1.細(xì)胞起源：
細(xì)胞簡(jiǎn)稱(chēng) D283 Med
細(xì)胞別稱(chēng) D283 MED; D283-MED; D-283 Med; D-283MED; D283MED; D283Med;D283-Med; D283; Med 283; H283
細(xì)胞背景描述 D283 Med細(xì)胞是由Friedman等人于1985年建系，源自一名6歲患有神經(jīng)管細(xì)胞瘤有腹腔轉(zhuǎn)移的白人男性小孩的腹水細(xì)胞。
供體年齡 男；6歲
組織來(lái)源 腦組織
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
細(xì)胞類(lèi)型 腫瘤細(xì)胞
腫瘤類(lèi)型 成髓瘤細(xì)胞
生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞
生物安全等級(jí) 1
2.培養(yǎng)及保藏：
完全培養(yǎng)基 MEM（含NEAA）(PM150410)＋10% FBS(164210-50)＋1%
P/S(PB180120)
培養(yǎng)環(huán)境 空氣，95%；CO 2，5%
37℃
凍存條件 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
液氮
3.傳代方法：
傳代步驟
1、吸出原培養(yǎng)液；
2、加入2ml左右PBS，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶潤(rùn)洗細(xì)胞,吸出PBS丟棄；
3、加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液（含EDTA），輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使之浸潤(rùn)所有細(xì)胞；
4、放入培養(yǎng)箱消化，顯微鏡下看到細(xì)胞塊中間的細(xì)胞明顯變圓有間隙時(shí)可終止，全程不要拍打培養(yǎng)瓶；
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化，吹打細(xì)胞使之脫壁并在液體里反復(fù)吹打使細(xì)胞盡量呈單顆細(xì)胞的懸浮液；
6、收集細(xì)胞懸液離心，1200rpm/min 3分鐘，離心完吸出上清丟棄；
7、加入新鮮培養(yǎng)基，吹打幾下混勻細(xì)胞即可，按比例接種到新培養(yǎng)瓶，補(bǔ)足培養(yǎng)基，擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進(jìn)行培養(yǎng)。
傳代比例（密度） 1:2-1:4
換液頻次 2~3次/周
倍增時(shí)間 ~52 hours
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