"D283 Med epithelioid cells人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細(xì)胞沒問題。總結(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實(shí)際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因?yàn)椴僮骱唵?，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細(xì)胞復(fù)蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格，很多人容易忘卻這個事情，因?yàn)檫@個東西流程長。６、如果你細(xì)胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細(xì)胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細(xì)胞都污染一個細(xì)菌的話，這個細(xì)菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因?yàn)榉跸錈o論你如何處理都有大量的細(xì)菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當(dāng)會事。
L1210細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCA-7細(xì)胞、SVG p12細(xì)胞、TE9細(xì)胞
AMJ2-C8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ANA1細(xì)胞、CHO K1細(xì)胞、SGC 7901細(xì)胞
SBC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC4006細(xì)胞、NCIH716細(xì)胞、RM-1細(xì)胞
細(xì)胞生長：貼壁
D283 Med epithelioid cells人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前，細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細(xì)胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細(xì)胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細(xì)胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存：計(jì)數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細(xì)胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存：使用分離試劑從基層分離細(xì)胞，分離時盡可能溫和，使對細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細(xì)胞，確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細(xì)胞/ml密度，在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細(xì)胞傳代方法：每周換液２-３次。
THP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR420細(xì)胞、P388-D1細(xì)胞、High Five細(xì)胞
RGCs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MES-1細(xì)胞、C81-61細(xì)胞、3T6 Swiss Albino細(xì)胞
SW 1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OB2細(xì)胞、SKMEL1細(xì)胞、U-2 OS細(xì)胞
SUPT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN14B細(xì)胞、Hs852T細(xì)胞、Cates 1B細(xì)胞
J 774A.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc4.03細(xì)胞、SKCol1細(xì)胞、KBM-5細(xì)胞
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
D283 Med epithelioid cells人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：懸浮細(xì)胞的多細(xì)胞聚集體，和一些貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細(xì)胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細(xì)胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞１００X，２００X各一張)，排除細(xì)胞本身污染的情況；收到細(xì)胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時如無異常情況，請?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細(xì)胞多久能到，是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細(xì)胞前請確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟龋绻麣鉁氐陀冢炊鹊?，則采用郵寄凍存細(xì)胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細(xì)胞大都無法立即適應(yīng)，造成細(xì)胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細(xì)胞無法存活。
PaTu 8988 S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 02細(xì)胞、PLC細(xì)胞、NCTC clone 929細(xì)胞
Microbiological Associates-104細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HR1K細(xì)胞、KG-1a細(xì)胞、LN 382細(xì)胞
4T1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BSC40細(xì)胞、T173細(xì)胞、SK_HEP1細(xì)胞
NCIH1155細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 1034細(xì)胞、IEC18細(xì)胞、Opossum Kidney細(xì)胞
NCI-H2405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-134VI細(xì)胞、OV3121細(xì)胞、MHHCALL2細(xì)胞
Colo205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KBM-7細(xì)胞、RAG細(xì)胞、MHCC 97細(xì)胞
MC-CAR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NSH細(xì)胞、SKLU1細(xì)胞、BE2M17細(xì)胞
HepG2-luc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNO1細(xì)胞、TE 671細(xì)胞、NRK clone 49F細(xì)胞
IEC18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB231細(xì)胞、SU-DHL1細(xì)胞、QBC-939細(xì)胞
B95.8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-3-H-I細(xì)胞、HT29細(xì)胞、Kit-225-K6細(xì)胞
D283 Med epithelioid cells人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
3LL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-22細(xì)胞、PA-TU S細(xì)胞、SH-SY5Y Parental細(xì)胞
Hs675細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1755細(xì)胞、Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞、Panc 1細(xì)胞
HFSF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：526-mel細(xì)胞、C4-I細(xì)胞、TE15細(xì)胞
HCC70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1819細(xì)胞、KHYG-1細(xì)胞、MCF-10 Attached細(xì)胞
EAC-E2G8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR3細(xì)胞、TM-3細(xì)胞、A9 (Hamprecht)細(xì)胞
ME1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE9細(xì)胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細(xì)胞、NCI-H2228細(xì)胞
HA1800細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUSMC細(xì)胞、SUDHL-10細(xì)胞、K7M2-WT細(xì)胞
B4G12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUM2B細(xì)胞、PCI:SG231細(xì)胞、Hs-578Bst細(xì)胞
TI-73細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep 3B2.1-7細(xì)胞、KS-SLK細(xì)胞、P3J.HR1K細(xì)胞
FRTL 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW264細(xì)胞、OCI/AML-5細(xì)胞、NS1-Ag 4/1細(xì)胞
IALM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS273細(xì)胞、COS7細(xì)胞、C28/I2細(xì)胞
SUM-149細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAMOS2G64C10細(xì)胞、HMEC-1細(xì)胞、KYSE-150細(xì)胞
P-2003細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC 15細(xì)胞、TYK-nu細(xì)胞、HSAS4細(xì)胞
CAKI.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ChA1細(xì)胞、NKM1細(xì)胞、HGMC細(xì)胞
D341Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2405細(xì)胞、U20S細(xì)胞、MDA-MB-157細(xì)胞
MALME.3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3J細(xì)胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]細(xì)胞、SP-2細(xì)胞
Panc-3_27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WiDr細(xì)胞、SUIT 2細(xì)胞、PC3M-2B4細(xì)胞
KOPN8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC 94細(xì)胞、OE-19細(xì)胞、BS-C-1細(xì)胞
TK 10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC-116細(xì)胞、AG06814-N細(xì)胞、CAL851細(xì)胞
MDCK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-BR-3細(xì)胞、PNEC30細(xì)胞、293/EBNA-1細(xì)胞
MV 4;11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 140細(xì)胞、CV-1.K細(xì)胞、RAW2647細(xì)胞
FRO81-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN-m細(xì)胞、SW1088細(xì)胞、NCI-H196細(xì)胞
HASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS TE 85細(xì)胞、LIPF178C細(xì)胞、OCI Ly1細(xì)胞
DU 145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fetal Human Lens-124細(xì)胞、McA-RH 8994細(xì)胞、U118-MG細(xì)胞
C4 I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Alexander cells細(xì)胞、CWR-22rv1細(xì)胞、CC-LP-I細(xì)胞
G-292 clone A141B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EB2細(xì)胞、NCIH244細(xì)胞、LLC1細(xì)胞
MuM-2C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs688(A)T細(xì)胞、Calu6細(xì)胞、OV2008細(xì)胞
GM06141B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGH-U1 (EJ)細(xì)胞、SN12-PM6細(xì)胞、H-719細(xì)胞
Huh-7.5.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-cells細(xì)胞、NPA87細(xì)胞、SMA-560細(xì)胞
NRK 49F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA205細(xì)胞、YAC-1細(xì)胞、T-CAM2細(xì)胞
LS174T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Lung-65細(xì)胞、Ra #1細(xì)胞、P3/X63/Ag8細(xì)胞
LC-1 sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM/C1細(xì)胞、NCI-H1618細(xì)胞、Bac1 2F5細(xì)胞
WTRL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AAV-293細(xì)胞、H-920細(xì)胞、DanG細(xì)胞
H-508細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLCPK1細(xì)胞、NCIH727細(xì)胞、University of Arizona Cell Culture-812細(xì)胞
NCI-841細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML-2細(xì)胞、Rat1細(xì)胞、LS180細(xì)胞
RTMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL 45細(xì)胞、J-111細(xì)胞、KMH-2細(xì)胞
A375-SM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT4-D6-P2T細(xì)胞、HepG2細(xì)胞、NCI-H165細(xì)胞
SNU-119細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL7702細(xì)胞、IBRS2細(xì)胞、PaCa2細(xì)胞
G361-mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KBM-5細(xì)胞、TK-1細(xì)胞、REC 1細(xì)胞
MFHL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Normal fibroblast-10細(xì)胞、KLN205細(xì)胞、H-2198細(xì)胞
LIXC002細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML4細(xì)胞、Becker細(xì)胞、PC2細(xì)胞
SUM-52-PE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA MB 175 VII細(xì)胞、HN13細(xì)胞、HuH1細(xì)胞
PK13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIA PaCa-2細(xì)胞、MM1S細(xì)胞、BEAS-2B細(xì)胞
JTC-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G 292 Clone A 141B1細(xì)胞、HSC2細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415細(xì)胞
BALB/3T3 cl. A31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCK-8細(xì)胞、HEK 293-F細(xì)胞、CTV-1細(xì)胞
AN3 CA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BV-2細(xì)胞、Ishikawa細(xì)胞、COLO 679細(xì)胞
LWnt-3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A549 ATCC細(xì)胞、Epstein-Barr-3細(xì)胞、DMS 114細(xì)胞
Onda 11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(2)C細(xì)胞、GM02219D細(xì)胞、COLO206細(xì)胞
HCC 2185細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1930細(xì)胞、P3X63Ag8-6-5-3細(xì)胞、N2a細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tsup-1細(xì)胞、P3X63Ag8細(xì)胞、HTori-3.1細(xì)胞
H82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRTL-5細(xì)胞、H596細(xì)胞、OCM-1細(xì)胞
D283 Med epithelioid cells人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
HL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HK-2 [Human kidney]細(xì)胞、H1792細(xì)胞、OCI-Ly7細(xì)胞
3T3-A31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBE細(xì)胞、DAN-G細(xì)胞、U266 B1細(xì)胞
4T1-LUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-92.1.7細(xì)胞、BL1339細(xì)胞、A2780CP70細(xì)胞
4T1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BSC40細(xì)胞、8402細(xì)胞、Giant Cell Tumor細(xì)胞
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