"Mahlavu epithelioid cells人肝癌細胞系 細胞背景資料:肝癌;女性 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數(shù)/100個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%;細胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細胞,如果細胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細胞懸液。3.將細胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內形成單層,需要再次進行傳代。 RFL-6細胞系相關產品:SNUC2B細胞、PG13細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞 NCIH1385細胞系相關產品:P 815細胞、NCI H345細胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞 EFM192細胞系相關產品:SUDHL8細胞、Hs 578.Bst細胞、G-292, clone A141B1細胞 細胞生長:貼壁 Mahlavu epithelioid cells人肝癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結凍時體積會增加約10%,必須預留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝結而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞,而影響血清之品質。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”:通常經過熱處理之血清,沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”,常會誤認為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會使此沈淀物增多,更會誤認為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測,又沒有污染。一般而言,此小黑點應不會影響細胞之生長,但若懷疑此血清之品質,應立即停用,更換另一批號的血清。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 LC-MS細胞系相關產品:NCIH1963細胞、SNU601細胞、NCI-H2170細胞 G-361細胞系相關產品:U-118MG細胞、U-87MG細胞、HCMEC細胞 SUDHL-16細胞系相關產品:F-81細胞、Porcine Kidney-13細胞、NCIH1781細胞 GM00215A細胞系相關產品:HOSEpiC細胞、H2122細胞、GM02219D細胞 3T3F442A細胞系相關產品:Microbiological Associates-104細胞、JB-6 Cl 30細胞、NWA細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 Mahlavu epithelioid cells人肝癌細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 細胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇;3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 MUTZ-1細胞系相關產品:SKM1細胞、HEK293-EBNA細胞、HIT-T15細胞 EBNA293細胞系相關產品:HSC-I細胞、OV-1063細胞、MiaPaCa2細胞 H865細胞系相關產品:HEK 293FT細胞、B16F0細胞、R-1059-D細胞 HEK-293-FT細胞系相關產品:NP-69細胞、32D:cl3細胞、C3H/10T1/2-clone8細胞 MGH-UI細胞系相關產品:ASH3細胞、Bovine Turbinate細胞、SK-MEL3細胞 NPC-TW 039細胞系相關產品:Leghorn Male Hepatoma cell line細胞、LLC PK1細胞、CAL51細胞 H9c2(2-1)細胞系相關產品:MFE296細胞、PLCPRF5細胞、HCC0044細胞 CHO-ori細胞系相關產品:FL 62891細胞、X63-Ag 8.6.5.3細胞、HCASMC細胞 NCI-H2342細胞系相關產品:174xCEM.T2細胞、NCIH889細胞、hEEC細胞 HSC5細胞系相關產品:SW 900細胞、AR42J細胞、H-510A細胞 Mahlavu epithelioid cells人肝癌細胞系 GM637A細胞系相關產品:HO-8910 PM細胞、686LN-M4e細胞、Hs 746.T細胞 E6-1細胞系相關產品:FRhK-4細胞、293 c18細胞、143 B細胞 PC 61細胞系相關產品:CCF-STTG1細胞、Huh-7細胞、H-524細胞 MCF12F細胞系相關產品:hs 68細胞、MGc80-3細胞、TM4細胞 HL-7702細胞系相關產品:Ly3細胞、H508細胞、BPH1細胞 Hep2細胞系相關產品:H-660細胞、hFOB1.19細胞、LICR-LON-HN6-R細胞 Hep2細胞系相關產品:H-660細胞、hFOB1.19細胞、LICR-LON-HN6-R細胞 RASMC細胞系相關產品:OCI-Ly8細胞、TPC-1細胞、WSU-DLCL-2細胞 GP5d細胞系相關產品:SKES-1細胞、OCI-AML2細胞、Vero細胞 NCI-H1693細胞系相關產品:MARC 145細胞、RCK8細胞、Hs888Lu細胞 HPAF-II細胞系相關產品:Reh細胞、DMS114細胞、A375-SM細胞 PaTu-8988s細胞系相關產品:8305-C細胞、EBC-1/original細胞、SCC154細胞 RPMI #8226細胞系相關產品:He La細胞、LICR-LON-HN6-R細胞、SKNBE-2細胞 Hep 2細胞系相關產品:RA細胞、HEK 293FT細胞、HOSEpiC細胞 Hs934T細胞系相關產品:Kit-225-K6細胞、hRPTC細胞、HEK293F細胞 SKMEL-24細胞系相關產品:MDA-134細胞、AE 1201細胞、MV4II細胞 Hs 604.T細胞系相關產品:H2073細胞、L(TK-)細胞、U266-B1細胞 TJ905細胞系相關產品:CCC-HEL-1細胞、SNU-407細胞、Pa017C細胞 KLN-205細胞系相關產品:RCS細胞、H1437細胞、Centre Antoine Lacassagne-51細胞 MA-c細胞系相關產品:H69/P細胞、UMUC-3細胞、Alexander cells細胞 LIM 1215細胞系相關產品:U-87細胞、DF1細胞、H1573細胞 Ly18細胞系相關產品:NCIH28細胞、TC-1 [Mouse lung]細胞、P3.times.63 Ag8.653細胞 Hs 683細胞系相關產品:RDES細胞、Hs606細胞、HuH-6細胞 T98細胞系相關產品:SUPB-15細胞、CF PAC-1細胞、MV-4-11細胞 Tn5 B1-4細胞系相關產品:CORL51細胞、UCLA-RO 81細胞、B-3細胞 HEL299細胞系相關產品:SKOV3細胞、SK.OV.3細胞、TGBC11T細胞 AMO-1細胞系相關產品:Th17細胞、SSP-25細胞、VP303細胞 NK-92 MI細胞系相關產品:H2291細胞、GP293細胞、BE(2)M17細胞 Dakiki細胞系相關產品:LS411N細胞、DU 145細胞、U031細胞 Pa18C細胞系相關產品:HS-766T細胞、BSC40細胞、NCI-441細胞 8226/S細胞系相關產品:LCD細胞、HCC-4006細胞、293細胞 GM07404D細胞系相關產品:H1838細胞、NS20Y細胞、KP2細胞 GM06141B細胞系相關產品:MGH-U1 (EJ)細胞、SN12-PM6細胞、H-719細胞 HSC6細胞系相關產品:HOP 92細胞、Dami細胞、SNU620細胞 AMC-HN-8細胞系相關產品:BEL7405細胞、HMSC細胞、SKMES-1細胞 OVCA 433細胞系相關產品:Japanese Tissue Culture-28細胞、HPAF-II細胞、H-1944細胞 NCIH295R細胞系相關產品:TI-73細胞、NCIH1755細胞、NCI-H2591細胞 HCT/Taxo1細胞系相關產品:NTERA2-D1細胞、RKN細胞、NW-MEL-38細胞 HCT/Taxo1細胞系相關產品:NTERA2-D1細胞、RKN細胞、NW-MEL-38細胞 SW756細胞系相關產品:UCLA-SO-M14細胞、7860細胞、CAL120細胞 Y-79細胞系相關產品:MBT2細胞、DITNC1細胞、CX-1細胞 CCRF-SB細胞系相關產品:RT-BM 1細胞、NS1-1 Ag4.1細胞、C12細胞 RGM1細胞系相關產品:C1R細胞、HT-29細胞、SKMel-28細胞 SCLC-21H細胞系相關產品:SPCA-1細胞、NCIH2107細胞、231-luc細胞 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