"IMR-32 Cell|人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：該細(xì)胞是１９６７年４月由NicholsWW,LeeJ和DwightS建立，來源于一名１３月齡白人男嬰腹部腫塊，臨床診斷為神經(jīng)母細(xì)胞瘤，伴有極少部位的類器官樣分化。

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過大，營(yíng)養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細(xì)胞和分化征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)。【操作步驟】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马?xiàng)】１)掌握HAO細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當(dāng)消化液濃度過GAO時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

MUTZ1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P3-X63Ag8細(xì)胞、Human Epithelioma-2細(xì)胞、HITT15細(xì)胞

J82 COT細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TE-1細(xì)胞、SF539細(xì)胞、H-647細(xì)胞

H441細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HHL5細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細(xì)胞、NP69細(xì)胞

HFL 1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MIA Paca2細(xì)胞、PE/CA-PJ34細(xì)胞、NUGC-2細(xì)胞

NCI-H87細(xì)胞類似產(chǎn)品：：T24細(xì)胞、SKRC-20細(xì)胞、Rat 2細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

IMR-32 Cell|人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長(zhǎng)角度來說，針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長(zhǎng)不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)不HAO》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過低，細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長(zhǎng)；4)胰酶消化時(shí)間過長(zhǎng)或過短：時(shí)間過長(zhǎng)，細(xì)胞死亡；時(shí)間過短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對(duì)性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經(jīng)過驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

CV-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CCD 1112SK細(xì)胞、HCPEpiC細(xì)胞、WiDrTC細(xì)胞

HFE-145細(xì)胞類似產(chǎn)品：：VSMC細(xì)胞、H1876細(xì)胞、T 84細(xì)胞

SUM-149細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RAMOS2G64C10細(xì)胞、HMEC-1細(xì)胞、KYSE-150細(xì)胞

RSC 96細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Ej138細(xì)胞、SKMEL-31細(xì)胞、IEC 18細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２傳代

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫

CV-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CCD 1112SK細(xì)胞、HCPEpiC細(xì)胞、WiDrTC細(xì)胞

HFE-145細(xì)胞類似產(chǎn)品：：VSMC細(xì)胞、H1876細(xì)胞、T 84細(xì)胞

SUM-149細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RAMOS2G64C10細(xì)胞、HMEC-1細(xì)胞、KYSE-150細(xì)胞

RSC 96細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Ej138細(xì)胞、SKMEL-31細(xì)胞、IEC 18細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

細(xì)胞傳代比例：對(duì)于有限細(xì)胞系，傳代時(shí)以二、四、八或十六倍(傳代比率分別是2、4、8和16)降低細(xì)胞密度，計(jì)算群體倍增數(shù)更容易(即分別是傳代比率2對(duì)應(yīng)1次倍增，4對(duì)應(yīng)2次倍增，8對(duì)應(yīng)3次倍增，16對(duì)應(yīng)4次倍增)；例如，一傳八的培養(yǎng)物需要3次倍增才能達(dá)到原來相同的細(xì)胞密度。脆弱的或生長(zhǎng)緩慢的細(xì)胞系通常一傳二，而有活力的，生長(zhǎng)快速的細(xì)胞系可以一傳八，甚至一傳十六。有些連續(xù)細(xì)胞系可一傳五十或一傳100。一旦細(xì)胞系變?yōu)檫B續(xù)細(xì)胞系(通常經(jīng)過150次或200次倍增以上)，細(xì)胞濃度是主要參數(shù)，培養(yǎng)濃度應(yīng)降至10(4)/ml--10(5)/ml之間?？蛇x擇傳代間隔合適的傳代比率或稀釋度，或許為1周或2周，同時(shí)要保證：細(xì)胞密度不可稀釋過低，使其延遲期合理(在24小時(shí)以內(nèi))，可重新進(jìn)入生長(zhǎng)周期；而且在下次傳代前不進(jìn)人平臺(tái)期。

CAL 27細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NIH:OVCAR-4細(xì)胞、OCI Ly19細(xì)胞、H1373細(xì)胞

MDAMB435細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH647細(xì)胞、PTK1細(xì)胞、UACC 812細(xì)胞

MH-S細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細(xì)胞、PC12(高分化)細(xì)胞、KE39細(xì)胞

UPCI-SCC-90細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OCI AML4細(xì)胞、SU-DHL-10細(xì)胞、HCCC-9810細(xì)胞

GM03569D細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MSTO-211H細(xì)胞、MDA MB 175 VII細(xì)胞、HL-60 clone15細(xì)胞

Pt K2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Mouse podocyte細(xì)胞、MHCC 97-H細(xì)胞、KM12細(xì)胞

CCLP-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NPC-TW-039細(xì)胞、CORL51細(xì)胞、A20細(xì)胞

T98細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUPB-15細(xì)胞、CF PAC-1細(xì)胞、MV-4-11細(xì)胞

NCI-HUT-596細(xì)胞類似產(chǎn)品：：675T細(xì)胞、A 253細(xì)胞、CWR22Rv1細(xì)胞

BV173細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RGC-5細(xì)胞、RBL.2H3細(xì)胞、HS-445細(xì)胞

IMR-32 Cell|人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞

H-1819細(xì)胞類似產(chǎn)品：：5637細(xì)胞、SKNDZ細(xì)胞、OCI-Ly3細(xì)胞

751細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-NEP-1細(xì)胞、H-1792細(xì)胞、RIN-14B細(xì)胞

A 549細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HLEC-SRA 01/04細(xì)胞、MMAc-SF細(xì)胞、MSB1細(xì)胞

NCI-H660細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-MEL5細(xì)胞、GM03573細(xì)胞、LS 1034細(xì)胞

SF-767細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNU251細(xì)胞、IOSE-Mar細(xì)胞、CT 26細(xì)胞

NIH:OVCAR4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Ly8細(xì)胞、CHL-1細(xì)胞、DK-MG細(xì)胞

T-47-D細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BTI-TN5B1-4細(xì)胞、Panc_08_13細(xì)胞、KMST6細(xì)胞

GM05372細(xì)胞類似產(chǎn)品：：J 774A.1細(xì)胞、HF-91細(xì)胞、FaDu細(xì)胞

MC 116細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GM06141細(xì)胞、KFB細(xì)胞、MH-S細(xì)胞

P3J-HR-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HFF1細(xì)胞、HIEC6細(xì)胞、MCF7-GFP細(xì)胞

HIT.T15細(xì)胞類似產(chǎn)品：：M3 Clone M-3細(xì)胞、H7721細(xì)胞、Capan 1細(xì)胞

GM02131A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：B16/F10細(xì)胞、PLC-8024細(xì)胞、MDA MB 453細(xì)胞

U251-MG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Leukemia L1210細(xì)胞、DMS-153細(xì)胞、CCD33Co細(xì)胞

526mel細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MC3T3-E1(C4)細(xì)胞、RPMI7951細(xì)胞、HD11細(xì)胞

C3H10T1/2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH1573細(xì)胞、PCI-04B細(xì)胞、HCEpiC細(xì)胞

NCIH378細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COLO320-DM細(xì)胞、COS-7細(xì)胞、EC9706細(xì)胞

FaDu細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Farage細(xì)胞、D-407細(xì)胞、SK-MES-1細(xì)胞

NCI-H78細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK LU 1細(xì)胞、PK-136細(xì)胞、HEL-1細(xì)胞

AC16 [Human hybrid]細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SU86.86細(xì)胞、L2細(xì)胞、L23/P細(xì)胞

COLO320HSR細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H2110細(xì)胞、SuDHL 4細(xì)胞、H2073細(xì)胞

C-26細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-878細(xì)胞、NS-1-Ag4-1細(xì)胞、J-774A.1細(xì)胞

HCCC-9810細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ES2細(xì)胞、CAL-148細(xì)胞、MDA-MB-231細(xì)胞

KYSE 510細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH1105細(xì)胞、RK 13細(xì)胞、Hs737T細(xì)胞

Ramos G6.C10細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW-579細(xì)胞、T-ALL-1細(xì)胞、MDA-MB-175VII細(xì)胞

BCaP-37細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCT-FET細(xì)胞、High Five細(xì)胞、H22-H8D8細(xì)胞

MAD109細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Karpas422細(xì)胞、S16細(xì)胞、Hs-940細(xì)胞

Transformed C3H Mouse Kidney-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW-1088細(xì)胞、NK92-MI細(xì)胞、HAEC細(xì)胞

BHT-101細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MSTO211H細(xì)胞、DV-90細(xì)胞、JeKo 1細(xì)胞

SupB15W細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNU387細(xì)胞、EOMA細(xì)胞、COLO-16細(xì)胞

IMR-32 Cell|人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞

HEK 293T/17細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKML-28細(xì)胞、FHs 74 Int細(xì)胞、BHT-101細(xì)胞

3T3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Me-Wo細(xì)胞、WERIRb1細(xì)胞、Line 207細(xì)胞

H661細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ABC1細(xì)胞、BHK21細(xì)胞、TSUpr1細(xì)胞

MADB106細(xì)胞類似產(chǎn)品：：JEG3細(xì)胞、SUM159PT細(xì)胞、Hs604T細(xì)胞

SK-N-BE-2c細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-1915細(xì)胞、Human Foreskin Fibroblast細(xì)胞、ABC-1細(xì)胞

University of Arizona Cell Culture-812細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WEHI 231細(xì)胞、HCC-1143細(xì)胞、NCIH460細(xì)胞

SCH細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUP T1細(xì)胞、Metastatic Variant 522細(xì)胞、DoHH-2細(xì)胞

Experimental Mammary Tumour-6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TE 354.T細(xì)胞、bEND.3細(xì)胞、QGY7703細(xì)胞

MV 4;11細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KYSE 140細(xì)胞、CV-1.K細(xì)胞、RAW2647細(xì)胞

NCIH2171細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CAL-148細(xì)胞、NCI-H2073細(xì)胞、LICR-LON-HN6細(xì)胞

MJ細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RN細(xì)胞、NCI-SNU-119細(xì)胞、Jurkat-FHCRC細(xì)胞

HCC1428細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P-388細(xì)胞、CTLL-2細(xì)胞、NR8383.1細(xì)胞

HCT8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P3 NS1 Ag4細(xì)胞、G361mel細(xì)胞、MDA MB231細(xì)胞

MC38細(xì)胞類似產(chǎn)品：：QG56細(xì)胞、H-1238細(xì)胞、OCM1A細(xì)胞

SK-MES細(xì)胞類似產(chǎn)品：：624-mel細(xì)胞、BBE細(xì)胞、MPP 89細(xì)胞

NCIH647細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Kit 225-K6細(xì)胞、Tca-83細(xì)胞、CX1細(xì)胞

KM932細(xì)胞類似產(chǎn)品：：T-24細(xì)胞、Caco-2細(xì)胞、HRC-99細(xì)胞

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