
RPMI no. 8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHT-101細(xì)胞、G292細(xì)胞、Rat Basophilic Leukemia-1細(xì)胞
WM-2664細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mahlavu細(xì)胞、SNUC2B細(xì)胞、MDCK supertube細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
RWPE-2 Adherent人正常前列腺上皮細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞
【細(xì)胞培養(yǎng)中原蟲的污染情況總結(jié)】原蟲:培養(yǎng)液可輕微渾濁,顯微鏡下那些細(xì)小的點(diǎn)狀物數(shù)量非常多,輕微活動(dòng),細(xì)胞雖然可以生長(zhǎng)但繁殖速度卻明顯減慢,而且細(xì)胞狀態(tài)不好,邊緣不清楚,細(xì)胞不透亮。他們與細(xì)胞可共生但會(huì)與細(xì)胞爭(zhēng)奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的,但他們的數(shù)量小,細(xì)胞站優(yōu)勢(shì)所以不會(huì)影響到細(xì)胞的正常生長(zhǎng),只有當(dāng)他們到達(dá)一定的數(shù)量時(shí)就會(huì)影響到細(xì)胞的生長(zhǎng),最終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因:可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等關(guān)于培養(yǎng)基的無菌狀況,取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細(xì)胞),37度試培養(yǎng)一段時(shí)間后觀察。如果沒有細(xì)菌生長(zhǎng)就是操作的問題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(酸鏈霉素和芐青霉素)。但雙抗有時(shí)會(huì)影響細(xì)胞的狀態(tài),所以在做轉(zhuǎn)染、檢測(cè)細(xì)胞某項(xiàng)指標(biāo)前一定要撤去雙抗,以避免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。1)孵箱應(yīng)定期用三氧機(jī)消毒或者紫外光照射,并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時(shí)孵箱內(nèi)的水應(yīng)是三蒸水;2)超凈臺(tái)\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素;3)超凈臺(tái)的風(fēng)機(jī)不能過大,風(fēng)機(jī)到6-8格。否則也可能能致霉菌污染;4)無菌室經(jīng)甲醛熏蒸消毒后,可用同等量的噴灑中和,約幾小時(shí)即可進(jìn)入操作。
MAVER1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-761細(xì)胞、HuNS1細(xì)胞、FF-WT-BJ細(xì)胞
VM-CUB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-483細(xì)胞、SF-126細(xì)胞、AU565細(xì)胞
COLO-829細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-10細(xì)胞、SW48細(xì)胞、CA 46細(xì)胞
Capan2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-460細(xì)胞、KMB 17細(xì)胞、DI TNC1細(xì)胞
ChaGo-K-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Michigan Cancer Foundation-7細(xì)胞、LS123細(xì)胞、CAKI1細(xì)胞
Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS940細(xì)胞、S.B.細(xì)胞、Ca761細(xì)胞
A101D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-C2B細(xì)胞、NCI-A549細(xì)胞、B6Tert-1細(xì)胞
AU-565細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LCLC-103H細(xì)胞、Clone 166細(xì)胞、Panc04.03細(xì)胞
Karpas299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DAN-G細(xì)胞、PL-11細(xì)胞、MDAPCa2b細(xì)胞
3T3 Swiss Albino細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVTOKO細(xì)胞、BNL CL2細(xì)胞、CCK81細(xì)胞
U-343 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGH-U3 (RN)細(xì)胞、H735細(xì)胞、H1385細(xì)胞
BT-549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H719細(xì)胞、Karpas-422細(xì)胞、Dami細(xì)胞
H-2444細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL85-1細(xì)胞、PA-1細(xì)胞、NCI-H1341細(xì)胞
RWPE-2 Adherent人正常前列腺上皮細(xì)胞系
GM04680細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL11細(xì)胞、KYSE270細(xì)胞、WSU-HN13細(xì)胞
NCIH2066細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-62細(xì)胞、hTERT-HME-1細(xì)胞、SUDHL10細(xì)胞
S180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(2)細(xì)胞、HT clone H9細(xì)胞、NCI-H1975細(xì)胞
OCUM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-157細(xì)胞、NCI-H1666細(xì)胞、HEK (AD293)細(xì)胞
OCI Ly10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL-1細(xì)胞、HD-LM-2細(xì)胞、A2780-CP細(xì)胞
G401細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PaTu-8988s細(xì)胞、GM03571細(xì)胞、H322細(xì)胞
253JB-V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV2008細(xì)胞、HSC-6細(xì)胞、NCI-HUT-520細(xì)胞
WC00044細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293 EBNA細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細(xì)胞、MDA-175細(xì)胞
KMS26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kuramochi細(xì)胞、NCI-441細(xì)胞、3T3 Swiss Albino細(xì)胞
C-8161細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLB-985細(xì)胞、BS-C-1細(xì)胞、SNU-423細(xì)胞
HTR8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JHH2細(xì)胞、Farage OL細(xì)胞、HDQP1細(xì)胞
C32 [Human melanoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T/GHA-VSMC細(xì)胞、WC00097細(xì)胞、SCC-15細(xì)胞
OCI-AML3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0078細(xì)胞、UPCI:SCC90細(xì)胞、P3X63Ag8.653細(xì)胞
Psi2-DAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ca759細(xì)胞、UACC812細(xì)胞、TC-1[JHU-1]細(xì)胞
H1836細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1581細(xì)胞、MUGCHOR1細(xì)胞、GM00215A細(xì)胞
OCI-AML5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JURKAT E-6.1細(xì)胞、HCe-8693細(xì)胞、GM07404A細(xì)胞
LA-N-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1781細(xì)胞、HLEC-SRA 01/04細(xì)胞、KLN 205細(xì)胞
AE 1201細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly10細(xì)胞、L-5178-Y細(xì)胞、SNU-1040細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Det. 562細(xì)胞、MV522細(xì)胞、MAC1細(xì)胞
SNB-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LP1細(xì)胞、CCD18細(xì)胞、SKOV3細(xì)胞
rHSC-99細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:624細(xì)胞、Onda 11細(xì)胞、Panc327細(xì)胞
WM35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-172細(xì)胞、293F細(xì)胞、H-2286細(xì)胞
H-1563細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2023細(xì)胞、MIN6細(xì)胞、NCIH1568細(xì)胞
G422細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKGT2細(xì)胞、B16F1細(xì)胞、H-2170細(xì)胞
HONE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-4 S+L-細(xì)胞、GM05372E細(xì)胞、H1522細(xì)胞
Swiss 3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JROECL 19細(xì)胞、624細(xì)胞、HNE2細(xì)胞
DCS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM16136細(xì)胞、KMS-26細(xì)胞、DU_145細(xì)胞
MDCKII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H774細(xì)胞、EoL-1-cell細(xì)胞、HCE細(xì)胞
GM3569細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3.NS-1/1.Ag4.1細(xì)胞、MDA-MB361細(xì)胞、KNS-81細(xì)胞
C57 Mouse Tumor 93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos(RA1)細(xì)胞、HeLa-229細(xì)胞、Sf21細(xì)胞
OUMS23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA795細(xì)胞、WEHI-164細(xì)胞、Panc 03.27細(xì)胞
AMJ2-C8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ANA1細(xì)胞、CHO K1細(xì)胞、SGC 7901細(xì)胞
NCI-SNU-216細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KPL4細(xì)胞、ANA-1細(xì)胞、H4-II-EC3細(xì)胞
MRC 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE2-C細(xì)胞、PE CA PJ34細(xì)胞、RC-4B細(xì)胞
Pa17C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-345細(xì)胞、2B4-L細(xì)胞、HT 1197.T細(xì)胞
293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WC00044細(xì)胞、A-2058細(xì)胞、4175細(xì)胞
C 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-L1細(xì)胞、NT2D1細(xì)胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1細(xì)胞
C32 mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MESSA-DX5細(xì)胞、C1R細(xì)胞、NGEC細(xì)胞
UCLA-RO 81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-14細(xì)胞、HTori:3細(xì)胞、MDA.MB.231細(xì)胞
PIGI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GTL 16細(xì)胞、HS-683細(xì)胞、Y3細(xì)胞
WM239A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3M-IE8細(xì)胞、OVCAR420細(xì)胞、TCMK1細(xì)胞
B16BL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MMQ細(xì)胞、Ca 9-22細(xì)胞、H1755細(xì)胞
RWPE-2 Adherent人正常前列腺上皮細(xì)胞系
Psi-2-DAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EAC-E2G8細(xì)胞、IEC-6細(xì)胞、OKa-C-1細(xì)胞
BC-024細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGH-UI細(xì)胞、SUM 159細(xì)胞、MV-1-Lu細(xì)胞
Central Adrenergic TH-expressing a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPC-11細(xì)胞、H-128細(xì)胞、LAPC4細(xì)胞
HMO6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NG 108-15細(xì)胞、CNE2Z細(xì)胞、H-378細(xì)胞
Panc02.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2198細(xì)胞、U118MG細(xì)胞、UWB1-289細(xì)胞
MCMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IB-RS2細(xì)胞、HUT28細(xì)胞、PC-3/M細(xì)胞
HEK 293-EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT clone T15細(xì)胞、NCIH211細(xì)胞、SUM-52-PE細(xì)胞
NCIH889細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS180細(xì)胞、SK-HEP-1細(xì)胞、FHL 124細(xì)胞
SCC 25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1650細(xì)胞、hESC細(xì)胞、PAN 02細(xì)胞
P-36細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT_116細(xì)胞、OVCA-432細(xì)胞、HCe-8693細(xì)胞
AG06814-M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774 A.1細(xì)胞、MLO-Y4細(xì)胞、NCIH1299細(xì)胞
COLO-829細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-10細(xì)胞、H-1573細(xì)胞、SW-962細(xì)胞
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