"IMR-32 Cell:人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞生長:貼壁 細(xì)胞背景資料:該細(xì)胞是1967年4月由NicholsWW,LeeJ和DwightS建立,來源于一名13月齡白人男嬰腹部腫塊,臨床診斷為神經(jīng)母細(xì)胞瘤,伴有極少部位的類器官樣分化。 Cattle chondrocytes細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L5178YR細(xì)胞、S37細(xì)胞、P3JHR1細(xì)胞 Kit225 K6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:2780細(xì)胞、PA12細(xì)胞、NCI-H508細(xì)胞 Hs675T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780/CP70細(xì)胞、Tu-177細(xì)胞、624 MEL細(xì)胞 H-2198細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMS-11細(xì)胞、NCCIT細(xì)胞、JJN-3細(xì)胞 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 IMR-32 Cell:人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系 細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)問題總結(jié):冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37°C水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化,并注意水面不可超過冷凍管蓋沿,否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預(yù)防冷凍管之爆裂;細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時,是否應(yīng)馬上去除DMSO?除少數(shù)特別注明對DMSO敏感之細(xì)胞外,絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞),在解凍之后,應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中,待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可,如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無法生長或貼附之問題;可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細(xì)胞大都無法立即適應(yīng),造成細(xì)胞無法存活;可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細(xì)胞無法存活;培養(yǎng)細(xì)胞時應(yīng)使用5%或10%CO2?或根本沒有影響?一般培養(yǎng)基中大都使用HCO3-/CO32-/H+作為pH的緩沖系統(tǒng),而培養(yǎng)基中NaHCO3的含量將決定細(xì)胞培養(yǎng)時應(yīng)使用的CO2濃度。當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO3含量為每公升3.7g時,細(xì)胞培養(yǎng)時應(yīng)使用10%CO2;當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO3為每公升1.5g時,則應(yīng)使用5%CO2培養(yǎng)細(xì)胞。何時須更換培養(yǎng)基?視細(xì)胞生長密度而定,或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上之更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。培養(yǎng)基中是否須添加抗生素?除于特殊篩選系統(tǒng)中外,一般正常培養(yǎng)狀態(tài)下,培養(yǎng)基中不應(yīng)添加任何抗生素。 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞傳代方法:1:2傳代 購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復(fù)雜,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過程錯誤;冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心;懸渾細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞;培養(yǎng)溫度使用錯誤;細(xì)胞置于-80℃太久等。建議嚴(yán)格參照ATCC的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇、凍存等工作。欲將一般動物細(xì)胞離心下來,其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細(xì)胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉(zhuǎn)速過高或離心時間過長都將造成細(xì)胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機(jī)轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部內(nèi)壁的距離;rpm為離心機(jī)每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來表示單位。 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 CCK81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLE-B3細(xì)胞、IOSE29細(xì)胞、NCI H23細(xì)胞 OCI-Ly 10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IEC 18細(xì)胞、HLE B-3細(xì)胞、WILL-2細(xì)胞 CEK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEAS 2B細(xì)胞、HS 445T細(xì)胞、Calu-1細(xì)胞 4T1-LUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL-92.1.7細(xì)胞、BT-325細(xì)胞、H650細(xì)胞 NCI-H-82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BMDC細(xì)胞、HOS-TE85細(xì)胞、M619細(xì)胞 細(xì)胞生長特性:貼壁生長 IMR-32 Cell:人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系 細(xì)胞株(系)的使用,為醫(yī)學(xué)研究和測試工作帶來了極大的方便。但細(xì)胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細(xì)胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細(xì)胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細(xì)胞失去原有的遺傳特性,有時還會由于細(xì)胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實(shí)際工作中常需凍存一定數(shù)量的細(xì)胞,以備替換使用。細(xì)胞冷凍與復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前,細(xì)胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護(hù)劑的緩慢冷凍法凍存細(xì)胞。細(xì)胞在不加任何保護(hù)劑的情況下直接冷凍,細(xì)胞內(nèi)外的水分會很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應(yīng)。如細(xì)胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高,pH值改變,部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性,引起細(xì)胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復(fù)合體也易破壞引起細(xì)胞膜通透性的改變,使細(xì)胞內(nèi)容物丟失。如果細(xì)胞內(nèi)冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細(xì)胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷,而致細(xì)胞死亡。因此,細(xì)胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細(xì)胞內(nèi)水分,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)分子量小,溶解度大,易穿透細(xì)胞,可以使冰點(diǎn)下降,提高細(xì)胞膜對水的通透性,且對細(xì)胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機(jī)會,從而減少冰晶對細(xì)胞的損傷。 細(xì)胞形態(tài)特性:存在兩種細(xì)胞類型,小的神經(jīng)母細(xì)胞樣細(xì)胞和大的透明成纖維樣細(xì)胞 BC-024細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGH-UI細(xì)胞、SUM 159細(xì)胞、MV-1-Lu細(xì)胞 MDCKII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H774細(xì)胞、EoL-1-cell細(xì)胞、HCE細(xì)胞 HL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HK-2 [Human kidney]細(xì)胞、H1792細(xì)胞、OCI-Ly7細(xì)胞 SUNE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D10G41細(xì)胞、SCC 15細(xì)胞、Hs822T細(xì)胞 HRA 19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細(xì)胞、NCI-H2444細(xì)胞、L02細(xì)胞 RGC-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16F0細(xì)胞、Human Epidermoid carcinoma #2細(xì)胞、A 72細(xì)胞 AN3CA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB 157細(xì)胞、C6661細(xì)胞、Rat podocyte細(xì)胞 IMR-32 Cell:人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系 Sp2/0-Ag-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1404細(xì)胞、SW 1463細(xì)胞、MCAEC細(xì)胞 BIC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1563細(xì)胞、Adeno 293細(xì)胞、Panc-3_27細(xì)胞 alphaTC1 Clone 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF.CEM細(xì)胞、HBE135-E6E7細(xì)胞、ZR-75-1細(xì)胞 NCI-441細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC-996細(xì)胞、HCC-1569細(xì)胞、A 253細(xì)胞 TFK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PNT1A細(xì)胞、MES-SA-Dx5細(xì)胞、MDA PCa 2b細(xì)胞 Walker/LLC-WRC256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:INS1-E細(xì)胞、CL1-0細(xì)胞、Vero 76 clone E-6細(xì)胞 NCI-H1092細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 2650細(xì)胞、COR-L105細(xì)胞、KOSC-2細(xì)胞 Rat-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMS18細(xì)胞、Kit225-K6細(xì)胞、526細(xì)胞 FRTL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-675-T細(xì)胞、P3X63Ag8.653細(xì)胞、SO-RB50細(xì)胞 FRTL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-675-T細(xì)胞、P3X63Ag8.653細(xì)胞、SO-RB50細(xì)胞 L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PMVEC細(xì)胞、DU-4475細(xì)胞、NCI-SNU-668細(xì)胞 MDCKII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H774細(xì)胞、EoL-1-cell細(xì)胞、HCE細(xì)胞 Malme-3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H920細(xì)胞、HEK-EBNA細(xì)胞、Hs 343.T細(xì)胞 MCF/Adr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE(2)M-17細(xì)胞、BEL-7404細(xì)胞、CCC-ESF-1細(xì)胞 VP 267細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細(xì)胞、ELD-1細(xì)胞、GM03190細(xì)胞 NIH-3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TM-4細(xì)胞、CAL-85-1細(xì)胞、HA1800細(xì)胞 UCD-MLA-144細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-900細(xì)胞、L132細(xì)胞、SK MEL 5細(xì)胞 TFK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ID8細(xì)胞、H520細(xì)胞、HCC1143細(xì)胞 NCTC clone 1469細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 729T細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-27細(xì)胞、WM 239細(xì)胞 OCI-Ly07細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-175細(xì)胞、Nthy-ori 3-1細(xì)胞、U118MG細(xì)胞 U-87 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAC細(xì)胞、L-6TG細(xì)胞、ST 486細(xì)胞 293 F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh-7.5.1細(xì)胞、RS4-11細(xì)胞、U87細(xì)胞 PC-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CWR-22rv1細(xì)胞、V79-GalK1細(xì)胞、JJN3細(xì)胞 AMC-HN8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs746T細(xì)胞、LTEP-a-2細(xì)胞、PC3M細(xì)胞 NCI-H2591細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML 12細(xì)胞、MC38細(xì)胞、Tu 212細(xì)胞 P3JHR1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEMC7細(xì)胞、ECC-10細(xì)胞、JB6Cl30細(xì)胞 ROS17/2.8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WERI細(xì)胞、HOS TE 85細(xì)胞、SKNAS細(xì)胞 Hs742T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo741細(xì)胞、CEM-C7細(xì)胞、SUM190PT細(xì)胞 H-220細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cor L51細(xì)胞、SV-HUC-1細(xì)胞、PK 15細(xì)胞 BPH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U118MG細(xì)胞、MDA-MB-435-S細(xì)胞、Lewis lung carcinoma line 1細(xì)胞 P3X63細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM3570細(xì)胞、L6565細(xì)胞、TE 354.T細(xì)胞 NCI522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-kb2細(xì)胞、Epithelioma Papulosum Cyprini細(xì)胞、OCI-LY-19細(xì)胞 GC-1 spg細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H3255細(xì)胞、CHL-CL-11細(xì)胞、NMC-G1細(xì)胞 CT26-clone 25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRCV細(xì)胞、Hce8693細(xì)胞、SF 539細(xì)胞 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