"JKT-1 epithelioid cells人精原瘤細胞系 細胞背景資料:精原瘤;男性 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉! PLC-8024細胞系相關(guān)產(chǎn)品:aTC1-6細胞、BT-B細胞、AMC-HN8細胞 HFF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC 97-L細胞、McARH7777細胞、HCC827細胞 DU-4475細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1359細胞、CCD 841 CoTr細胞、HSKMC細胞 細胞生長:貼壁 JKT-1 epithelioid cells人精原瘤細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化,需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前,細胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細胞條件無血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存:計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以1×10(7)到5×10(7)細胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存:使用分離試劑從基層分離細胞,分離時盡可能溫和,使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細胞,確定有活力細胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以5×10(6)到1×10(6)細胞/ml密度,在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 MN-9D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mono Mac6細胞、BT549細胞、H-2405細胞 TE4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKO_AS45細胞、SNB-19細胞、BrCL18細胞 FHL 124細胞系相關(guān)產(chǎn)品:38C13細胞、L-M[TK-]細胞、FRO 81-2細胞 A-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAD 2細胞、IOSE 29細胞、ETCC-007細胞 MZ-CRC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2030細胞、KM933細胞、SUM 102細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 JKT-1 epithelioid cells人精原瘤細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。 NCI-H2405細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-134VI細胞、OV3121細胞、MHHCALL2細胞 NCIH2023細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP 100細胞、COLO 206細胞、Glioma-261細胞 ARPE-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CoCL3細胞、TMK-1細胞、MDA 1386細胞 HCoEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P36細胞、C8D1A細胞、HONE-1細胞 EVSAT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB49細胞、HCC0044細胞、PVEC細胞 ROS1728細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T_T_細胞、SW962細胞、SW 954細胞 HCC 38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC1469細胞、Ku812細胞、NCI-H2171細胞 16HBE14o-細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 3.27細胞、SGC7901細胞、HeLa/S3細胞 HCC-1588細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2087細胞、ARH77細胞、KU 19-19細胞 LC-2-Ad細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKRC 39細胞、HLFa細胞、WB-F344細胞 JKT-1 epithelioid cells人精原瘤細胞系 C-643細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AD293細胞、RA.1細胞、Granta519細胞 SUIT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:K1735細胞、GalK 1細胞、HLCL9B10細胞 FCCH1018細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VP 229細胞、210RCY3-Ag1.2.3細胞、EFM-192C細胞 DF1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞、H838細胞、MC3T3-E1 Subclone 14細胞 HuT-78細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC-PK1細胞、University of Arizona Cell Culture-812細胞、LS-513細胞 OCI-Ly3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C8166細胞、WERI-Rb-1細胞、PLA801D細胞 OCI-Ly3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C8166細胞、WERI-Rb-1細胞、PLA801D細胞 130-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G361-mel細胞、Pt-K2細胞、SUM 159PT細胞 COS7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALB/3T3 cl. A31細胞、HR1K細胞、Vx2細胞 AZ-521細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MADISON LUNG TA-109細胞、MOLT.4細胞、T98-G細胞 FM88細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BaF3細胞、NCTC-1469細胞、SKO007細胞 Anip 973細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OE21細胞、CCD-966SK細胞、Co 115細胞 SPC-A-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM.C1細胞、BC-024細胞、751細胞 OVCAR-8/ADR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Psi2 DAP細胞、MDAMB134VI細胞、X63-Ag8-653細胞 NT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CATH.a細胞、CT 26細胞、3T3-L1細胞 746T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNG-HOS (Cl#5)細胞、PC3M-2B4細胞、VM-CUB1細胞 SK-UT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-14細胞、3-LL細胞、HPAEpiC細胞 KPL4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GT1-1細胞、WML2細胞、ABC1細胞 HHL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL 5細胞、NCI-H1963細胞、LAD2細胞 TGW-nu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNEP細胞、OCI Ly10細胞、TE-85細胞 OCIAML3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BetaTC6細胞、GM2132細胞、HS-5細胞 KOSC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OAW42細胞、Mel-MeWo細胞、T-ALL-1細胞 hEM15A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2591細胞、U-251_MG細胞、M-14細胞 MDA-MB157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hUC-MSC細胞、CZ-1細胞、SUM-102細胞 HuO9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1990細胞、MDA-436細胞、BT.549細胞 Hs840_T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIXC002細胞、578T細胞、EoL-1 cell細胞 FO [Mouse myeloma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P31/Fujioka細胞、Colo16細胞、MHH-CALL-2細胞 HCC0827細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-8402細胞、3 LL細胞、IBRS-2細胞 C4-2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-II-E-C3細胞、FRO81-2細胞、LCD細胞 KALS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH209細胞、2BS細胞、Cloudman S91 melanoma細胞 B16-F10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp2/mIL-6細胞、HEK293-A細胞、EU-4細胞 SU-DHL-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SL-1細胞、H2227細胞、B-CPAP細胞 OCI-Ly 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H220細胞、253J-BV細胞、Tsup-1細胞 SEG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H929細胞、MDA-435細胞、Jurkat E6細胞 OCILY3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madison細胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞、HEK AD293細胞 Hep 3B2_1-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SMMC 7721細胞、QGP 1細胞、HEH2細胞 Lu-165細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEY A8細胞、HuO9細胞、HCC 70細胞 HuH-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM-C7細胞、4-1st細胞、M-1 myeloid leukemia細胞 Ly1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細胞、Sp2/0細胞、NCIH847細胞 CD-18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16 melanoma F10細胞、NCIH1573細胞、RAEC細胞 WM2664細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-172 MG細胞、P3J HR1-K細胞、KYSE 50細胞 Hep-3B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs445細胞、T24細胞、HOS/MNNG細胞 PC-3M 2B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE510細胞、Reuber-H-35 hepatoma細胞、Transformed Human Liver Epithelial-2細胞 LLC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC 52細胞、Eca 109細胞、OCI-AML-2細胞 MEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS411細胞、QGP1細胞、TE 85 ClF-5細胞 THP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR420細胞、P388-D1細胞、High Five細胞 HEK-293H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC7901/DDP細胞、H1650_CO細胞、10T1/2細胞 KNS-81細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1876細胞、RS1細胞、BRL 3A細胞 SHI-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T24(ECV304)細胞、C32r細胞、A 172細胞 IOSE-Van細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VM Cub 1細胞、Potorous tridactylus Kidney 1細胞、HMO6細胞 NCIH82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT55細胞、NTera 2細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞 JKT-1 epithelioid cells人精原瘤細胞系 Colon-26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN 382細胞、PM6細胞、COLO 357細胞 OVHM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV-522細胞、NCIH2291細胞、GP2-293細胞 mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC/CAR細胞、A-253細胞、FAT細胞 ARPE-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CoCL3細胞、SU8686細胞、H1944細胞 "
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