"HC11 epithelioid cells細胞系 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結(jié)1:復(fù)蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題??偨Y(jié)2:首先應(yīng)該懷疑凍存,實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當會事。 DC2.4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Psi-2-DAP細胞、PK136細胞、HNSC細胞 Ca759細胞系相關(guān)產(chǎn)品:130T細胞、C3H10T1/2CL8細胞、OAC-P4C細胞 UO-31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Kidney-2細胞、PC2細胞、MC-3T3細胞 細胞生長:貼壁 HC11 epithelioid cells細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代的一般方法:開始細胞傳代前,仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細胞(單層細胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細胞,挑選生長狀態(tài)良好,細胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細胞;先用PBS洗液沖洗細胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細胞瓶內(nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 COV-434細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-1376細胞、PNT-1A細胞、B16BL6細胞 SK MEL 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA 420細胞、AKR細胞、Case 3細胞 EBTr (NBL-4)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep3B細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞、HHL5細胞 JCA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTC-200細胞、H-1975細胞、Fox/NY細胞 Kuramochi細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML-4細胞、OP9細胞、SNU-C1細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 HC11 epithelioid cells細胞系 細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié):1)一般客戶拿到細胞后,應(yīng)該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當?shù)販囟龋绻麣鉁氐陀冢炊鹊?,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應(yīng),造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。 786-0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH716細胞、TOG細胞、NCIH2291細胞 RBMVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DoTc2 4510細胞、G401細胞、IPLB-SF-21-AE細胞 HCC15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRO81-2細胞、YD-38細胞、MOLT.4細胞 NCI-H-295細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM932細胞、LN-229細胞、NCCIT細胞 HN6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPB-ALL細胞、NOZ細胞、MOPC細胞 NCTC 3960細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞、HOS/MNNG細胞、JAR細胞 P3X63 AG8-653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-CAM2細胞、HMEC細胞、HELF細胞 HeLaS3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-N-RT-BM細胞、HCC0202細胞、AC29細胞 Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UACC 893細胞、JVM2細胞、LS-411N細胞 Detroit562細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NALM-6細胞、OE-33細胞、UCD-MLA-144細胞 HC11 epithelioid cells細胞系 SUDHL4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-Swiss albino細胞、MPC-11細胞、GM0637細胞 H-2342細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT116/L細胞、LoVo細胞、H1563細胞 BTI-Tn-5B1-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMC細胞、H1581細胞、OKT 3細胞 RIN-m5F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIN87細胞、CCC-HHM-2細胞、639V細胞 Panc 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA317細胞、TE5細胞、OCI-Ly01細胞 VMRCLCD細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-5178-Y-R細胞、PaTu-8988s細胞、Astrocyte type I clone細胞 VMRCLCD細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-5178-Y-R細胞、PaTu-8988s細胞、Astrocyte type I clone細胞 J82 COT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-1細胞、Namalva細胞、NCIH196細胞 FaDu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Farage細胞、D-407細胞、SK-MES-1細胞 PC 61 5.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NE1-E6E7細胞、ST2細胞、HT 1197細胞 QSG-7701細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 626細胞、Y3-Ag1.2.3細胞、RPTC細胞 CALU 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00637I細胞、NCI H226細胞、Hs 695.T細胞 ARH77細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-9細胞、SNU407細胞、P19細胞 CTLL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa-S3細胞、CCRF SB細胞、NCI-H125細胞 LC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1836細胞、JB6 clone 30, subclone 7b細胞、CO115細胞 AML193細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH146細胞、MOLP2細胞、GM01232E細胞 HPAF/CD18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUS-M1細胞、PANC 813細胞、BSC-40細胞 C17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-453細胞、SK-MEL-31細胞、Tn5B1-4細胞 A 2780 CP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-620細胞、SKNBE-1細胞、NCI-H1838細胞 MESSA/Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM12-SM細胞、HLEC-B3細胞、MEG01細胞 MDA361細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0038細胞、RCC 786-O細胞、QG56細胞 mIMCD3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-023細胞、CEM C7細胞、CNE-1細胞 SACC-LM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIEC6細胞、HCC-1187細胞、Tu-177細胞 SK BR 03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3NIH細胞、KTC1細胞、Hs 739.T細胞 Hs 729T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA175細胞、3T3-F442A細胞、SW1463細胞 OVHM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV-522細胞、NCIH1963細胞、H9c2(2-1)細胞 OB2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lieming Xu-2細胞、OCI/AML4細胞、A2780細胞 NPC-039細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF 7B細胞、PE/CA-PJ-34細胞、Sp2/O-Ag14細胞 HRA19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMNSAH-DF1細胞、SW-1463細胞、IGROV1細胞 MDA-MB453細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD966SK細胞、NCI-H1734細胞、NCIH2135細胞 SUM149-PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC-LM3細胞、Vero E-6細胞、NOMO-1細胞 Mouse Podocyte Clone-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DSL-6A/C1細胞、HCEC-12細胞、U-251細胞 A2780 CP70細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cor L88細胞、B958細胞、HELA-GFP細胞 NB4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep G2細胞、H524細胞、COR-L105細胞 IOSE-Mar細胞系相關(guān)產(chǎn)品:4T1-A細胞、GM02132細胞、SEG1細胞 P3-NS1/1-Ag4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHLF細胞、NCI-H524細胞、Caco 2細胞 SPCA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-688A-T細胞、BC-020細胞、CAL62細胞 PLC8024細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-174T細胞、KYSE30細胞、Panc3_27細胞 HNE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KOPN-8細胞、CL1.0細胞、Hepa 1-6細胞 RPMI 8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC1細胞、A204細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細胞 PC-3M-1E8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-4細胞、ARH 77細胞、QBI-293A細胞 KPL-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1417細胞、SW626細胞、BMDC細胞 HOS TE85細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone M-3細胞、MDA-1386細胞、Pro-Lec1.3C細胞 BT-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos (RA 1)細胞、H-1694細胞、MC-4細胞 HASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS TE 85細胞、LIPF178C細胞、OCI Ly1細胞 LCD細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-520細胞、ISHI細胞、GM12878細胞 Ishikawa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C166細胞、CCD19Lu細胞、SUM-102PT細胞 TK.10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa/DDP細胞、ECV-304細胞、TOV112細胞 C26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS123細胞、TNC-1B12B4細胞、H9c2細胞 Caki2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE2C細胞、OKT 3細胞、CAL-78細胞 HBL 100細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKOE6細胞、HCT 8細胞、ZR751細胞 HC11 epithelioid cells細胞系 MeT-5A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-549細胞、SK-ES1細胞、PANC 327細胞 RC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HR-1細胞、Lu-65細胞、C-32細胞 U2OS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hela-Ap-1細胞、P19細胞、PLC PRF 5細胞 HCC-1599細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B/C3T3細胞、373 MG細胞、HEK AD293細胞 "
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