"KYSE-140 Cell:人食管鱗癌細(xì)胞系 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞生長:貼壁 細(xì)胞背景資料:食管鱗癌細(xì)胞;男性 NCIH2141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Large Cell Lung Cancer-103H細(xì)胞、BJAB-1細(xì)胞、MESSA-DX5細(xì)胞 HcaF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H8細(xì)胞、YD-15細(xì)胞、RT-112細(xì)胞 MC3T3-E1 Subclone 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCF細(xì)胞、H184A1細(xì)胞、CAL 148細(xì)胞 INS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-8細(xì)胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞、MRCV細(xì)胞 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 KYSE-140 Cell:人食管鱗癌細(xì)胞系 如何把細(xì)胞養(yǎng)的形態(tài)更好更漂亮。1.不同的細(xì)胞,喜歡的環(huán)境是不一樣的。這個不僅僅是說培養(yǎng)基的不同,還有就是細(xì)胞生長的空間密度問題。有一些細(xì)胞是數(shù)量多一點(diǎn)比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細(xì)胞。譬如內(nèi)皮細(xì)胞。而有一些是細(xì)胞是數(shù)量少一點(diǎn)細(xì)胞狀態(tài)會生長的比較好,譬如巨噬細(xì)胞和某些腫瘤細(xì)胞。尤其是巨噬細(xì)胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應(yīng)該留很少量的細(xì)胞,這樣細(xì)胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細(xì)胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細(xì)胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實(shí)驗(yàn)結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細(xì)胞的時候應(yīng)該摸索該細(xì)胞喜歡的生長空間密度問題。2.對于有些人總是會遇到養(yǎng)的細(xì)胞形態(tài)怎么都不好的問題。這個其實(shí)是有一個方法可以改善的。對于貼壁細(xì)胞,如果細(xì)胞形態(tài)不好,(或者細(xì)胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進(jìn)行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進(jìn)行預(yù)吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細(xì)胞我們只吹打,不消化的);其次,把吹打下來的細(xì)胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時間點(diǎn)觀察細(xì)胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點(diǎn),已經(jīng)有部分細(xì)胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細(xì)胞生長情況以及形態(tài)。我稱之為“二傳”。呵呵。如果一次效果還不理想,可重復(fù)多次。直到找到細(xì)胞完美形態(tài)。其中要注意,結(jié)合細(xì)胞喜歡的生長情況。喜歡多一點(diǎn)數(shù)量長得好的細(xì)胞你就等貼壁細(xì)胞比較多點(diǎn)的時候再傳。反之亦然。3.關(guān)于培養(yǎng)瓶內(nèi)加入培養(yǎng)基的量的問題。這個是要靠自己去摸索你所養(yǎng)的細(xì)胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml,大方瓶14ml的。有些細(xì)胞反而是培養(yǎng)基少一點(diǎn)相反細(xì)胞形態(tài)會長得比較好。(可能也是競爭很大,有優(yōu)勝劣汰吧。呵呵。)對于生長速度快的細(xì)胞,易生長的細(xì)胞加少一點(diǎn)培養(yǎng)基細(xì)胞形態(tài)會更好。但是要注意換液掌握。4.關(guān)于選擇培養(yǎng)瓶的問題。個人發(fā)現(xiàn)生長速度快的細(xì)胞在玻璃瓶內(nèi)生長的狀態(tài)會比一次性相對好一些。而對于同一種細(xì)胞,在其生長旺盛快速的時期在玻璃瓶內(nèi)的生長狀態(tài)也比內(nèi)好。這可能是因?yàn)楸炔A扛菀踪N壁。生長速度快的細(xì)胞在這種相對“更安逸”的環(huán)境里反而長得狀態(tài)不如玻璃瓶好。所以對于生長速度慢的細(xì)胞如果想要更漂亮的細(xì)胞狀態(tài),比玻璃瓶會好,對于生長速度慢的細(xì)胞,玻璃瓶則會更好。同樣,對于同一種細(xì)胞,在其生長速度慢的時候,會好一點(diǎn),比如剛剛復(fù)蘇的時候,或者原代培養(yǎng)的時候。而在其生長旺盛的時候,玻璃瓶則相對會好一點(diǎn)。 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng):1)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細(xì)胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會跟進(jìn)解決;2)貼壁細(xì)胞生長緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細(xì)胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重懸打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 NE-4C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK-136細(xì)胞、rRMECs細(xì)胞、NuTu-19細(xì)胞 SK 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo-206F細(xì)胞、SW 756細(xì)胞、Hep 3B2細(xì)胞 Pa18C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-766T細(xì)胞、BSC40細(xì)胞、NCI-441細(xì)胞 NCI-HUT-292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2291細(xì)胞、H322T細(xì)胞、SUDHL4細(xì)胞 SNU-886細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuDHL 2細(xì)胞、RBL 1細(xì)胞、MIN-6細(xì)胞 細(xì)胞生長特性:貼壁 KYSE-140 Cell:人食管鱗癌細(xì)胞系 貼壁消化難題:1,先用PBS 把細(xì)胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細(xì)胞有些消化下來時,拿著瓶口,運(yùn)用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細(xì)胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團(tuán)、絮狀:消化液里加入edta可以減少細(xì)胞成團(tuán)的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進(jìn)口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細(xì)胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話,一般不需要進(jìn)行離心。鼻咽癌細(xì)胞的貼壁能力很強(qiáng),用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細(xì)胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強(qiáng))至細(xì)胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細(xì)胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細(xì)胞很多且需要大量細(xì)胞實(shí)驗(yàn),則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細(xì)吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細(xì)胞聚集成團(tuán)塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細(xì)胞或細(xì)胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細(xì)胞,收集全部的細(xì)胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細(xì)胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉! 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書 AE 1201細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly10細(xì)胞、L-5178-Y細(xì)胞、SNU-1040細(xì)胞 SN12CPM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SV40-HCEC細(xì)胞、COLO 320HSR細(xì)胞、Hs-274-T細(xì)胞 OCI-Ly7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK 49F細(xì)胞、HFT 8810細(xì)胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細(xì)胞 SK MEL 28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fetal Human Colon細(xì)胞、NP69細(xì)胞、HREC細(xì)胞 GM03320D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TK.10細(xì)胞、HLEB3細(xì)胞、RH35細(xì)胞 RN-c細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BSC-1細(xì)胞、X63細(xì)胞、NTERA-2細(xì)胞 HSKMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C8166-CD4細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細(xì)胞、SIRC細(xì)胞 KYSE-140 Cell:人食管鱗癌細(xì)胞系 H2108細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-13細(xì)胞、H-2405細(xì)胞、NCIH69細(xì)胞 H-1944細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNB.19細(xì)胞、H-35細(xì)胞、Rat 2細(xì)胞 OE21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H508細(xì)胞、ECV304細(xì)胞、H64細(xì)胞 Vx-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuPT3細(xì)胞、GL-261細(xì)胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細(xì)胞 U14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IFRS1細(xì)胞、DR2R 1610細(xì)胞、H-1838細(xì)胞 SF 539細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU739細(xì)胞、HTR-8/SV-neo細(xì)胞、NH6細(xì)胞 FRTL-5 Cl 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63Ag8.653細(xì)胞、HUCEC細(xì)胞、MCF-7/AdrR細(xì)胞 CAL-62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:mRMEC細(xì)胞、KYSE180細(xì)胞、HS766T細(xì)胞 BTT739細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-937細(xì)胞、H1869細(xì)胞、My-La 2059細(xì)胞 BTT739細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-937細(xì)胞、H1869細(xì)胞、My-La 2059細(xì)胞 PCI-SG231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT1376細(xì)胞、DU-145細(xì)胞、DF1細(xì)胞 K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:McCoy B細(xì)胞、PLA-802細(xì)胞、PNEC30細(xì)胞 BCP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M4e細(xì)胞、SK-CO-1細(xì)胞、IOSE29細(xì)胞 HBVP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1793細(xì)胞、Panc-8_13細(xì)胞、Reuber H35細(xì)胞 PANC0403細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-540細(xì)胞、RGE細(xì)胞、A704細(xì)胞 DHL-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS-1細(xì)胞、CAL-51細(xì)胞、PTK 2細(xì)胞 ACC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:4T1-LUC細(xì)胞、HRA 19細(xì)胞、SUM-149細(xì)胞 TW 01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A20細(xì)胞、ECC-1細(xì)胞、SC細(xì)胞 NCI-H1975細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-174細(xì)胞、H-889細(xì)胞、Jurkat-E6細(xì)胞 NTERA-2cl.D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHBE細(xì)胞、MDA PCa 2b細(xì)胞、KCL22S細(xì)胞 P3/X63/Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-5細(xì)胞、CTLL2細(xì)胞、CD18/HPAF細(xì)胞 P3/X63/Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-5細(xì)胞、CTLL2細(xì)胞、CD18/HPAF細(xì)胞 FDCP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M21細(xì)胞、HCC1599細(xì)胞、GT1-1細(xì)胞 KU812-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:639V細(xì)胞、B35細(xì)胞、Pro-5 Lec1.3c細(xì)胞 HHUA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266BL細(xì)胞、Hs-578Bst細(xì)胞、NK92-MI細(xì)胞 Danio rerio Gill細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKG-3a細(xì)胞、343MG細(xì)胞、FHs74Int細(xì)胞 CEM-CCRF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLC-8024細(xì)胞、A7r5細(xì)胞、COLO 320HSR細(xì)胞 IEC 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H865細(xì)胞、H4細(xì)胞、Hs 606.T細(xì)胞 HCEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HARAB細(xì)胞、VSC4.1細(xì)胞、B104 [Rat neuroblastoma]細(xì)胞 Wien 133細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1404細(xì)胞、KLM-1細(xì)胞、MNNG細(xì)胞 Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS940細(xì)胞、S.B.細(xì)胞、Ca761細(xì)胞 NCI-H820細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P31/FUJ細(xì)胞、Caco 2細(xì)胞、HHUA細(xì)胞 SK-MEL24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGROV 1細(xì)胞、EFM192B細(xì)胞、COLO-1細(xì)胞 HR1K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB6 Cl 30-7b細(xì)胞、TM-4細(xì)胞、IB-RS2細(xì)胞 SW 620細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-650細(xì)胞、SKMEL2細(xì)胞、Hs695細(xì)胞 CWR22R-V1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLE-SRA-01/04細(xì)胞、NG-108-15細(xì)胞、CAL12T細(xì)胞 ABC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1869細(xì)胞、L 363細(xì)胞、NCIH1930細(xì)胞 IOSE29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C32r細(xì)胞、SCC7細(xì)胞、CORL26細(xì)胞 Super Tube細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCCVII/St細(xì)胞、COR-L23/P細(xì)胞、TE5細(xì)胞 H125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLM16細(xì)胞、LLC-WRC 256細(xì)胞、RPPVEC細(xì)胞 H125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLM16細(xì)胞、LLC-WRC 256細(xì)胞、RPPVEC細(xì)胞 SW-837細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3HR-1細(xì)胞、WM451Lu細(xì)胞、TCam-2細(xì)胞 NCI-H1299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L23細(xì)胞、Madison 109細(xì)胞、C643細(xì)胞 KYSE-140 Cell:人食管鱗癌細(xì)胞系 DLD 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3細(xì)胞、MCF-12A細(xì)胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細(xì)胞 H524細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MN-60細(xì)胞、H1781細(xì)胞、GM3569細(xì)胞 OCI AML5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1693細(xì)胞、Hs-688A-T細(xì)胞、X63Ag8.653細(xì)胞 HLF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-T6細(xì)胞、NCI-H774細(xì)胞、SW-1222細(xì)胞 PM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1694細(xì)胞、hEEC細(xì)胞、HCT116細(xì)胞 C127細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M 1細(xì)胞、PTK 1細(xì)胞、TE6細(xì)胞 MIA-PaCa-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Dakiki細(xì)胞、HSC3細(xì)胞、HCPEpiC細(xì)胞 GLRK 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IB-RS-2細(xì)胞、RCC_7860細(xì)胞、67NR細(xì)胞 MDA-1386細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:786-0細(xì)胞、VMM-5A細(xì)胞、SK BR 03細(xì)胞 NS1/1-Ag4.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JEG-3細(xì)胞、SW 839細(xì)胞、MCF-7ADR細(xì)胞 IPLB-SF 21AE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKO3細(xì)胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細(xì)胞、HCC-2108細(xì)胞 PCI:SG-231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-ES1細(xì)胞、A20細(xì)胞、FLC7細(xì)胞 "
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