"MOLP-2 Cell:人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞背景資料：骨髓瘤；男性
HT-22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC 70細(xì)胞、Lewis lung carcinoma line 1細(xì)胞、Walker 256細(xì)胞
SK-N-FI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tb 1 Lu細(xì)胞、P3/X63/Ag8細(xì)胞、MCF 10A細(xì)胞
PIG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L78細(xì)胞、FTC133細(xì)胞、SKMEL24細(xì)胞
SKGIIIA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Strain L-929細(xì)胞、MDAMB415細(xì)胞、H1672細(xì)胞
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
MOLP-2 Cell:人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞系
細(xì)胞傳代時(shí)消化的問(wèn)題：可以這樣說(shuō)，對(duì)于需要消化傳代的細(xì)胞，每一次的消化都是對(duì)這個(gè)細(xì)胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗(yàn)。很多同學(xué)都遇到過(guò)這個(gè)問(wèn)題，自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長(zhǎng)的還挺好的，可是穿過(guò)幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞，狀態(tài)越來(lái)越差勁了。對(duì)于這個(gè)問(wèn)題，可以非?？隙ǖ卣f(shuō)，你的消化環(huán)節(jié)出問(wèn)題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以，越長(zhǎng)越差。在消化的過(guò)程中，你加入胰酶后，所有細(xì)胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個(gè)問(wèn)題就是，細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)是不一樣的，每一個(gè)細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒(méi)有那么牢固的，所以，讓所有的細(xì)胞消化同樣的時(shí)間對(duì)細(xì)胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會(huì)有脾氣啊。我后來(lái)對(duì)消化的方法進(jìn)行了改良。爭(zhēng)取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細(xì)胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來(lái)。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過(guò)的細(xì)胞對(duì)比觀察看誰(shuí)長(zhǎng)的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對(duì)胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶?jī)?nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤(rùn)洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時(shí)置于顯微鏡下觀察，待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時(shí)候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對(duì)比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來(lái)的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細(xì)胞間隙明顯，細(xì)胞獨(dú)立開來(lái)的時(shí)候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實(shí)際情況你自己把握）。這是第四步。其實(shí)還可以有第五步，對(duì)于特別難消化的細(xì)胞和對(duì)胰酶特別敏感的細(xì)胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細(xì)胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒(méi)辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷降到最低，保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了，如果細(xì)胞是屬于那種很容易消化的細(xì)胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒(méi)必要第三步第四步了。這個(gè)是需要你在實(shí)驗(yàn)中能夠自己用心去體會(huì)的。建議你接受一個(gè)新細(xì)胞時(shí)把各步消化的細(xì)胞分別培養(yǎng)起來(lái)做比較，去摸索好細(xì)胞對(duì)胰酶的要求。便于你后續(xù)實(shí)驗(yàn)的開展。將細(xì)胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷之外，還有一個(gè)更重要的作用就是，可以程度地把細(xì)胞吹打成單個(gè)單個(gè)的狀態(tài)，不成片不連體。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點(diǎn)：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會(huì)把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動(dòng)作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時(shí)間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時(shí)候是傳代的原因；３)有時(shí)間的話，需要細(xì)胞計(jì)數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線，不會(huì)臨時(shí)要處理，手足無(wú)措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時(shí)間，傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時(shí)間，也不會(huì)耽誤別人的實(shí)驗(yàn)；５)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對(duì)待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無(wú)菌操作，多噴噴酒精，要是對(duì)滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測(cè)；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動(dòng)加濕的話盤里的水也會(huì)很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺(tái)是用完就開；６)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
2V6.11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-Sf21AE細(xì)胞、NCIH1299細(xì)胞、WC00044細(xì)胞
3T3 Swiss Albino細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVTOKO細(xì)胞、BNL CL2細(xì)胞、CCK81細(xì)胞
NCI-H441-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1975細(xì)胞、BNL.1ME A.7R.1細(xì)胞、Human Corneal Endothelial Cells-12細(xì)胞
KM12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Farage Original Line細(xì)胞、NCI-H165細(xì)胞、SW-839細(xì)胞
NCIH1819細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CW2細(xì)胞、SUM52PE細(xì)胞、SVEC 4-10細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：懸浮
MOLP-2 Cell:人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞系
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng)：１.取細(xì)胞的過(guò)程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問(wèn)題：凍存液的配置已是常識(shí)，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對(duì)細(xì)胞不是完全無(wú)毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對(duì)細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會(huì)造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對(duì)細(xì)胞的損傷。４.離心問(wèn)題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè)，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對(duì)一般人來(lái)說(shuō)，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過(guò)了活細(xì)胞會(huì)受壓過(guò)大，死亡。此外在操作過(guò)程中容易污染，所以不推薦。另一種說(shuō)法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對(duì)細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無(wú)異常。５.細(xì)胞貼壁少的問(wèn)題：教科書中說(shuō)明凍存細(xì)胞解凍時(shí)１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問(wèn)題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過(guò)多，細(xì)胞濃度過(guò)低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問(wèn)題：這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問(wèn)題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會(huì)比較大，就會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng)，從以前的資料來(lái)看，DMSO的濃度在小于０.５%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒(méi)有什么影響，還有一個(gè)說(shuō)法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無(wú)害濃度。
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說(shuō)明書
Kelly細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OSC19細(xì)胞、CHL-IU細(xì)胞、CCD-1095Sk細(xì)胞
IEC-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AdHek細(xì)胞、OCI-LY-7細(xì)胞、Hs 839.T細(xì)胞
32D-Cl3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FT-293細(xì)胞、Co 115細(xì)胞、H1581細(xì)胞
CAL33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-1846細(xì)胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細(xì)胞、F-81細(xì)胞
MRC 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE2-C細(xì)胞、PE CA PJ34細(xì)胞、RC-4B細(xì)胞
NCI-BL1339細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Neuro-2a細(xì)胞、Tb 1-Lu細(xì)胞、NCTC1469細(xì)胞
MyLa 2059細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16 melanoma細(xì)胞、KYSE 520細(xì)胞、mRTEC細(xì)胞
MOLP-2 Cell:人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞系
NCI-H1836細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GRSL細(xì)胞、WM 266-4細(xì)胞、Jurkat 77細(xì)胞
CV-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 1112SK細(xì)胞、HCPEpiC細(xì)胞、WiDrTC細(xì)胞
HEK-AD293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KASUMI1細(xì)胞、ROS1728細(xì)胞、LA-N-5細(xì)胞
NCIH1105細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ST 486細(xì)胞、CT26.WT細(xì)胞、H-1299細(xì)胞
H-2081細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK 15細(xì)胞、NuTu-19細(xì)胞、HCC-1569細(xì)胞
SW 527細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMUC-3細(xì)胞、H1435細(xì)胞、A375-S2細(xì)胞
VP 229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-680N細(xì)胞、BTI-Tn-5B1-4細(xì)胞、UM-UC3細(xì)胞
MKN-74細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMS 1598細(xì)胞、IHHA-1細(xì)胞、alpha-TC1-6細(xì)胞
PANC0327細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3 L1細(xì)胞、EU-2細(xì)胞、Granta-519細(xì)胞
NCI-H1105細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1694細(xì)胞、RKO-E6細(xì)胞、Sup T-1細(xì)胞
MES-SA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-12A細(xì)胞、SUNE 1細(xì)胞、6-10B細(xì)胞
2PK3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH 3T6細(xì)胞、Lewis-Lung細(xì)胞、NTERA2D1細(xì)胞
RS 4;11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC5細(xì)胞、H-1404細(xì)胞、D-341 Med細(xì)胞
HL7702細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAFII細(xì)胞、MCAEC細(xì)胞、H-1373細(xì)胞
NFHIOSE-80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細(xì)胞、RBL2H3細(xì)胞、COLO394細(xì)胞
H-747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPC-Y5細(xì)胞、H727細(xì)胞、VMRC-LCD細(xì)胞
VMM39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A498細(xì)胞、SK-ML2細(xì)胞、KCL22細(xì)胞
Co 205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs1.Tes細(xì)胞、KNS81細(xì)胞、KYSE 270細(xì)胞
293AD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AHH-1細(xì)胞、GC-1spg細(xì)胞、UCLA-SO-14細(xì)胞
GM03320D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TK.10細(xì)胞、HLEB3細(xì)胞、RH35細(xì)胞
RPMI7951細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(2)-C細(xì)胞、HT144細(xì)胞、TGW-nu細(xì)胞
PA I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00637H細(xì)胞、P3J.HR1K細(xì)胞、EU-2細(xì)胞
CL MC/9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFL 1細(xì)胞、Walker256-TC細(xì)胞、NOR-10細(xì)胞
A-431細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL95-2細(xì)胞、Raji細(xì)胞、SKBR-3細(xì)胞
Hs940T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A549/ATCC細(xì)胞、OCI AML5細(xì)胞、SGC-996細(xì)胞
H1650_CO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNGM細(xì)胞、SW948細(xì)胞、H295R細(xì)胞
HEC251細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL1-0細(xì)胞、IHH4細(xì)胞、MDA453細(xì)胞
SW527細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：R3/1細(xì)胞、P3/NS-1細(xì)胞、RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細(xì)胞
BC3 H1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-27細(xì)胞、Los Angeles Prostate Cancer-4細(xì)胞、LAC細(xì)胞
SCH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUP T1細(xì)胞、Metastatic Variant 522細(xì)胞、DoHH-2細(xì)胞
751-NA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFO27細(xì)胞、HeLa.S3細(xì)胞、138MG細(xì)胞
UPCI:SCC154細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK1細(xì)胞、Lu99A細(xì)胞、HSC3細(xì)胞
LM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1500細(xì)胞、UCLA-SO-M14細(xì)胞、H-35細(xì)胞
QGP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALB 3T3 clone A31細(xì)胞、HSC-1細(xì)胞、JB6 Cl 30細(xì)胞
WM266細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KE-39細(xì)胞、NTERA2-cloneD1細(xì)胞、293EBNA細(xì)胞
NHLF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：149PT細(xì)胞、A-1847細(xì)胞、Anglne細(xì)胞
ROS 17/28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-427細(xì)胞、BpRcl細(xì)胞、Ly19細(xì)胞
T47-D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L 1210細(xì)胞、EFM-19細(xì)胞、CAL 33細(xì)胞
SiHa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 620細(xì)胞、HCT8細(xì)胞、A.704細(xì)胞
ARH-77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RFL-6細(xì)胞、NCI-N87細(xì)胞、HEK/EBNA細(xì)胞
C2-C12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AQ-Mel細(xì)胞、WEHI3細(xì)胞、KYSE-450細(xì)胞
D407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-3細(xì)胞、IB-RS-2細(xì)胞、Panc5.04細(xì)胞
Karpas-422細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon 38細(xì)胞、T.T細(xì)胞、Caco-2/ATCC細(xì)胞
MOLP-2 Cell:人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞系
BLO-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3-Swiss細(xì)胞、MCF 7B細(xì)胞、16HBE細(xì)胞
A-673細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2085細(xì)胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細(xì)胞、KG-1a細(xì)胞
Rat Chondrosarcoma Swarm細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL1細(xì)胞、HEK-293A細(xì)胞、MES 23.5細(xì)胞
U266細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV-4-11細(xì)胞、H1993細(xì)胞、AZ-521細(xì)胞
NCIH1838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：High Five細(xì)胞、A-20細(xì)胞、RMS 1598細(xì)胞
Ca Ski細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tb 1 Lu (NBL-12)細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細(xì)胞、D-407細(xì)胞
MDA.MB.435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-cell with DC Morphology細(xì)胞、PCI-4.2細(xì)胞、Liver-02細(xì)胞
SU-86-86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCA 7細(xì)胞、NCIH820細(xì)胞、OVCA8細(xì)胞
H1238細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Dysplastic Oral Keratinocyte細(xì)胞、PC-3M-IE8細(xì)胞、A549-Taxol細(xì)胞
MOVAS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM159PT細(xì)胞、KHYG細(xì)胞、M-O7e細(xì)胞
MOLM-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI N87細(xì)胞、Sol8細(xì)胞、WEHI3B細(xì)胞
RM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH208細(xì)胞、LM-TK-細(xì)胞、Lewis Lung Cancer細(xì)胞
"