"KYSE-140 epithelioid cells人食管鱗癌細胞系
細胞背景資料：食管鱗癌細胞；男性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
貼壁消化難題：１，先用PBS 把細胞洗兩遍，使瓶內(nèi)沒有血清了，減少對胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在細胞有些消化下來時，拿著瓶口，運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體，這樣細胞很快就下來了，還不需要吹打，分散也均勻；２，成團、絮狀：消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象，血清可以終止胰酶的作用，如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清終止，如果消化液中加入了edta的話，就要將消化液倒干凈，如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話，一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基，加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢)，隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗，則不能棄去胰酶)，加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代，否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片)；消化過度：馬上用培養(yǎng)基中和，用吸管吹打細胞，收集全部的細胞到以無菌的離心管中８００RPM ３分鐘。棄上清，用全培重懸，換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)，狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落，在換液的時候可以清除掉！
C33-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly03細胞、A-498細胞、NGP細胞
REC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN-7細胞、HEMCSS細胞、CEM clone 7細胞
JROECL21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OsA-CL細胞、HCMEC(BL12-H)細胞、EBC-1/original細胞
細胞生長：貼壁
KYSE-140 epithelioid cells人食管鱗癌細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享：支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物，大小一般在０.３-０.５um之間，呈高度多形性，有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞，也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色，用姬姆薩染色很淺，革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長，營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到６３%，支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達，又不能通過可視法對其進行檢測，而且它對細胞的生長率影響較小，不易引起注意。國內(nèi)外研究表明，９５%以上是以下四種支原體：口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii)，為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群，但能夠污染細胞的支原體種類是很多的，國外調(diào)查證明，大約有二十多種支原體能污染細胞，有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中，主要從以下幾個方面來預(yù)防支原體的污染：控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作；細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌；在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后，特別是重要的細胞株，有必要清除支原體，常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁，一般來講，對作用于細胞壁生物合成的抗生素，如萬古霉素等完全不敏感；對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用，所以常不用來作為支原體感染的化學治療劑。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
TE-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK MEL 28細胞、MFC細胞、REC-1細胞
LAN-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA-10細胞、HCC941122細胞、HEM-L細胞
LADMAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TO175T細胞、MRC 5細胞、FHCRC subclone 11細胞
SN12-PM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc08.13細胞、CNE-1細胞、108CC15細胞
NCI-H810細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACHN細胞、JB6 Cl 30-7b細胞、H2228細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
KYSE-140 epithelioid cells人食管鱗癌細胞系
細胞生長特性：貼壁
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞接收后的操作流程與注意事項：１)如果細胞為貼壁細胞，而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請將懸浮的細胞即時離心，加１５%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)３天；同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為１５%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)３天。３天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡，請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決；２)貼壁細胞生長緩慢；適當提高血清濃度(最高不能超過２０%)，或可根據(jù)該細胞生長密度，考慮胰酶消化后，轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)；３)生長不均：貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均，成島狀生長，可將細胞進行消化，重懸打散細胞，加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
EMT6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NT-2細胞、OVCAR 4細胞、P3-X63-Ag 8.653細胞
HOS/MNNG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2347細胞、Centre Antoine Lacassagne-51細胞、JROECL19細胞
NCI-H1792細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MA 104細胞、COLO 678細胞、A-375SM細胞
H2135細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1143細胞、Pa14C細胞、OCI-Ly19細胞
hTERT-HPNE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-8/ADR細胞、LUDLU1細胞、Lewis lung carcinoma細胞
NCI H2106細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-SF-21細胞、Human podocyte細胞、TE671/RD細胞
PC-3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Murine Lung Epithelial-12細胞、NCIH128細胞、8226/S細胞
RAW-264.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1937細胞、G361細胞、NCIH2029細胞
ssMCF-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-C1細胞、NCI.H522細胞、AZ 521細胞
Human Pancreatic Duct Epithelial細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293H細胞、MDA415細胞、HPAC細胞
KYSE-140 epithelioid cells人食管鱗癌細胞系
B-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-738細胞、Hs578Bst細胞、H-2452細胞
RBSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP-C4-2細胞、MDA MB231細胞、HFT 8810細胞
NCI-H2052細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 180細胞、H22細胞、16HBE140細胞
WIL2-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 824細胞、TH1細胞、HRPEpiC細胞
SL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cates-1B細胞、NCI-H2347細胞、TFK1細胞
JB 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1417細胞、16-HBE細胞、FC33細胞
JB 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1417細胞、16-HBE細胞、FC33細胞
Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIM 1215細胞、HMC-1細胞、HuH28細胞
SNT-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero E-6細胞、HPAEC細胞、HET-1A細胞
J-111細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero 76 clone E6細胞、LAD2細胞、HT-22細胞
RPMI-2650細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-021細胞、NHLF細胞、H-1648細胞
Hopkins-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKBr3細胞、H1650細胞、Panc 4.03細胞
MCA205細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB-6細胞、COLO 320DM細胞、293c18細胞
Y3-Ag 1.2.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：0V-1063細胞、DU_145細胞、ECC-10細胞
H-1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUCEC細胞、RCSMC細胞、SkChA-1細胞
B16-BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C6661細胞、COLO 357細胞、HLEC-B3細胞
U251細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞、H-2444細胞、B16-F10-BL6細胞
Colo741細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-410細胞、EnCa1細胞、TE671細胞
A875細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU182細胞、U2932細胞、H820細胞
T2 (174 x CEM.T2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bowes melanoma cells細胞、NCIH2347細胞、GP2d細胞
NK92MI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 450細胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞、Lu99A細胞
Tca-8113細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM12細胞、Hca-F細胞、NP-69細胞
Central Adrenergic TH-expressing a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC-11細胞、H-128細胞、LAPC4細胞
HNE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KOPN-8細胞、CL1.0細胞、Hepa 1-6細胞
NCIH2066細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-62細胞、hTERT-HME-1細胞、SUDHL10細胞
SNU387細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3L1細胞、SNU739細胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞
SupB15WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1944細胞、IGROV 1細胞、ME 180細胞
MDCC-MSB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-33-A細胞、RDES-1細胞、NCI-H1623細胞
MPASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc_03_27細胞、H-1672細胞、T-HSC細胞
Caco-2 BBe細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 6666細胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞、Colo-678細胞
TR 146細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1222細胞、SNB19細胞、KM H-2細胞
NCI-H1651細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco-2/ATCC細胞、NCI/ADRRES細胞、ARO 81-1細胞
CATH-a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M210B4細胞、HCFB（HCF）細胞、Hs-688A-T細胞
NCI-H1404細胞系相關(guān)產(chǎn)品：THP-1細胞、159PT細胞、XWLC-05細胞
NSH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：THC-8307細胞、LA-N-6細胞、HEK 293 EBNA細胞
OVCA 432細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YES2細胞、NT-2細胞、HOC細胞
Mouse Forestomach Carcinoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA 205細胞、GM00346B細胞、Capan-1細胞
MDA-MB 468細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U373細胞、SKMEL5細胞、ARPE19細胞
C4-2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-II-E-C3細胞、FRO81-2細胞、LCD細胞
MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHP-77細胞、JF305細胞、SKMEL28細胞
P3X63 AG 8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C33細胞、P-2003細胞、PANC-10-05細胞
Natural Killer-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BrCL15細胞、BEL7405細胞、H-865細胞
HCC1833細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBL-100細胞、NGEC細胞、HUT-125細胞
KE 37細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-4細胞、NCI-H747細胞、KP-N-RT細胞
MDA453細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EMT-6細胞、CEM clone 7細胞、P3/X63-Ag8細胞
LL/2 (LLC1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa229細胞、ROS 17/2.8細胞、LAN6細胞
SKOV-433細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1703細胞、Hs 729.T細胞、MC-26細胞
Toledo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G-361細胞、H-295細胞、KP4細胞
LOU-NH91細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-33細胞、MDA-MB-468細胞、RINm-5F細胞
SKMEL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL-60 Clone 15細胞、HCC1954BL細胞、CHO-Lec1細胞
ARH77細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-9細胞、SNU407細胞、P19細胞
KYSE-140 epithelioid cells人食管鱗癌細胞系
MRC-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1155細胞、Hep-3B細胞、SNU-C2A細胞
MCF12A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EST50細胞、P3-X63Ag8細胞、U2OS細胞
HS-940-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs940-T細胞、OCI-Ly7細胞、UMC-11細胞
NCI-H1792細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MA 104細胞、HOS-TE85細胞、CNLMG-B5537SKIN細胞
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