pCMV-N-BFP (藍(lán)色熒光蛋白)

pCMV-N-BFP是信裕生物自行研發(fā)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)質(zhì)粒，用于表達(dá)N端含BFP(Blue Fluorescent Protein, 藍(lán)色熒光蛋白)標(biāo)簽的融合蛋白。該質(zhì)粒含有CMV啟動(dòng)子，可以高效啟動(dòng)目的蛋白在細(xì)胞中的表達(dá)。在多克隆位點(diǎn)的前面有一個(gè)BFP的完整編碼序列，因此在多克隆位點(diǎn)根據(jù)閱讀框插入目的基因就可以表達(dá)N端含有BFP標(biāo)簽的融合蛋白。利用BFP的熒光特性可以比較容易地觀察融合蛋白的表達(dá)水平和細(xì)胞內(nèi)定位，也可以利用BFP抗體來檢測或免疫沉淀融合蛋白。BFP與GFP高度相似，可嘗試用GFP抗體檢測BFP。該質(zhì)粒為卡那霉素抗性。轉(zhuǎn)染細(xì)胞后，可以使用G418篩選穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株。
pCMV-N-BFP質(zhì)粒的主要信息如下：

pCMV-N-BFP質(zhì)粒(5003bp)的圖譜如下：

pCMV-N-BFP的多克隆位點(diǎn)的詳細(xì)圖譜如下：

pCMV-N-BFP中沒有的酶切位點(diǎn)(Restriction enzymes that do not cut pCMV-N-BFP)包括：

pCMV-N-BFP中的單酶切位點(diǎn)(Restriction enzymes that cut pCMV-N-BFP once)包括：

pCMV-N-BFP質(zhì)粒中推薦使用的測序引物序列如下：
N-BFP primer (1284-1303): 5′-GCACCCAGTCCGCCCTGAGC-3′
T7 primer (1503-1524): 5′-GTAATACGACTCACTATAGGGC-3′
pCMV-N-BFP的全序列信息：D2701 pCMV-N-BFP-seq.txt
pCMV-N-BFP質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細(xì)胞后的表達(dá)效果請(qǐng)參考圖1。

圖1. pCMV-N-BFP質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細(xì)胞后的表達(dá)效果圖。左側(cè)為明場照片，右側(cè)為熒光照片。

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