柱式DNA PAGE膠回收試劑盒
產(chǎn)品及特點(diǎn) 聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)是目前分離小片段 DNA 的主要方法,但是目前市場(chǎng)上沒有專門的產(chǎn)品用于從聚丙烯酰胺凝膠中回收 DNA 片段,本產(chǎn)品就是天澤基因?qū)iT為此用途而開發(fā)的、從 PAGE 凝膠中回收 DNA 片段的試劑盒。它具有下列特點(diǎn):
1. 高效,采用高效的溶液使 DNA 快速?gòu)?PAGE 中擴(kuò)散出來(lái),使回收效率 50-90%(跟片段大小和膠濃度等因素有關(guān))。
2. 可回收 50 bp-500 bp 的 DNA 片段(如果片段長(zhǎng)度超過 5100bp,建議使用瓊脂糖分離回收方法)。本產(chǎn)品也能回收單鏈 DNA。
3. 操作簡(jiǎn)單,整個(gè)過程只需要離心機(jī),不需要其他設(shè)備。
4. 純度高,采用能專一結(jié)合 DNA 的硅膠膜是雜質(zhì)和 DNA 分離,回收的 DNA 可直接用于酶切、連接、PCR 登等多種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。,
5. 儲(chǔ)存方便,試劑盒可以在室溫放置數(shù)月,不影響其質(zhì)量。
規(guī)格及成分 成 份 編 號(hào) 大紙盒包裝
溶液 A LM80202A 25 mL
溶液 B LM80202B 25 mL
通用溶膠液 LM60202A 50 mL
通用洗柱液 LM60408 50 mL
離心吸附柱 LM60911 50 套
DNA 洗脫液 3.0 LM170603 10 mL
使用手冊(cè) LM80202sc 1 份
運(yùn)輸及保存 常溫運(yùn)輸,4℃保存(長(zhǎng)期)或室溫保存(短期),有效期一年。
自備試劑 PAGE 膠
使用方法
1. 切取含 DNA 片段的 PAGE 凝膠(100 mg 左右,盡可能多地把多余的膠切除,否則會(huì)影響回收效率),放入 1.5 mL 離心管中,用移液槍頭盡可能搗碎(先在酒精燈上將槍頭的口燒密閉再用于搗碎),搗得越細(xì)越好。
2. 按重量比為 1:2 的比例加入溶液 A(100 mg PAGE 凝膠需要加入 200 uL 溶液 A)。
3. 將離心管水平放置并室溫?fù)u晃 1-10 個(gè)小時(shí)以讓 DNA 從 PAGE 凝膠中擴(kuò)散出來(lái)。如果 DNA 片段超過 500 bp,搖晃時(shí)間應(yīng)適當(dāng)延長(zhǎng)。提高溫度到 45-65℃,DNA 擴(kuò)散速度會(huì)增加。
4. 12000-15000 g 室溫離心 2 分鐘,將含 DNA 的上清液轉(zhuǎn)移到新的離心管中。
5. 再用 100 uL 的溶液 A 洗滌凝膠一次并與上步得到的上清合并。
6. 加入 900 uL 通用溶膠液和 0.3 mL 溶液 B,混合均勻后將離心管中的溶液分兩次轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中,每次轉(zhuǎn)移后都先靜置 3 分鐘,然后再 12000-15000g 離心 1 分鐘,倒掉收集管中的液體。
7. 加入 600-800 uL 通用洗柱液于離心柱中。
8. 12000-15000 g 離心 1 分鐘,倒棄收集管中的廢液。
9. 12000-15000 g 離心半分鐘以去除離心吸附柱中的殘留液體。
10. 將離心吸附柱置于一新的干凈的離心管(自備)中,加入 25-50 uL 通用洗脫液,靜置 3 分鐘。
11. 12000-15000 g 離心 1 分鐘,離心管底部所得溶液即為純化的 DNA 溶液,可立即用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)或者放冰箱長(zhǎng)期保存。
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