pCMV-C-BFP (藍色熒光蛋白)
pCMV-C-BFP是信裕生物自行研發(fā)的哺乳動物細胞表達質(zhì)粒，用于表達C端含BFP(Blue FluorescentProtein,藍色熒光蛋白)標(biāo)
簽的融合蛋白。該質(zhì)粒含有CMV啟動子，可以高效啟動目的蛋白在細胞中的表達。在多克隆位點的后面有一個BFP的完整編碼序列，因此在多克隆位點根據(jù)閱讀框插入目的基因就可以表達C端含有BFP標(biāo)簽的融合蛋白。利用BFP的熒光特性可以比較容易地觀察融合蛋白的表達水平和細胞內(nèi)定位，也可以利用BFP抗體來檢測或免疫沉淀融合蛋白。BFP與GFP高度相似，可以嘗試用GFP抗體檢測BFP。該質(zhì)粒為卡那霉素抗性。轉(zhuǎn)染細胞后，可以使用G418篩選穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株。
pCMV-C-BFP質(zhì)粒的主要信息如下：
Feature Nucleotide
Position
T3 promoter and T3 primer binding site
620-639
Multiple cloning site
651-740
T7 promoter and T7 primer binding site
1510-1531
SV40 polyA signal
1543-1926
f1 origin of ss-DNA replication
2064-2370
Neomycin/kanamycin resistance ORF
2912-3703
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal
3704-4162
pCMV-C-BFP質(zhì)粒(5010bp)的圖譜如下：
pCMV-C-BFP的多克隆位點的詳細圖譜如下：
SacI SacII NotI XmaI BamHI HindIII
651
GAGCTCCACC
GCGGTGGCGG
CCGCTCTAGC
CCGGGCGGAT
CCAAGCTTCT
CTCGAGGTGG
CGCCACCGCC
GGCGAGATCG
GGCCCGCCTA
GGTTCGAAGA
EcoRI EcoRV SalI BglII XhoI XbaI BFP
701
GCAGGAATTC
GATATCGTCG
ACAGATCTCT
CGAGTCTAGA
CGTCCTTAAG
CTATAGCAGC
TGTCTAGAGA
GCTCAGATCT
751
AGGGCGAGGA
GCTGTTCACC
GGGGTGGTGC
CCATCCTGGT
TCCCGCTCCT
CGACAAGTGG
CCCCACCACG
GGTAGGACCA
801
GGCGACGTAA
ACGGCCACAA
GTTCAGCGTG
TCCGGCGAGG
CCGCTGCATT
TGCCGGTGTT
CAAGTCGCAC
AGGCCGCTCC
851
TGCCACCTAC
GGCAAGCTGA
CCCTGAAGTT
CATCTGCACC
ACGGTGGATG
CCGTTCGACT
GGGACTTCAA
GTAGACGTGG
901
TGCCCGTGCC
CTGGCCCACC
CTCGTGACCA
CCCTGAGCCA
ACGGGCACGG
GACCGGGTGG
GAGCACTGGT
GGGACTCGGT
951
TGCTTCAGCC
GCTACCCCGA
CCACATGAAG
CAGCACGACT
ACGAAGTCGG
CGATGGGGCT
GGTGTACTTC
GTCGTGCTGA
1001
CGCCATGCCC
GAAGGCTACG
TCCAGGAGCG
CACCATCTTC
GCGGTACGGG
CTTCCGATGC
AGGTCCTCGC
GTGGTAGAAG
1051
ACGGCAACTA
CAAGACCCGC
GCCGAGGTGA
AGTTCGAGGG
TGCCGTTGAT
GTTCTGGGCG
CGGCTCCACT
TCAAGCTCCC
1101
GTGAACCGCA
TCGAGCTGAA
GGGCATCGAC
TTCAAGGAGG
CACTTGGCGT
AGCTCGACTT
CCCGTAGCTG
AAGTTCCTCC
1151
CCTGGGGCAC
AAGCTGGAGT
ACAACTTCAA
CAGCCACAAC
GGACCCCGTG
TTCGACCTCA
TGTTGAAGTT
GTCGGTGTTG
1201
TGGCCGACAA
GCAGAAGAAC
GGCATCAAGG
CGAACTTCAA
ACCGGCTGTT
CGTCTTCTTG
CCGTAGTTCC
GCTTGAAGTT
1251
AACATCGAGG
ACGGCAGCGT
GCAGCTCGCC
GACCACTACC
TTGTAGCTCC
TGCCGTCGCA
CGTCGAGCGG
CTGGTGATGG
1301
CCCCATCGGC
GACGGCCCCG
TGCTGCTGCC
CGACAGCCAC
GGGGTAGCCG
CTGCCGGGGC
ACGACGACGG
GCTGTCGGTG
1351
CCCAGTCCGC
CCTGAGCAAA
GACCCCAACG
AGAAGCGCGA
GGGTCAGGCG
GGACTCGTTT
CTGGGGTTGC
TCTTCGCGCT
1401
CTGCTGGAGT
TCGTGACCGC
CGCCGGGATC
ACTCTCGGCA
GACGACCTCA
AGCACTGGCG
GCGGCCCTAG
TGAGAGCCGT
1451
GGGCCCGGTA
CCTTAATTAA
TTAAGGTACC
AGGTAAGTGT
CCCGGGCCAT
GGAATTAATT
AATTCCATGG
TCCATTCACA
pCMV-C-BFP中沒有的酶切位點(Restriction enzymes that do not cut pCMV-C-BFP)包括：
AclI
AfeI
AflII
AgeI
AhdI
AscI
AsiSI
BaeI
BbsI
BbvCI
BlpI
BmgBI
BsiWI
BsmBI
BspEI
BspQI
BssHII
BstEII
BstZ17I
EarI
EcoNI
FseI
NruI
PflMI
PmeI
PmlI
PpuMI
PshAI
PspXI
SapI
Sbf I
ScaI
SgrAI
SpeI
SwaI
pCMV-C-BFP中的單酶切位點(Restriction enzymes that cut pCMV-C-BFP once)包括：
NdeI
CA`TA,TG
240
ApaII
G,GGCC`C
1461
SnaBI
TAC|GTA
346
PvuI
CG,AT`CG
1541
CspCI
,NN`(N)11CAA(N)5GTGG(N)10,NN`
380
BclI
T`GATC,A
1697
NheI
G`CTAG,C
597
MfeI
C`AATT,G
1790
BmtI
G,CTAG`C
597
HpaI
GTT|AAC
1803
SacI
G,AGCT`C
651
BtsI
GCAGTG,NN`
1877
Eco53kI
GAG|CTC
653
MluI
A`CGCG,T
1926
BstXI
CCAN,NNNN`NTGG
659
BsaXI
,NNN`(N)9AC(N)5CTCC(N)7,NNN`
2087
SacII
CC,GC`GG
660
DraIII
CAC,NNN`GTG
2153
NotI
GC`GGCC,GC
668
SfiI
GGCCN,NNN`NGGCC
2812
TspMI
C`CCGG,G
680
StuI
AGG|CCT
2861
XmaI
C`CCGG,G
680
ClaI
AT`CG,AT
2880
SmaI
CCC|GGG
682
BspDI
AT`CG,AT
2880
BamHI
G`GATC,C
687
KasI
G`GCGC,C
3039
HindIII
A`AGCT,T
693
NarI
GG`CG,CC
3040
PstI
C,TGCA`G
699
SfoI
GGC|GCC
3041
EcoRI
G`AATT,C
705
PluTI
G,GCGC`C
3039
EcoRV
GAT|ATC
713
MscI
TGG|CCA
3122
SalI
G`TCGA,C
717
Tth111I
GACN`N,NGTC
3158
AccI
GT`MK,AC
718
PflFI
GACN`N,NGTC
3158
BglII
A`GATC,T
723
BsrDI
GCAATG,NN`
3271
XhoI
C`TCGA,G
729
RsrII
CG`GWC,CG
3556
PaeR7I
C`TCGA,G
729
BstBI
TT`CG,AA
3722
XbaI
T`CTAG,A
735
BsaI
GGTCTCN`NNNN,
4029
BcgI
,NN`(N)10CGA(N)6TGC(N)10,NN`
829
ApaLI
G`TGCA,C
4644
BsrGI
T`GTAC,A
1450
PciI
A`CATG,T
4958
pCMV-C-BFP質(zhì)粒中推薦使用的測序引物序列如下：
T3 primer (620-639): 5′-AATTAACCCTCACTAAAGGG-3′
C-BFP primer (852-873): 5′- GGGTCAGCTTGCCGTAGGTGGC -3′
pCMV-C-BFP的全序列信息：D2621 pCMV-C-BFP-seq.txt
pCMV-C-BFP質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細胞后的表達效果請參考圖1。
圖1. pCMV-C-BFP質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細胞后的表達效果圖。左側(cè)為明場照片，右側(cè)為熒光照片。
包裝清單：
KL-2621-1μg
pCMV-C-BFP (藍色熒光蛋白)
1μg
KL-2621-100μg
pCMV-C-BFP (藍色熒光蛋白)
100μg
保存條件：
-20℃保存。
注意事項：
本質(zhì)粒未經(jīng)信裕生物書面許可不得用于任何商業(yè)用途，也不得移交給訂貨人所在實驗室外的任何個人或單位。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
關(guān)鍵字： pCMV-C-BFP (藍色熒光蛋白)說明書；pCMV-C-BFP (藍色熒光蛋白)廠家
上?？道噬锟萍加邢薰臼且患壹邪l(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務(wù)于一體的一家生物科技企業(yè)，專營生化試劑、標(biāo)準(zhǔn)品、基因、蛋白、抗體、Elisa試劑盒、細胞生物學(xué)，分子生物學(xué)等高生物產(chǎn)品?？偛课挥谏虾?，并在北京、廣東，江西，吉林等全國30多個省市設(shè)有分公司和代理機構(gòu)。涉及的產(chǎn)品被中國科學(xué)院、清華、北大、復(fù)旦，上海交大，復(fù)旦醫(yī)學(xué)院，上海中醫(yī)藥大學(xué)，華東師范大學(xué)，第二軍醫(yī)大學(xué)，曙光醫(yī)院，浦東新區(qū)人民醫(yī)院等知名科研院所廣泛使用，可靠而穩(wěn)定的質(zhì)量和完善的售后服務(wù)確。