"A-875 epithelioid cells人黑色素瘤細胞系
細胞背景資料：NGF受體陽性。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
貼壁細胞的消化方法介紹：１、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在０.２５-０.５%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。０.２５%的胰酶作用于單層貼壁的細胞，在３７度條件下，一般消化１-５分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-２０度。２、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養(yǎng)時，從組織消化下細胞。這種方法作用溫和，對細胞損傷較小，但是，價格也較貴。中止同樣是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在０.０２%左右。作用于細胞與間質(zhì)，對細胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時應調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來的細胞要洗一遍。４、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大，但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。５、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。６、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理，我想是因細胞冷凍后收縮，從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是：對細胞損傷小，不需要中止或洗細胞，方便，不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊，又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng)，效果非常滿意。具體過程是：１、用較多的４度的PBS 洗滌一遍細胞(以６孔板為例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，靜置操作臺上，很快細胞就小片脫落，３、輕輕吹打，細胞即完全脫落，４、按一定比例傳代。
Mc Coy細胞系相關產(chǎn)品：FHs74 Int細胞、526細胞、KASUMI1細胞
Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞系相關產(chǎn)品：HeLa S-3細胞、RPMI-8402細胞、G-Olig2細胞
Calu 3細胞系相關產(chǎn)品：MV-1-Lu細胞、SW780細胞、RT4-D6-P2T細胞
細胞生長：貼壁
A-875 epithelioid cells人黑色素瘤細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代的一般方法：開始細胞傳代前，仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全：一般主要有：細胞(單層細胞，鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-０.２%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或１９９等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液（１萬單位）、７.５％NaHC０３溶液、０.２５％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(１００m１)、克氏瓶、膠塞、吸管(１０ml、１m１）、細胞吹打管（２０ml）(以上用具需經(jīng)１２１℃至少１５分鐘高壓滅菌)、C０２ 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、４℃、-２０℃冰箱；操作步驟：鏡檢細胞，挑選生長狀態(tài)良好，細胞界限清晰，具有立體感，形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液：按以下配比配制MEM-０.２%LH培養(yǎng)液１００ml內(nèi)，加入滅活小牛血清１０m１，慶大霉素溶液０.３m１，７.５%碳酸鈉溶液３ml。（僅供一般參考）。消化細胞；先用PBS洗液沖洗細胞表面１-２次，每次１０m１，棄去洗液，向細胞瓶內(nèi)加入０.２５％胰蛋白酶溶液，每瓶１m１，細胞瓶平放，使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入１０m１細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞，按所需的傳代比例分裝于小方瓶(１００m１)中，再加入１０m１細胞培養(yǎng)液重復吹打一次后分裝，然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞，置于３７±１℃孵箱培養(yǎng)。約２～４天成片。(由細胞接種濃度決定)；填寫傳代記錄。
細胞傳代方法：１：３傳代；３-４天１次。
VMRCLCD細胞系相關產(chǎn)品：L-5178-Y-R細胞、PaTu-8988s細胞、Astrocyte type I clone細胞
MPP 89細胞系相關產(chǎn)品：KY180細胞、Sp 2/0-Ag 14細胞、INS1細胞
SAS細胞系相關產(chǎn)品：GA-10-Clone-4細胞、NPA細胞、H-650細胞
HS-68細胞系相關產(chǎn)品：HCC-1438細胞、CCD-112 CoN細胞、ChaGo-K-1細胞
PC 12細胞系相關產(chǎn)品：RPMI-2650細胞、RPMI 6666細胞、SKN-SH細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
A-875 epithelioid cells人黑色素瘤細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
細胞形態(tài)特性：多角形
造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié)：細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染，大多數(shù)較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢？我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?！具`規(guī)操作】１)為節(jié)省時間，有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時，不開紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開始試驗；２)器材或者溶液很久沒用，未檢測是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺不點酒精燈；點了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗；４)不帶手套，徒手操作；５)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術器械、離心機、冰箱等專用儀器設備以及專用的實驗服和拖鞋，未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°C高壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺和桌面，東西太多太亂：超凈臺不是儲物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺！這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞！一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里，細胞就會養(yǎng)的不好，啥時候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染，如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒了要記得加，還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?！緜鞔毎硕嗫陔s，難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室，實驗服當風衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細胞污染；超凈臺做實驗時，喜歡說話聊著做試驗，要是還不帶口罩，里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢！
KE-39細胞系相關產(chǎn)品：Hs706T細胞、SUP-B1細胞、T47D:A細胞
Pro-5 Lec1.3c細胞系相關產(chǎn)品：HuH28細胞、VM Cub 1細胞、HS-294T細胞
IPLB-Sf21AE細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H378細胞、NCI-SNU-520細胞、hFOB細胞
OVSAHO細胞系相關產(chǎn)品：WM-266-mel細胞、Hs683T細胞、UWB1.289+BRCA1細胞
COLO824細胞系相關產(chǎn)品：U87MG細胞、G422細胞、H146細胞
MLE12細胞系相關產(chǎn)品：KATO 3細胞、Hs 606.T細胞、SK-ES1細胞
KB細胞系相關產(chǎn)品：T-ALL1細胞、H-2171細胞、SUM-159PT細胞
KM12-SM細胞系相關產(chǎn)品：143B TK-細胞、Potorous tridactylus Kidney 2細胞、HLFa細胞
Mouse Forestomach Carcinoma細胞系相關產(chǎn)品：MCA 205細胞、GM00346B細胞、Capan-1細胞
IM-9細胞系相關產(chǎn)品：SW948細胞、CPA47細胞、NCL-H548細胞
A-875 epithelioid cells人黑色素瘤細胞系
MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞系相關產(chǎn)品：RINm-5F細胞、3T3-Swiss albino細胞、EBC1細胞
0V-1063細胞系相關產(chǎn)品：A2780S細胞、QGY 7701細胞、JB 6細胞
U2932細胞系相關產(chǎn)品：RL95細胞、Rat-1細胞、HUT-226細胞
GM01232細胞系相關產(chǎn)品：Tu212細胞、32D.3細胞、J82 COT細胞
RPMI8402細胞系相關產(chǎn)品：C-33 A細胞、MDCC MSB1細胞、Rat 1細胞
COLO 320DM細胞系相關產(chǎn)品：4T1.2細胞、R2C細胞、C3H/10T1/2 CL8細胞
COLO 320DM細胞系相關產(chǎn)品：4T1.2細胞、R2C細胞、C3H/10T1/2 CL8細胞
BT 549細胞系相關產(chǎn)品：DU4475細胞、HS-729細胞、Mouse podocyte細胞
NCI-H1437細胞系相關產(chǎn)品：H2141細胞、MV 3細胞、KBM-7/Hap8細胞
MADB-106細胞系相關產(chǎn)品：MNNG/HOS Clone F-5細胞、MUTZ-1細胞、Caov-3細胞
WM 451-Lu細胞系相關產(chǎn)品：HCC2185細胞、H-716細胞、MKN 45細胞
CNE-1細胞系相關產(chǎn)品：HPBALL細胞、SUSM1細胞、IA-LM細胞
RPE-1細胞系相關產(chǎn)品：Human Hepatocyte Line 5細胞、H-1793細胞、HFLS細胞
GM00346細胞系相關產(chǎn)品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞、BT474細胞、HFL-1細胞
CHO cell clone K1細胞系相關產(chǎn)品：HCC-95細胞、SKNSH細胞、HCC9724細胞
H-711細胞系相關產(chǎn)品：GM03570細胞、SNK1細胞、NIT-1細胞
3T6-Swiss albino細胞系相關產(chǎn)品：PC-9/S1細胞、STC-1細胞、G361細胞
BC-PAP細胞系相關產(chǎn)品：NMCG-1細胞、QG56細胞、WM 239A細胞
HCAEC細胞系相關產(chǎn)品：NCIH522細胞、H.Ep.-2細胞、PLC細胞
LN229細胞系相關產(chǎn)品：Hs 870.T細胞、H647ell細胞、Swiss3T3細胞
C33-A細胞系相關產(chǎn)品：OCI-Ly03細胞、A-498細胞、NGP細胞
C22細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR 420細胞、Ca759細胞、NCIH1417細胞
Scott and White No. 13細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H735細胞、MCF-7ADR細胞、NCIH740細胞
University of Arizona Cell Culture-893細胞系相關產(chǎn)品：GM2132細胞、SKBr3細胞、Sp2/O細胞
NR 8383細胞系相關產(chǎn)品：RH-30細胞、SF 539細胞、PLC8024細胞
H2122細胞系相關產(chǎn)品：HTR-8/SV-neo細胞、H2023細胞、RMa-bm細胞
A253細胞系相關產(chǎn)品：RPE-hTERT細胞、ME16C細胞、LED-WiDr細胞
NU-GC-4細胞系相關產(chǎn)品：TK-1細胞、Ramos G6.C10細胞、BERH-2細胞
PG [Human lung carcinoma]細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2009細胞、LWnt3A細胞、CL11細胞
95-D細胞系相關產(chǎn)品：Line 870 Emory University-4細胞、SHP77細胞、SCI1細胞
Panc3_27細胞系相關產(chǎn)品：PG13細胞、Hs 746.T細胞、SVG p12細胞
HPAF細胞系相關產(chǎn)品：Hs 729細胞、SKMEL-24細胞、SNK1細胞
NIH:OVCAR4細胞系相關產(chǎn)品：Ly8細胞、CHL-1細胞、DK-MG細胞
NS1細胞系相關產(chǎn)品：H-889細胞、OVCAR-5細胞、AN3細胞
Hs 895.T細胞系相關產(chǎn)品：DMS 79細胞、SRA01/04細胞、HOP 92細胞
CT 26細胞系相關產(chǎn)品：NCI/ADR-RES細胞、CMT 64細胞、GM-346細胞
SK-RC-39細胞系相關產(chǎn)品：PE/CA-PJ34細胞、BT.549細胞、COR-L51細胞
H1755細胞系相關產(chǎn)品：Panc_04_03細胞、ME180細胞、MDAPCa-2b細胞
DOK細胞系相關產(chǎn)品：GM12878細胞、Nthy ori 3.1細胞、NB-19細胞
HAVSMC細胞系相關產(chǎn)品：HCC95細胞、P3/NS1/1-Ag4-1細胞、Colon-38細胞
IHH4細胞系相關產(chǎn)品：NCTC929細胞、NCI-H1836細胞、VP267細胞
Huh-7.5細胞系相關產(chǎn)品：HEK 293-H細胞、NCI-H510細胞、MA104細胞
ARO81-1細胞系相關產(chǎn)品：IBRS2細胞、Bowes melanoma cells細胞、CoCL2細胞
MFE 280細胞系相關產(chǎn)品：C57 Mouse Tumor 64細胞、SK ES 01細胞、HCC-1833細胞
HCC0078細胞系相關產(chǎn)品：HT144細胞、OVCAR-4細胞、HRCEC細胞
HTh74細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1568細胞、KG1A細胞、KY-50細胞
WiDrTC細胞系相關產(chǎn)品：SNU-251細胞、H-1954細胞、CHO-K1細胞
BNL-HCC細胞系相關產(chǎn)品：Walker 256細胞、Vero細胞、QGY細胞
RKO_AS45細胞系相關產(chǎn)品：NCL-H548細胞、X63-Ag8.653細胞、Saos2細胞
MV-522細胞系相關產(chǎn)品：SUM 102細胞、451-LU細胞、Caki2細胞
3T3-L1 ad細胞系相關產(chǎn)品：D-283 Med細胞、Hs 819.T細胞、H2009細胞
A-875 epithelioid cells人黑色素瘤細胞系
L-929細胞系相關產(chǎn)品：SN12PM6細胞、HANK-1細胞、Hs.27細胞
Z138細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H520細胞、OV1063細胞、OsA-CL細胞
H-1869細胞系相關產(chǎn)品：Tb 1-Lu細胞、YAC細胞、A375細胞
IPLB-SF 21細胞系相關產(chǎn)品：HITT15細胞、Human Epithelioma-2細胞、HOS-MNNG細胞
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