"NMC-G1 epithelioid cells人腦膠質(zhì)細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 貼壁細(xì)胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細(xì)胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細(xì)胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細(xì)胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細(xì)胞。這種方法作用溫和,對細(xì)胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細(xì)胞與間質(zhì),對細(xì)胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細(xì)胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細(xì)胞的損傷比較大,但是分離成單細(xì)胞懸液的能力確實比較強(qiáng)。5、物理法。直接吹打或用細(xì)胞刮子將細(xì)胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細(xì)胞傳代時。無法使組織上的細(xì)胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細(xì)胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細(xì)胞損傷小,不需要中止或洗細(xì)胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細(xì)胞。不足是細(xì)胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細(xì)胞死亡操作的間充質(zhì)干細(xì)胞、DC細(xì)胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細(xì)胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細(xì)胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細(xì)胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 HCAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH522細(xì)胞、H.Ep.-2細(xì)胞、PLC細(xì)胞 H2023細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUPT-1細(xì)胞、Hmy.2 CIR細(xì)胞、H1651細(xì)胞 Hs 294T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2 clone D1細(xì)胞、OVCAR.5細(xì)胞、CHL細(xì)胞 細(xì)胞生長:貼壁 NMC-G1 epithelioid cells人腦膠質(zhì)細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享:支原體是一類缺乏細(xì)胞壁的原核細(xì)胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細(xì)胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細(xì)胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細(xì)菌高。細(xì)胞培養(yǎng)(特別是傳代細(xì)胞)被支原體污染是個世界性問題。在細(xì)胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達(dá)到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細(xì)胞的DNA,RNA及蛋白表達(dá),又不能通過可視法對其進(jìn)行檢測,而且它對細(xì)胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細(xì)胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細(xì)胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細(xì)胞,有的細(xì)胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細(xì)胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細(xì)胞的原始組織或器官的污染。組織細(xì)胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預(yù)防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴(yán)格實驗操作;細(xì)胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細(xì)胞后,特別是重要的細(xì)胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補(bǔ)體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細(xì)胞壁,一般來講,對作用于細(xì)胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。 細(xì)胞傳代方法:1:2傳代 EBC-1/original細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caki-2細(xì)胞、ACC-3細(xì)胞、AN-3細(xì)胞 HeLa/DDP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320細(xì)胞、KATO 3細(xì)胞、L-6 myoblast細(xì)胞 TI-73細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep 3B2.1-7細(xì)胞、KS-SLK細(xì)胞、P3J.HR1K細(xì)胞 ATDC-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMST-6細(xì)胞、OVCAR-3細(xì)胞、MBMEC細(xì)胞 CCD-841-CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DOK細(xì)胞、SK MEL 28細(xì)胞、LK 2細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 NMC-G1 epithelioid cells人腦膠質(zhì)細(xì)胞系 細(xì)胞生長特性:貼壁生長 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞 造成實驗室細(xì)胞污染常見情況總結(jié):細(xì)胞培養(yǎng)中最常見污染的是細(xì)菌、真菌和支原體污染。細(xì)胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細(xì)胞污染呢?我們根據(jù)常見細(xì)胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細(xì)胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機(jī)、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細(xì)胞使用。培養(yǎng)細(xì)胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細(xì)胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細(xì)胞!一不小心“飄”進(jìn)你的細(xì)胞培養(yǎng)板里,細(xì)胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細(xì)胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細(xì)胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤。【傳代細(xì)胞人多口雜,難管理】在傳代細(xì)胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當(dāng)風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細(xì)胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細(xì)菌等著去攻擊你的細(xì)胞呢! LAN6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-8細(xì)胞、AD-293細(xì)胞、U373細(xì)胞 P30-OHK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA468細(xì)胞、KU812-F細(xì)胞、H441細(xì)胞 UMR-106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK 10a細(xì)胞、T8細(xì)胞、HOS-TE85細(xì)胞 NCI-H-69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL-8細(xì)胞、HCT116細(xì)胞、Fao細(xì)胞 University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fortner's melanotic melanoma #3細(xì)胞、3T3-442A細(xì)胞、HCCC9810細(xì)胞 143B TK-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03571細(xì)胞、MH-22a細(xì)胞、SK RC 52細(xì)胞 VA-ES-BJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-Col-1細(xì)胞、SW480細(xì)胞、H.Ep. No. 2細(xì)胞 NIH:OVCAR-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Super Tube細(xì)胞、HDLM-2細(xì)胞、IMR32細(xì)胞 DMS-153細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2052_MM細(xì)胞、OV 2008細(xì)胞、BJAB細(xì)胞 QBI-HEK 293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EU-2細(xì)胞、MN9D細(xì)胞、CHAGOK1細(xì)胞 NMC-G1 epithelioid cells人腦膠質(zhì)細(xì)胞系 HFL 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIA Paca2細(xì)胞、Panc 04.03細(xì)胞、HCC-1937細(xì)胞 H226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1882細(xì)胞、SK N SH細(xì)胞、CEM.C1細(xì)胞 BC-009細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-7細(xì)胞、L-540細(xì)胞、Pt-K1細(xì)胞 OCI-Ly10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN-m 14B細(xì)胞、Hs 578T細(xì)胞、P388.D1細(xì)胞 SKLMS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA2D1細(xì)胞、ASPC1細(xì)胞、16-HBE14o細(xì)胞 Mv1Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63-Ag8.653細(xì)胞、KU-812細(xì)胞、BIU-87細(xì)胞 Mv1Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63-Ag8.653細(xì)胞、KU-812細(xì)胞、BIU-87細(xì)胞 BNL 1ME A.7R.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC2218細(xì)胞、SW 1573細(xì)胞、COLO 684細(xì)胞 NTERA-2 clone D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H226細(xì)胞、H-226細(xì)胞、C81-61細(xì)胞 MFM-223細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKLU-1細(xì)胞、KM12-SM細(xì)胞、P3X63Ag8-6-5-3細(xì)胞 MDCKII-WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MMAc-SF細(xì)胞、HRGEC細(xì)胞、JVM2細(xì)胞 OKT3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TNC-1B12B4細(xì)胞、Experimental Mammary Tumour-6細(xì)胞、343 MG細(xì)胞 LLC-WRC 256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuNS1細(xì)胞、HEEpiC細(xì)胞、MHCC-LM3細(xì)胞 SW-626細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Malme-3 M細(xì)胞、TALL 1細(xì)胞、SK-N-BE(2)細(xì)胞 Ramos 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBE 135-E6/E7細(xì)胞、SK-N-BE-2c細(xì)胞、Sc-1細(xì)胞 CCD1095Sk細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H711細(xì)胞、ETCC-007細(xì)胞、MM134細(xì)胞 LA-N-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1781細(xì)胞、HLEC-SRA 01/04細(xì)胞、KLN 205細(xì)胞 32D clone3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A9細(xì)胞、4T1-A細(xì)胞、PANC-02-03細(xì)胞 HMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM-CCRF (CAMR)細(xì)胞、624 MEL細(xì)胞、GM2132細(xì)胞 CWR22-Rv1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63-Ag8-6-5-3細(xì)胞、Hs822T細(xì)胞、Panc203細(xì)胞 H660細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE5細(xì)胞、MC3T3-E1(C4)細(xì)胞、UPCI-SCC-90細(xì)胞 LA-795細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NR 8383細(xì)胞、HTori 3細(xì)胞、DHL6細(xì)胞 Hep G2/C3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa-229細(xì)胞、GM05887細(xì)胞、SK-MEL28細(xì)胞 NCI-H295R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-8細(xì)胞、MIA-PaCa-2細(xì)胞、NCI-H1954細(xì)胞 EBTr (NBL-4)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep3B細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細(xì)胞、HHL5細(xì)胞 NT2/D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2170細(xì)胞、KYSE0410細(xì)胞、Y79細(xì)胞 BT20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV-90細(xì)胞、MDAMB361細(xì)胞、PANC-04-03細(xì)胞 BN-CL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1271細(xì)胞、OCI/AML-4細(xì)胞、Calu-3細(xì)胞 MCMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IB-RS2細(xì)胞、HUT28細(xì)胞、PC-3/M細(xì)胞 ssMCF-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-C1細(xì)胞、NCI.H522細(xì)胞、AZ 521細(xì)胞 H-1618細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PCI:SG-231細(xì)胞、JROECL 33細(xì)胞、BC-019細(xì)胞 Murine Carcinoma-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-739細(xì)胞、95-D細(xì)胞、87MG細(xì)胞 SL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C22 (Clara)細(xì)胞、H-2342細(xì)胞、HBL100細(xì)胞 C3H/10T1/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JIMT-1細(xì)胞、SF763細(xì)胞、RTMC細(xì)胞 Duke University 4475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-190PT細(xì)胞、EM3細(xì)胞、CMT64細(xì)胞 FL83B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H847細(xì)胞、SW 837細(xì)胞、WM266-4細(xì)胞 NIHOVCAR3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FL62891細(xì)胞、H2052細(xì)胞、MC-116細(xì)胞 Huh7.5.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H716細(xì)胞、MM96L細(xì)胞、LoMeT-ccRcc細(xì)胞 Hepa 1-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2122細(xì)胞、UCH-1細(xì)胞、OCM1細(xì)胞 ARH-77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RFL-6細(xì)胞、NCI-N87細(xì)胞、HEK/EBNA細(xì)胞 PL12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:16HBE140細(xì)胞、PA-TU-8988S細(xì)胞、HIBEpiC細(xì)胞 HEK-293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECV-304細(xì)胞、U-373 MG細(xì)胞、KPL-4細(xì)胞 Hs737T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLN 205細(xì)胞、MDAMB468細(xì)胞、HA細(xì)胞 CHG-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1573細(xì)胞、A375.S2細(xì)胞、CL 1-5細(xì)胞 PM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1694細(xì)胞、hEEC細(xì)胞、HCT116細(xì)胞 MB-49細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT29細(xì)胞、KOPN-8細(xì)胞、UC-3細(xì)胞 GC-1 spg細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H3255細(xì)胞、CHL-CL-11細(xì)胞、NMC-G1細(xì)胞 C3H-10T1/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUTZ-3細(xì)胞、ATN1細(xì)胞、Hs 281.T細(xì)胞 WERI Rb-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LY細(xì)胞、SW1116細(xì)胞、U-343 MG細(xì)胞 SK-Col-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1838細(xì)胞、NIE-115細(xì)胞、TYK-nu細(xì)胞 CAMA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL-7702細(xì)胞、MX-1細(xì)胞、2V6.11細(xì)胞 NMC-G1 epithelioid cells人腦膠質(zhì)細(xì)胞系 H-II-E-C3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:beta-TC6細(xì)胞、MDCK-2細(xì)胞、NE1細(xì)胞 SGC7901細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Daoy細(xì)胞、ECC12細(xì)胞、NCIH2171細(xì)胞 EBTr (NBL-4)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep3B細(xì)胞、COLO357細(xì)胞、J111細(xì)胞 UMR-106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK 10a細(xì)胞、Panc-10.05細(xì)胞、H-2330細(xì)胞 "
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