"IMR-32 cell line人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:該細(xì)胞是1967年4月由NicholsWW,LeeJ和DwightS建立,來源于一名13月齡白人男嬰腹部腫塊,臨床診斷為神經(jīng)母細(xì)胞瘤,伴有極少部位的類器官樣分化。
細(xì)胞傳代后放入培養(yǎng)箱沒有搖勻,或者放入時搖勻,但在細(xì)胞貼壁前,又移動了培養(yǎng)瓶,頻繁開關(guān)培養(yǎng)箱引起的振動或者培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液過少,培養(yǎng)箱擱板表面不平整,這些因素會導(dǎo)致細(xì)胞生長不均勻。研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。運輸過程對細(xì)胞有嚴(yán)重影響。解凍過程錯誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細(xì)胞置于–80°C 太久。一些懸浮細(xì)胞抱團生長是正?,F(xiàn)象,大部分懸浮細(xì)胞在細(xì)胞密度很高的情況下,很可能會出現(xiàn)部分細(xì)胞抱團生長的現(xiàn)象,聚團細(xì)胞很容易死亡并演化成絮狀物,殃及周圍的懸浮細(xì)胞,因此在培養(yǎng)懸浮細(xì)胞時需控制好細(xì)胞密度。如果出現(xiàn)了細(xì)胞團,可以通過細(xì)胞篩去掉部分較大的細(xì)胞團,也可以嘗試一下方法:將細(xì)胞懸液收集到15ml離心管中,靜置20min左右,小心取上層細(xì)胞上清培養(yǎng)(該方法只能去除部分較大的細(xì)胞團)。部分細(xì)胞本身存在一定的空泡(如HepG2,Ishikawa及一些耐藥株等),這個是正常現(xiàn)象。如果只有少數(shù)細(xì)胞有內(nèi)出現(xiàn)極少空泡,則很可能是細(xì)胞狀態(tài)不佳,可以通過調(diào)整血清濃度,控制消化,控制傳代比例及時間等方法來調(diào)整細(xì)胞狀態(tài);如果大部分細(xì)胞出現(xiàn)空泡,且單個細(xì)胞內(nèi)空泡數(shù)目偏多,則可能細(xì)胞代次較高,細(xì)胞老化所致,需更換代次較早的細(xì)胞。
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
IMR-32 cell line人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
細(xì)胞傳代培養(yǎng)的胰酶消化法:傳代培養(yǎng):是指細(xì)胞從一個培養(yǎng)瓶以1:2或1:2以上的比例轉(zhuǎn)移,接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。傳代細(xì)胞,可根據(jù)不同細(xì)胞采取不同的方法進行細(xì)胞傳代。貼壁生長的細(xì)胞用消化法傳代,部分貼壁的細(xì)胞用直接吹打或用硅膠軟刮的刮除法傳代。懸浮細(xì)胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進行傳代,或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進行傳代。實驗步驟:①入無菌室之前用肥皂洗手,再用75% 的酒精擦拭消毒雙手;②倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),確定細(xì)胞是否傳代及細(xì)胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液37℃下預(yù)熱;③超凈臺臺面應(yīng)整潔,用75%酒精棉球擦拭清潔;④打開超凈工作臺的紫外燈照射臺面20min左右,關(guān)閉紫外燈,打開風(fēng)機清潔空氣除去臭氧;⑤點燃酒精燈;取出無菌試管,巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內(nèi);⑥將培養(yǎng)用液瓶口用75%酒精消毒,過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上;⑦倒掉培養(yǎng)細(xì)胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用2-3ml Hanks液洗去殘留的就培養(yǎng)基,或用少量胰酶涮洗一下;⑧每個大培養(yǎng)瓶加入1ml胰酶,小培養(yǎng)瓶用量酌減,蓋好瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察。當(dāng)細(xì)胞收回突起變圓時立即翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶,使細(xì)胞脫離胰酶,然后將胰酶倒掉。注意勿使細(xì)胞提早脫落入消化液中;⑨加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基,反復(fù)吹打消化好的細(xì)胞使其脫壁并分散,再根據(jù)分傳瓶數(shù)補加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(7-10ml/大瓶;3-5ml/小瓶)制成細(xì)胞懸液,然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋好瓶蓋,適度擰緊后稍回轉(zhuǎn),以利于CO2的進入,將培養(yǎng)瓶放回CO2培養(yǎng)箱;⑩對懸浮培養(yǎng)細(xì)胞,步驟7-9不做。直接將細(xì)胞懸液進行離心去除舊培養(yǎng)基上清,加入新鮮培養(yǎng)基,然后分裝到各瓶中。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2傳代
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長特性:貼壁生長
絕大部分細(xì)胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可。吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足夠消化細(xì)胞。對于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞,連續(xù)這樣傳代,對細(xì)胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37℃消化。比較難消化的細(xì)胞(潤洗方法5min還不能消化),這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育。不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細(xì)胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細(xì)胞就是完全成單個細(xì)胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,尤其是腫瘤細(xì)胞的一個特性。如果和標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)不一致,那可能是自己沒消化好導(dǎo)致的,但如果消化方法正確,仍然成片分布,甚至完全吹打成單細(xì)胞懸液,貼壁后仍然成片分布,這是細(xì)胞的特性,是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布,你的細(xì)胞之后會對你越來越不好。
IMR-32 cell line人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:存在兩種細(xì)胞類型,小的神經(jīng)母細(xì)胞樣細(xì)胞和大的透明成纖維樣細(xì)胞
Potorous tridactylus Kidney 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE30細(xì)胞、RCC 7860細(xì)胞、Farage細(xì)胞
N1S1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTera2 cl.D1細(xì)胞、373MG細(xì)胞、RCF細(xì)胞
CMECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1573細(xì)胞、JHH2細(xì)胞、mREC細(xì)胞
MDAMB134VI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:R2C細(xì)胞、HCC0015細(xì)胞、RPMI 1846細(xì)胞
MDA MB 175 VII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細(xì)胞、H-1623細(xì)胞、TO 175.T細(xì)胞
KMH-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly1細(xì)胞、SJRH-30細(xì)胞、aTC1 Clone 6細(xì)胞
NCIH2052細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G361mel細(xì)胞、A10細(xì)胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細(xì)胞
PFSK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DC 2.4細(xì)胞、Hs-274-T細(xì)胞、TK 10細(xì)胞
COLO.205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3細(xì)胞、RCM1細(xì)胞、NCI-1155細(xì)胞
SK Mel 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR 5細(xì)胞、MUG-Chor1細(xì)胞、SW-579細(xì)胞
ChaGo K-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCH1細(xì)胞、HIT clone T15細(xì)胞、KYSE 510細(xì)胞
C666-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AM細(xì)胞、WI-38細(xì)胞、AU-Mel細(xì)胞
C643細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VCaP細(xì)胞、CL1細(xì)胞、Hepa1-6細(xì)胞
IMR-32 cell line人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
L929(NCTC)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-26細(xì)胞、GP-293細(xì)胞、AHH1細(xì)胞
LLC-PK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KHYG細(xì)胞、INS-1細(xì)胞、HEK293EBNA細(xì)胞
C-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC9細(xì)胞、JIMT細(xì)胞、GM-637細(xì)胞
C-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC9細(xì)胞、JIMT細(xì)胞、GM-637細(xì)胞
NCI-H2029細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ku812細(xì)胞、P30 OHK細(xì)胞、SK-NEP-1細(xì)胞
WILL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Baby Hamster Kidney from litter No. 21細(xì)胞、BMF細(xì)胞、NCIH2172細(xì)胞
AE 1201細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly10細(xì)胞、L-5178-Y細(xì)胞、SNU-1040細(xì)胞
Tca-83細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-33細(xì)胞、NCI-H1648細(xì)胞、NCI-H1355細(xì)胞
RPMI 1788細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ca Ski細(xì)胞、BIU-87/Adr細(xì)胞、GM637A細(xì)胞
PSN1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVEC4-10細(xì)胞、TOV21G細(xì)胞、DiFi細(xì)胞
A431細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS688AT細(xì)胞、H740細(xì)胞、HCC 94細(xì)胞
L-132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL851細(xì)胞、EVSA/T細(xì)胞、OCI/AML5細(xì)胞
MV522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-28細(xì)胞、MCF-10A細(xì)胞、JROECL 33細(xì)胞
RPVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-149細(xì)胞、NCI-H1651細(xì)胞、NCIH1975細(xì)胞
LUDLU1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY3細(xì)胞、CT-26 WT細(xì)胞、K562細(xì)胞
A10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL2細(xì)胞、alphaTC clone 6細(xì)胞、OV90細(xì)胞
H-1105細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UWB1289細(xì)胞、Pt K2 (NBL-5)細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細(xì)胞
CT-26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Immortal Pig Intestinal-2I細(xì)胞、Hs-606-T細(xì)胞、A2780/Taxol細(xì)胞
786-O細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-19細(xì)胞、Y3M細(xì)胞、KU812-F細(xì)胞
H-1355細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HIE-2細(xì)胞、BERH-2細(xì)胞、UCLA NPA871細(xì)胞
KS-1 [Human glioblastoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL 7405細(xì)胞、BC-021細(xì)胞、TE-7細(xì)胞
Sf-21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KAT5細(xì)胞、MiaPaca.2細(xì)胞、PC10細(xì)胞
U343細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK AD293細(xì)胞、FO [Mouse myeloma]細(xì)胞、SKNBE(2)細(xì)胞
LAN6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-8細(xì)胞、AD-293細(xì)胞、U373細(xì)胞
PCI:SG231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC-1469細(xì)胞、NCI747細(xì)胞、A10細(xì)胞
HUTU80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-LMS-1細(xì)胞、IPECJ2細(xì)胞、PCI-SG231細(xì)胞
Line 870 Emory University-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD841CoTr細(xì)胞、U343細(xì)胞、Wien-133細(xì)胞
HCC 94細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:624mel細(xì)胞、SK-MEL 28細(xì)胞、hTERT RPE-1細(xì)胞
BrCL12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM2-4175細(xì)胞、HM06.A1細(xì)胞、EOL1細(xì)胞
CHP 212細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1806細(xì)胞、H-1155細(xì)胞、KMS-11細(xì)胞
Panc10.05細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUGCHOR1細(xì)胞、MLE-12細(xì)胞、Japanese Tissue Culture-28細(xì)胞
Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs822T細(xì)胞、SNU-449細(xì)胞、U266 B1細(xì)胞
HeLa-S3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細(xì)胞、P3-X63-Ag8細(xì)胞、SW 579細(xì)胞
HBE135-E6E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WERIRb1細(xì)胞、NFS 60細(xì)胞、GalK1細(xì)胞
Hs688(A)T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM266-4細(xì)胞、mousepodocyte細(xì)胞、HTR8/SVneo細(xì)胞
HeLa.S3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ND7/23細(xì)胞、Ocular Choroidal Melanoma-1細(xì)胞、BT474細(xì)胞
C32 mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MESSA-DX5細(xì)胞、C1R細(xì)胞、NGEC細(xì)胞
TYKnu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1915細(xì)胞、OVSAHO細(xì)胞、Fortner's melanotic melanoma #3細(xì)胞
RKO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM451Lu細(xì)胞、SKML-28細(xì)胞、HSC(Human Schwann)細(xì)胞
SW-1783細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRhK4細(xì)胞、CHOK1細(xì)胞、U14細(xì)胞
Normal fibroblast-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:58F細(xì)胞、PNT1A細(xì)胞、JVM-2細(xì)胞
JC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H157細(xì)胞、THEECs細(xì)胞、MDCKII-WT細(xì)胞
H295R-S1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AU565細(xì)胞、AN3-CA細(xì)胞、HEK-2細(xì)胞
IMR-32 cell line人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
HAC-84細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-3_27細(xì)胞、KNS62細(xì)胞、Hs-729-T細(xì)胞
H-2030細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCIAML4細(xì)胞、HCC827細(xì)胞、H-128細(xì)胞
COLO-HSR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H.Ep. #2細(xì)胞、HOC1細(xì)胞、rRTEC細(xì)胞
LK-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAEC細(xì)胞、COLO 829細(xì)胞、A1847細(xì)胞
OCI-AML-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU398細(xì)胞、CAL51細(xì)胞、RAMSCs細(xì)胞
WM-266-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-966SK細(xì)胞、SW982細(xì)胞、H1666_DA細(xì)胞
CMECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1573細(xì)胞、SUM-159細(xì)胞、H-1623細(xì)胞
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