??????T4 DNA Polymerase,即T4 DNA聚合酶,是一種模板依賴的DNA聚合酶,可以在結(jié)合有引物的單鏈DNA 模板上,從 5'→3'方向催化DNA合成反應(yīng)。T4?DNA?Polymerase具有3'→5'外切酶活性,但不具有5'→3'外切酶活性。 ??????特點:T4?DNA?Polymerase由于同時具有5'→3'DNA聚合酶活性和3'→5'DNA外切酶活性,可以用于將5'端突出末端補(bǔ)平或3'端突出末端削平。T4?DNA?Polymerase的3'→5'DNA外切酶活性對于單鏈DNA要比雙鏈DNA活性更高,即單鏈DNA要比雙鏈DNA中的非配對鏈部分更容易被T4?DNA?Polymerase所消化。T4?DNA?Polymerase的3'→5'外切酶活性比Klenow Fragment要高約200倍。 ??????用途:T4?DNA?Polymerase可用于催化以下反應(yīng):DNA 5'或3'突出末端的平滑化;通過置換反應(yīng)進(jìn)行標(biāo)記DNA探針合成;定點突變過程中第二鏈的合成;不依賴于連接反應(yīng)的PCR產(chǎn)物克隆。 ??????來源:本T4?DNA?Ligase由大腸桿菌表達(dá),表達(dá)基因的來源為T4嗜菌體。 ??????活性定義:37℃30分鐘時間內(nèi),催化10nmol脫氧核糖核苷酸(dNTPs)摻入到多聚核苷酸中所需的酶量定義為1個活性單位。 ??????活性檢測條件:67mM Tris-HCl(pH8.8),6.7mM MgCl2,1mM DTT,16.7mM(NH4)2SO4,0.2mg/ml BSA, 0.033mM of each dNTP,0.4MBq/ml[3H]-dTTP,0.2mM 熱變性且經(jīng)DNA酶部分消化過的小牛胸腺DNA。 ??????純度:不含DNA內(nèi)切酶,不含RNase。 ??????酶儲存溶液:20mM potassium phosphate(pH7.5),200mM KCl,2mM DTT,and 50% glycerol。 ??????Reaction?Buffer(5X):335mM?Tris-HCl(pH8.8?at?25℃),33mM?MgCl2,5mM?DTT,84mM (NH4)2SO4。 ??????緩沖液兼容性:在碧云天的內(nèi)切酶反應(yīng)緩沖液1X O、1X R、1X Y、2X Y中的活性為100%,在1X B、1X G中的活性為75-100%。 ??????失活或抑制:70℃加熱10分鐘可使T4?DNA?Polymerase失活。金屬離子螯合劑可以抑制T4?DNA Polymerase的活性。 包裝清單:
保存條件: ??????-20℃保存。 注意事項:? ??????酶使用時宜存放在冰盒內(nèi)或冰浴上,使用完畢后宜立即放置于-20℃保存。 ??????本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。 ??????為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。?
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