產(chǎn)品描述
T4 DNA Ligase在ATP做輔酶的情況下可催化dsDNA 平末端或粘性末端相鄰核酸的5’磷酸末端和3’羥基末端形成磷酸二酯鍵,還可催化RNA和雙鏈中的ssDNA 或RNA 鏈連接,但不能催化全單鏈核苷酸間的連接。
本品主要適用于標(biāo)記RNA 3’-末端,環(huán)化RNA和DNA寡聚核苷酸以及克隆cDNA等核酸操作。
運(yùn)輸和保存方法
冰袋運(yùn)輸。-20℃保存。
單位定義
在20 μl的連接反應(yīng)體系中,6 μg的λDNA-Hind Ⅲ 分解物在16℃下反應(yīng)30 min時(shí),催化50%以上的DNA片段發(fā)生連接所需要的酶量定義為1個(gè)活性單位(U)。
質(zhì)量控制
核酸外切酶殘留檢測(cè):2000 U的本品和0.6 μg λ-Hind III在74℃下反應(yīng)1小時(shí),DNA的電泳譜帶不發(fā)生變化。
核酸內(nèi)切酶殘留檢測(cè):2000 U的本品和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA在74℃下反應(yīng)1小時(shí),DNA電泳譜帶不發(fā)生變化。
注意事項(xiàng)
1)Buffer在融解時(shí),如果出現(xiàn)少量沉淀屬正常現(xiàn)象,請(qǐng)顛倒混勻后使用。
2)為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
上海翊圣生物科技有限公司
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