"WM266-4 epithelioid cells人黑素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng)：１.取細(xì)胞的過(guò)程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識(shí)，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對(duì)細(xì)胞不是完全無(wú)毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對(duì)細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會(huì)造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對(duì)細(xì)胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè)，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對(duì)一般人來(lái)說(shuō)，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過(guò)了活細(xì)胞會(huì)受壓過(guò)大，死亡。此外在操作過(guò)程中容易污染，所以不推薦。另一種說(shuō)法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對(duì)細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無(wú)異常。５.細(xì)胞貼壁少的問題：教科書中說(shuō)明凍存細(xì)胞解凍時(shí)１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過(guò)多，細(xì)胞濃度過(guò)低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會(huì)比較大，就會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng)，從以前的資料來(lái)看，DMSO的濃度在小于０.５%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響，還有一個(gè)說(shuō)法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無(wú)害濃度。
C166細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細(xì)胞、NCI-SNU-601細(xì)胞、NCI-H847細(xì)胞
NCIH1373細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H774細(xì)胞、BAR-T細(xì)胞、OVTOKO細(xì)胞
IM-95細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-204細(xì)胞、AMJ2-C8細(xì)胞、JB6 Cl 30-7b細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
WM266-4 epithelioid cells人黑素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長(zhǎng)，用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來(lái)，很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長(zhǎng)得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長(zhǎng)得滿滿的了。想請(qǐng)教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣，消化下來(lái)也是一團(tuán)的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕，避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長(zhǎng)挺快，那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問題我覺得有以下幾種可能：一、細(xì)胞消化后吹打不均勻，造成細(xì)胞成團(tuán)生長(zhǎng)：二、細(xì)胞細(xì)化太過(guò)，細(xì)胞成片脫落，吹打時(shí)沒有受力點(diǎn)，細(xì)胞聚團(tuán)生長(zhǎng)。解決辦法：根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的情況進(jìn)行多次消化，將同次消化下來(lái)的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間，若胰酶處理太久，容易造成細(xì)胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng)，嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn)：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長(zhǎng)，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細(xì)胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
OE-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nthy-ori 3.1細(xì)胞、CTLA4Ig-24細(xì)胞、JM-1細(xì)胞
MODE-K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC-4B細(xì)胞、GM03190A細(xì)胞、H-69細(xì)胞
PG [Human lung carcinoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2009細(xì)胞、LWnt3A細(xì)胞、CL11細(xì)胞
HuLEC-5a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AG06814-M細(xì)胞、OCI-AML-5細(xì)胞、NBLAN5T細(xì)胞
MV-4:11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-159-PT細(xì)胞、FHs74 Int細(xì)胞、H-1755細(xì)胞
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
WM266-4 epithelioid cells人黑素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說(shuō)明書
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點(diǎn)：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會(huì)把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動(dòng)作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時(shí)間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時(shí)候是傳代的原因；３)有時(shí)間的話，需要細(xì)胞計(jì)數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線，不會(huì)臨時(shí)要處理，手足無(wú)措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時(shí)間，傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時(shí)間，也不會(huì)耽誤別人的實(shí)驗(yàn)；５)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對(duì)待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無(wú)菌操作，多噴噴酒精，要是對(duì)滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測(cè)；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動(dòng)加濕的話盤里的水也會(huì)很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺(tái)是用完就開；６)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
U-CH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL33細(xì)胞、Rin-M-5F細(xì)胞、CT26WT細(xì)胞
A3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-763細(xì)胞、X63-Ag8-653細(xì)胞、NPA87細(xì)胞
MESSA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M109細(xì)胞、KYSE-70細(xì)胞、L1210細(xì)胞
H-EMC-SS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BSC-40細(xì)胞、HS 683T細(xì)胞、U-373 MG細(xì)胞
U251MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3AO細(xì)胞、Cattle chondrocytes細(xì)胞、MCF10A細(xì)胞
COLO678細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30 OHK細(xì)胞、PANC403細(xì)胞、H9細(xì)胞
Tb 1 Lu (NBL-12)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMM-5A細(xì)胞、SU-DHL-2細(xì)胞、RASMCs細(xì)胞
H-1437細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-64細(xì)胞、L02細(xì)胞、PA-TU S細(xì)胞
CNE-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT15細(xì)胞、RMC-1細(xì)胞、MDA-330細(xì)胞
MNNG-HOS (Cl#5)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P31-FUJ細(xì)胞、HCGC細(xì)胞、Hi-5細(xì)胞
WM266-4 epithelioid cells人黑素瘤細(xì)胞系
NPC-TW-039細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB231細(xì)胞、OV433細(xì)胞、LWnt3A細(xì)胞
CAL 85-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細(xì)胞、HIBEpiC細(xì)胞、SCC-7細(xì)胞
Ramos 2G6.4C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NSI/1-Ag4-1細(xì)胞、Hx147細(xì)胞、no.11細(xì)胞
HC11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM6細(xì)胞、HEC-251細(xì)胞、NUGC4細(xì)胞
K299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL34細(xì)胞、H-2347細(xì)胞、NK-92細(xì)胞
Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs600T細(xì)胞、NCI-SNU-182細(xì)胞、NRK clone 52E細(xì)胞
Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs600T細(xì)胞、NCI-SNU-182細(xì)胞、NRK clone 52E細(xì)胞
NCIH2073細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCECs細(xì)胞、L23/P細(xì)胞、ECC1細(xì)胞
Hs-852-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-343MG細(xì)胞、H-295R細(xì)胞、ACC2細(xì)胞
HEK 293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM266細(xì)胞、PaTu8988s細(xì)胞、LN382細(xì)胞
RPMI-6666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKG3A細(xì)胞、MC-116細(xì)胞、Madin-Darby Bovine Kidney細(xì)胞
NCIH196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YES 2細(xì)胞、AZ521細(xì)胞、ZR75-1細(xì)胞
HEK 293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ESC-410細(xì)胞、LC-1/sq細(xì)胞、RGC5細(xì)胞
SW 48細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCe-8693細(xì)胞、MFHL-2細(xì)胞、Detroit-562細(xì)胞
H341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MTEC1細(xì)胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細(xì)胞、MDAMB435細(xì)胞
H1666_DA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RK13細(xì)胞、NCI-SNU-387細(xì)胞、ARO細(xì)胞
SU.86.86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D6P2T細(xì)胞、U031細(xì)胞、IMR90細(xì)胞
RT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-118-MG細(xì)胞、OLN 93細(xì)胞、SVOG細(xì)胞
SW962細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375.S2細(xì)胞、HTR-8/SVneo細(xì)胞、3T6-Swiss albino細(xì)胞
C3H10T1/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1573細(xì)胞、PCI-04B細(xì)胞、HCEpiC細(xì)胞
GM2131細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT-112細(xì)胞、P3-X63-Ag8-6-5-3細(xì)胞、PIEC細(xì)胞
SNK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 966SK細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細(xì)胞、H-2085細(xì)胞
WM 239-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCP1細(xì)胞、H-2106細(xì)胞、TE353.SK細(xì)胞
Ra No. 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 852.T細(xì)胞、Li-7細(xì)胞、TCC-SUP細(xì)胞
PC-3M-1E8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-4細(xì)胞、ARH 77細(xì)胞、QBI-293A細(xì)胞
M210B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-20細(xì)胞、NCIH358細(xì)胞、H-920細(xì)胞
C3H/10T1/2-clone8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSF細(xì)胞、SW-962細(xì)胞、NSC-34細(xì)胞
RAW264細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TYK-nu細(xì)胞、CD18細(xì)胞、HIEC6細(xì)胞
FDC-P1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT-93細(xì)胞、NCTC clone 929細(xì)胞、COLO 829細(xì)胞
HCC2157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR-32細(xì)胞、Panc10.05細(xì)胞、OV433細(xì)胞
OSRC2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GL261細(xì)胞、Hep 3B2.1-7細(xì)胞、CA-OV-3細(xì)胞
GalK 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Homo sapiens No. 578, breast cells細(xì)胞、HEB細(xì)胞、WiDr細(xì)胞
C8166-CD4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KRCY細(xì)胞、CAL 27細(xì)胞、SMMC 7721細(xì)胞
Hs 27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-13細(xì)胞、A101D細(xì)胞、HEP-3B2細(xì)胞
Hs 683細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RDES細(xì)胞、Hs606細(xì)胞、HuH-6細(xì)胞
SN12CPM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SV40-HCEC細(xì)胞、COLO 320HSR細(xì)胞、Hs-274-T細(xì)胞
BEL-7404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CO115細(xì)胞、RPMI.8226細(xì)胞、High5細(xì)胞
OCI/AML3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hRMECs細(xì)胞、Fetal Bovine Heart Endothelial細(xì)胞、PC.3細(xì)胞
AZ521細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T6 Swiss Albino細(xì)胞、X63Ag8-653細(xì)胞、Uhth-74細(xì)胞
CHO-ori細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FL 62891細(xì)胞、X63-Ag 8.6.5.3細(xì)胞、HCASMC細(xì)胞
HIT-T15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMA560細(xì)胞、H747細(xì)胞、SNU886細(xì)胞
CCD 966 SK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780 CP70細(xì)胞、149PT細(xì)胞、BE2-C細(xì)胞
PL-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE-29細(xì)胞、NCIH508細(xì)胞、NPC-039細(xì)胞
OCIAML5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Leukemia 1210細(xì)胞、HS-294細(xì)胞、HEL-92-1-7細(xì)胞
U-87 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAC細(xì)胞、L-6TG細(xì)胞、ST 486細(xì)胞
MDA-MB-435S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs_578t細(xì)胞、EoL-1 cell細(xì)胞、G402細(xì)胞
786O細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 1細(xì)胞、NCI/ADR-RES細(xì)胞、NCI-H441-4細(xì)胞
HANK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJAB-1細(xì)胞、HCT/FU細(xì)胞、SUP-B1細(xì)胞
PT-K75細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KBM5細(xì)胞、NCIH548細(xì)胞、HMVEC細(xì)胞
NCIH2405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-865細(xì)胞、SHG 44細(xì)胞、143TK-細(xì)胞
CT 26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI/ADR-RES細(xì)胞、CMT 64細(xì)胞、GM-346細(xì)胞
WM266-4 epithelioid cells人黑素瘤細(xì)胞系
H-209細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：253J-BV細(xì)胞、UCLA RO-81A-1細(xì)胞、KS-1 [Human glioblastoma]細(xì)胞
ME-180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16BL-6細(xì)胞、Immortal Pig Intestinal-2I細(xì)胞、HCC-4006細(xì)胞
UO-31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Kidney-2細(xì)胞、GM637A細(xì)胞、LM8細(xì)胞
MESSA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M109細(xì)胞、4-1st細(xì)胞、HL-60 Clone 15細(xì)胞
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