DNA PAGE膠回收
產(chǎn)品及特點(diǎn)本試劑盒是專門用于從PAGE凝膠中回收DNA片段和OLIGO的產(chǎn)品。它具有下列特點(diǎn):
1. 適合于回收100 bp以下的DNA片段,包括長(zhǎng)度在20nt左右的OLIGO。
2. 操作簡(jiǎn)單,只有浸泡和離心兩步。
3. 回收率在70%以上(具體跟DNA的長(zhǎng)度和浸泡的時(shí)間密切相關(guān))。
4. 純度高,本試劑盒回收的DNA和OLIGO可直接用于酶切、連接、PCR登等多種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
5. 本產(chǎn)品既能回收雙鏈DNA片段,也能回收單鏈DNA(包括OLIGO)。
規(guī)格及成分 成 份 編 號(hào) 小扁盒包裝
DNA PAGE 膠回收溶液 A LM70908a 15 mL
DNA PAGE 膠回收溶液 B LM70908b 30 mL
DNA PAGE 膠回收溶液 C LM70908c 30 mL
DNA 洗脫液 3.0 LM170603 1.5 mL
使用手冊(cè) 70908sc 1 份
運(yùn)輸及保存 常溫運(yùn)輸和保存(長(zhǎng)期需要放 4℃),有效期為一年。
自備試劑 PAGE 電泳試劑
使用方法
1. 進(jìn)行 PAGE 電泳,電泳后染色觀察 DNA 并確定需要回收的 DNA 條帶的位置。
2. 小心切取含 DNA 片段的 PAGE 凝膠。盡可能多地把多余的膠切除,否則多余的膠 會(huì)降低 DNA 的回收效率。膠的重量控制在 0.3 克以下為宜。
3. 將凝膠塊轉(zhuǎn)移到一個(gè)自備的、干凈的 1.5 mL 塑料離心管中并用移液槍頭充分將凝 膠塊搗碎。
4. 加入 0.3 mL DNA PAGE 膠回收溶液 A,將離心管平放在脫色搖床上搖晃 1-10 小 時(shí)。如果 DNA 片段長(zhǎng)度在 100 bp 左右,搖晃 1-3 小時(shí)就足夠;如果長(zhǎng)度在 300 bp 以上,搖晃過夜。
5. 12000-15000 g 離心 3-5 分鐘,小心將上清液(含 DNA 片段)轉(zhuǎn)移到一個(gè)自備 的 1.5 mL 塑料離心管中。在凝膠沉淀中加入 0.2mL DNA PAGE 膠回收溶液 A, 充 分吹打。
6. 12000-15000 g 室溫離心 3-5 分鐘,小心將上清液(含 DNA 片段)轉(zhuǎn)移到第 5 步所得的,已經(jīng)含有 0.3mL 上清液的塑料離心管中。此時(shí),管中的上清液共 0.5mL。
7. 在管中加入 2 倍體積(1mL)的 DNA PAGE 膠回收溶液 B,充分顛倒混勻。
8. 12000-15000 g 室溫離心 10-15 分鐘,DNA 將在管底形成細(xì)小的沉淀。小心移 棄上清。
9. 在管中加入 1 mL DNA PAGE 膠回收溶液 C, 振蕩一分鐘。12000-15000 g 室溫 離心 3-5 分鐘后小心移棄上清。
10. 開蓋室溫靜置,直到管中液體揮發(fā)。
11. 加入 20-50uL DNA 洗脫液 3.0 溶解管底的 DNA 沉淀,得到的溶液可以立即使用 或低溫保存。
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